2026年液相色谱维保及期间核查试题（附答案）

2026年液相色谱维保及期间核查试题（附答案）一、单项选择题（共15题，每题2分，总计30分）1.采用反相C18色谱柱开展常规分析时，正确的色谱柱保存溶剂是（）A.100%纯水B.100%甲醇C.5%甲醇水溶液D.含10%缓冲盐的甲醇溶液答案：B。反相C18柱长期保存需使用纯有机溶剂，避免水相长期滞留导致固定相疏水塌陷；100%纯水会加速固定相脱落，低比例甲醇水易滋生微生物，含缓冲盐的溶液会析出盐晶磨损柱塞杆、堵塞流路。2.液相色谱系统开展泵流量准确度核查时，需在稳定流速下收集流动相并称重，实验室温度20℃时纯水的密度取（）A.0.9982g/mLB.1.0000g/mLC.0.9970g/mLD.1.0012g/mL答案：A。流量核查需精确换算体积，20℃常压下纯水密度为0.9982g/mL，称量值除以密度得到实际流出体积，与设定体积的偏差需≤±1%。3.下列检测器中，开展期间核查时需验证波长准确度的是（）A.示差折光检测器B.蒸发光散射检测器C.紫外-可见分光检测器D.质谱检测器答案：C。紫外-可见检测器依靠特定波长下的吸光度响应实现定量，波长偏移会直接导致响应值偏差；示差、蒸发光散射检测器为通用型检测器，无波长选择功能，无需核查波长准确度。4.液相色谱自动进样器残留核查的合格判定标准是：高浓度对照品进样后，紧接着进样空白溶剂，空白中目标物的峰面积不得超过对照品峰面积的（）A.0.1%B.0.5%C.1.0%D.2.0%答案：B。自动进样器残留过大会导致高浓度样品后低浓度样品定量偏高，常规核查要求残留峰面积≤高浓度对照的0.5%，痕量分析场景可加严至0.1%。5.当液相色谱单向阀出现宝石球粘连、密封不严故障时，最典型的故障现象是（）A.系统压力持续升高B.流量不稳定、压力波动幅度超过0.5MPaC.基线出现规律性毛刺D.保留时间持续提前答案：B。单向阀密封失效会导致流动相倒流，直接造成流量输出不稳定、压力大幅波动；压力持续升高多为流路堵塞，基线毛刺多为流通池污染或泵头有气泡，保留时间提前多为流动相比例偏差或柱温异常。6.采用萘-甲醇标准溶液核查紫外检测器基线噪声时，需待系统稳定后连续记录基线（），取基线波动的最大峰-峰值作为噪声值A.5minB.15minC.30minD.60min答案：C。基线噪声核查需足够长的记录时间覆盖随机波动，规范要求连续记录30min，普通分析场景噪声值≤±1×10^-5AU为合格。7.液相色谱柱温箱温度准确度核查时，温度传感器需放置在柱温箱腔体中央（避开金属壁、加热模块），设定温度为30℃、40℃时，实际温度与设定值的允许偏差为（）A.±0.5℃B.±1℃C.±2℃D.±3℃答案：B。柱温波动会直接影响保留时间稳定性，常规柱温箱温度准确度允许偏差为±1℃，柱温稳定性偏差需≤±0.5℃/h。8.流动相使用0.45μm水系滤膜过滤后，仍需进行在线脱气，下列脱气方式中脱气效率最高、对流动相组成影响最小的是（）A.超声脱气B.氦气鼓泡脱气C.在线真空脱气D.加热煮沸脱气答案：C。在线真空脱气可持续脱除流动相中溶解的气体，不会改变流动相组成、无挥发性组分损失，脱气效率稳定性优于超声、氦气鼓泡；加热煮沸会导致有机溶剂挥发，改变流动相比例。9.液相色谱进样针清洗设置不当会导致交叉污染，若分析项目为强疏水性化合物，应优先选择的清洗液组合是（）A.强洗为100%纯水，弱洗为100%甲醇B.强洗为100%异丙醇，弱洗为初始流动相C.强洗为50%甲醇水，弱洗为纯水D.强洗为缓冲盐水溶液，弱洗为乙腈答案：B。强疏水性化合物易残留在进样针内壁、转子密封圈缝隙中，异丙醇对强疏水性组分溶解性强，可有效降低残留；初始流动相作为弱洗液可避免强溶剂进样导致的色谱峰形畸变。10.示差折光检测器开展期间核查时，必须保证的核心条件是（）A.流动相需充分脱气并严格控温B.检测波长设置为254nmC.柱温设置为30℃D.流动相流速设置为1.0mL/min答案：A。示差折光检测器基于折光率差异响应，对温度、流动相组成变化极为敏感，流动相未充分脱气产生的气泡、温度波动超过0.1℃会导致基线剧烈波动，无法正常检测。11.液相色谱系统压力异常升高时，下列排查顺序符合从易到难、从低耗材成本到高成本原则的是（）A.色谱柱→在线过滤器→进样器→泵头单向阀B.在线过滤器/保护柱→色谱柱→进样器→检测器流通池C.检测器流通池→色谱柱→泵头→进样器D.泵头密封垫→色谱柱→在线过滤器→进样器答案：B。压力升高本质是流路堵塞，优先排查最前端、易更换、低成本的部件：在线过滤器滤芯、保护柱为最常见堵塞点，其次为分析柱，再依次排查进样器流路、检测器流通池，最后排查泵内部件。12.下列关于液相色谱氘灯更换的判定条件，说法错误的是（）A.氘灯累计使用时间超过标称寿命（通常2000h）时必须立即强制更换，无需核查性能B.氘灯能量低于初始能量的50%，且基线噪声明显增大时需更换C.波长准确度偏差超过±2nm且校准后无法恢复时需更换D.氘灯出现灯丝氧化、点灯光亮异常时需更换答案：A。氘灯寿命为参考值，若累计使用时间超过标称值但能量、波长准确度、噪声指标仍符合要求，可继续使用，无需强制更换；其余选项均为氘灯更换的合理判定依据。13.自动进样器定量环体积准确度核查时，通常采用称量法验证，50μL定量环的实际体积允许偏差为（）A.±0.5%B.±1%C.±2%D.±5%答案：B。定量环体积直接影响进样准确性，常规定量环体积允许偏差为±1%，偏差过大需更换定量环或校准进样程序。14.液相色谱系统开展梯度准确度核查时，通常采用在水相中添加0.1%丙酮作为示踪物质，在254nm波长下采集梯度洗脱基线，梯度比例变化时的实际保留时间与设定时间的允许偏差为（）A.±0.5minB.±1minC.±2minD.±3min答案：B。梯度延迟体积正常的系统，梯度比例实际切换时间与设定时间偏差≤1min为合格，偏差过大需排查比例阀故障、流路延迟体积异常问题。15.色谱柱长期不使用时，正确的存放方式是（）A.拆下色谱柱后将两端敞口放置在通风干燥处B.用适宜的保存溶剂冲洗后拧紧两端堵头，放置在阴凉干燥、无振动、无腐蚀性气体的环境中C.放在柱温箱中保持40℃恒温存放D.用纯水冲洗后保存在纯水中放置在4℃冰箱中答案：B。色谱柱保存需彻底替换含盐流动相，注入适宜保存溶剂后拧紧堵头，避免溶剂挥发、固定相干涸，常温下阴凉处存放即可；低温可能导致溶剂凝固损坏柱床，高温会加速固定相降解，敞口放置会导致溶剂挥发、填料干裂。二、多项选择题（共10题，每题3分，总计30分，多选、少选、错选均不得分）1.下列属于液相色谱系统日常预防性维保内容的有（）A.每日使用后冲洗流路中的缓冲盐，避免盐析出B.每月清洗在线过滤器滤芯，检查泵头是否漏液C.每季度核查氘灯能量、校准波长D.每年更换泵密封垫、主动阀阀芯，开展全面性能验证E.出现压力升高时再更换保护柱答案：ABCD。预防性维保需按周期主动开展，E选项为故障发生后的被动维修，不属于预防性维保范畴。2.液相色谱期间核查的核心目的包括（）A.在两次正式校准/检定周期之间确认设备性能符合检测要求B.及时发现设备性能漂移，避免不合格检测数据出具C.替代法定计量机构的年度强制检定D.验证设备维修、搬迁后的性能状态E.延长设备的正式校准周期答案：ABD。期间核查不能替代法定强制检定，校准周期需根据计量要求、设备稳定性确定，不能随意通过期间核查延长，C、E错误。3.下列哪些因素会导致液相色谱保留时间重复性不满足要求（RSD＞1.0%）（）A.流动相未平衡足够时间，柱温波动超过±1℃B.泵流量不稳定，比例阀密封不严导致流动相比例偏差C.色谱柱柱效下降，固定相流失严重D.系统流路存在漏液点E.进样量偏差超过允许范围答案：ABCD。进样量偏差主要影响峰面积重复性，对保留时间无直接影响，E错误；其余选项均会直接改变组分在色谱柱中的保留行为，导致保留时间波动。4.关于缓冲盐流动相的使用，下列操作规范的有（）A.缓冲盐溶液需现配现用，使用前经0.45μm水系滤膜过滤B.使用含缓冲盐的流动相前，先用100%纯甲醇/乙腈冲洗流路30min再切换缓冲盐C.分析结束后，先用高比例水相（10%~20%甲醇/乙腈水）冲洗流路1h以上，彻底置换缓冲盐后再换纯有机溶剂保存D.缓冲盐流动相可直接接入质谱检测器使用E.缓冲盐浓度通常控制在10~50mmol/L，避免浓度过高导致盐析出答案：ACE。缓冲盐与纯有机溶剂直接接触会快速析出盐晶，因此使用前需用高比例水相过渡，B错误；非挥发性缓冲盐（如磷酸盐）禁止接入质谱，会污染离子源，D错误。5.紫外检测器基线噪声过大的可能原因有（）A.流通池污染，有样品残留B.流动相中有溶解气体，产生微小气泡C.氘灯能量不足，光源不稳定D.色谱柱未充分平衡，固定相微量流失E.检测波长设置错误答案：ABCD。检测波长设置错误会导致响应值偏低或无响应，不会直接导致基线噪声增大，E错误。6.液相色谱泵漏液的常见故障点有（）A.泵柱塞杆密封垫磨损B.单向阀密封圈老化C.排液阀阀芯密封不严D.流路接头松动或刃口损坏E.流动相瓶内滤头堵塞答案：ABCD。流动相滤头堵塞会导致泵吸液不足、压力波动，不会直接造成漏液，E错误。7.下列属于液相色谱系统期间核查必做项目的有（）A.泵流量准确度与稳定性B.检测器基线噪声、漂移C.自动进样器进样精密度、残留D.柱温箱温度准确度E.整机外观清洁度检查答案：ABCD。外观清洁属于日常维护内容，不属于期间核查的性能验证项目，E错误。8.蒸发光散射检测器性能核查的关键指标包括（）A.基线噪声与漂移B.响应精密度C.雾化温度、载气流速稳定性D.波长准确度E.检测限答案：ABCE。蒸发光散射检测器为通用型质量检测器，无单色器及波长选择部件，无需核查波长准确度，D错误。9.色谱柱柱效下降、峰形拖尾的常见原因有（）A.色谱柱进样端筛板堵塞，有蛋白、强保留污染物累积B.流动相pH超出色谱柱耐受范围，导致固定相键合相流失C.色谱柱安装时接头长度不匹配，造成柱外死体积过大D.进样量超过色谱柱柱容量E.流动相流速过高答案：ABCD。流速过高会导致柱压升高、保留时间提前，不会直接造成柱效下降、峰形拖尾，E错误；柱效下降时可通过反向冲洗、再生恢复部分性能，若再生无效则需更换色谱柱。10.下列关于液相色谱维保操作的安全规范，说法正确的有（）A.更换流路部件、维护泵头时需先关闭仪器电源，避免液体喷溅造成电路短路B.接触甲醇、乙腈、异丙醇等有机溶剂时需佩戴丁腈手套，在通风橱内操作C.氘灯更换后需立即直视灯窗检查点亮状态，确认是否安装到位D.废弃的流动相、清洗废液需分类收集，交由有资质的单位处置，禁止直接倒入下水道E.仪器发生漏液时需第一时间关闭泵、切断电源，清理漏液后再排查故障点答案：ABDE。氘灯点亮时会发出强紫外线，直视会造成眼部损伤，需待氘灯点亮稳定后通过仪器状态界面确认能量，禁止直视光源，C错误。三、判断题（共10题，每题1分，总计10分）1.液相色谱在线过滤器滤芯堵塞后，可采用超声清洗后重复使用，无需定期更换。（）答案：×。在线过滤器滤芯超声清洗后间隙会变大，拦截颗粒物的效果下降，建议每1~3个月直接更换新滤芯，避免颗粒物进入色谱柱造成不可逆堵塞。2.期间核查仅需要在仪器两次检定之间开展一次即可，无需根据使用频率调整核查频次。（）答案：×。期间核查频次需根据设备使用频率、检测项目精密度要求、设备故障率确定，高频使用、开展痕量分析的设备建议每3个月开展一次核查，维修、搬迁后需额外加做核查。3.反相色谱柱使用100%纯水冲洗时，流速设置越高越容易造成固定相疏水塌陷。（）答案：√。高流速下纯水对C18固定相的润湿性差，会导致键合相倒伏、疏水塌陷，造成柱效快速下降，因此水相比例较高的流动相冲洗时需控制流速不超过1.0mL/min，且避免长时间冲洗。4.自动进样器进样瓶中的样品液位高度过低，会导致进样针吸液时吸入空气，造成进样精密度下降。（）答案：√。进样针插入样品瓶的深度固定，液位低于进样针吸液口时会吸入气泡，导致实际进样量不足，峰面积RSD偏大。5.示差折光检测器可用于梯度洗脱模式下的样品分析。（）答案：×。示差折光检测器对流动相组成变化极为敏感，梯度洗脱时流动相比例持续变化会导致基线持续漂移，无法正常积分，因此仅适用于等度洗脱模式。6.液相色谱流通池污染时，可采用异丙醇、甲醇-盐酸溶液依次低流速冲洗，冲洗时需关闭检测器光源，避免损坏流通池。（）答案：√。流通池内的强保留污染物可采用强溶剂、稀酸冲洗，冲洗时保持流速0.2~0.5mL/min，避免压力过高压碎流通池镜片。7.泵流量核查时，无需考虑实验室温度、大气压对称重结果的影响，直接用称量质量除以设定体积计算偏差即可。（）答案：×。流量核查需根据测试温度下的流动相密度换算实际体积，若使用甲醇等有机溶剂，还需考虑挥发造成的称量误差，需在收集容器上加盖密封。8.新安装的色谱柱使用前需按照柱说明书要求用低流速平衡至柱压、基线稳定，不可直接设置高流速冲洗，避免柱床松动。（）答案：√。新色谱柱储存溶剂与实验室环境温度存在差异，直接高流速冲洗会导致柱床压力骤升，造成柱床塌陷，通常先以0.2mL/min流速冲洗10min，再逐步提升流速至工作流速。9.液相色谱基线出现周期性的尖峰噪声，一定是检测器氘灯损坏导致的。（）答案：×。周期性尖峰多为泵头有气泡、柱塞杆密封垫磨损产生微小颗粒、流路存在微小漏液点导致，氘灯损坏会导致基线整体噪声增大、漂移，不会产生规律性周期尖峰。10.更换自动进样器转子密封圈后，需开展进样残留、精密度核查，确认性能符合要求后方可开展样品检测。（）答案：√。转子密封圈更换后可能存在安装错位、密封不严的问题，需通过性能核查确认进样系统无异常，避免出现进样偏差、交叉污染问题。四、简答题（共2题，每题10分，总计20分）1.请简述液相色谱系统年度全面维保的核心流程及操作要点。答案：年度全面维保需按流路顺序逐一开展，核心流程及要点如下：（1）流动相供给系统维护（2分）：更换所有流动相瓶内的沉子滤头，采用异丙醇超声清洗滤头表面的微生物、污染物，若滤头发黑、堵塞严重直接更换；检查流动相管路是否有老化、开裂，裁剪老化管段重新连接，避免管路脱落、漏液；检查在线真空脱气机腔体内是否有漏液，测试脱气效率，确保无气泡进入泵系统。（2）泵系统维护（2分）：更换柱塞杆密封垫、密封圈，检查柱塞杆表面是否有划痕，若划痕明显需同步更换柱塞杆；拆下单向阀，采用异丙醇超声清洗宝石球、阀座，清除盐晶、颗粒物残留，若清洗后仍存在流量不稳定问题需更换单向阀阀芯；更换排液阀内的过滤白头，检查比例阀密封性能，开展梯度比例准确度测试，确保比例偏差≤1%。（3）进样系统维护（2分）：更换自动进样器转子密封圈、针座，清洗进样针内壁、外壁，检查进样针是否有堵塞、弯曲，若存在进样吸液不足问题需更换进样针；校准进样针深度，验证定量环体积准确度，开展残留、精密度测试，确保进样峰面积RSD≤0.5%，残留≤0.5%。（4）柱温箱及色谱柱维护（1分）：校准柱温箱温度传感器，验证温度准确度与稳定性；检查柱温箱加热模块、风扇是否正常，清理腔体内的灰尘、漏液残留；对在用色谱柱开展柱效、拖尾因子测试，对柱效下降的色谱柱进行再生，不符合要求的色谱柱及时报废更换。（5）检测器系统维护（2分）：检查氘灯使用时间、能量值，若能量不足、波长偏差超标及时更换氘灯，校准波长准确度；拆洗检测器流通池，清除池内残留的强保留污染物，测试基线噪声、漂移、检测限指标，确保符合检测要求；检查蒸发光散射检测器的雾化器、蒸发管，清除管内残留的盐分、污染物，校准载气流速、雾化温度。（6）整机性能验证（1分）：所有部件维护完成后，采用标准物质（萘、咖啡因等）测试系统适用性，连续进样6针对照品，验证保留时间RSD、峰面积RSD、柱效、拖尾因子等指标，全部符合要求后投入使用。2.请简述液相色谱两次检定周期内开展期间核查的关键步骤及合格判定标准。答案：期间核查需覆盖仪器核心性能模块，关键步骤及判定标准如下：（1）泵流量准确度与稳定性核查（2分）：将流动相切换为甲醇，设置流速1.0mL/min，待系统压力稳定后，在流路出口放置加盖的称量瓶，连续收集10min流出液，采用万分之一分析天平称重，根据测试温度下甲醇密度（20℃时为0.7913g/mL）换算实际流出体积，重复测量3次。合格标准：流量设定值误差≤±1%，流量稳定性RSD≤0.5%。（2）柱温箱温度核查（1分）：将校准后的温度探头放入柱温箱腔体中央，分别设定30℃、40℃，待温度稳定10min后记录实际温度，每个温度点连续记录10min。合格标准：温度示值误差≤±1℃，温度稳定性≤±0.5℃/h。（3）检测器性能核查（2分）：①波长准确度：采用氘灯特征谱线（656.1nm、486.0nm、254.0nm）核查波长偏差，有条件的可采用紫外标准溶液（重铬酸钾-高氯酸溶液）验证吸收峰位置；②基线噪声与漂移：系统充分平衡后，采用萘-甲醇溶液作为测试液，设置检测波长254nm，流速1.0mL/min，连续记录30min基线。合格标准：波长准确度偏差≤±2nm；基线噪声≤±1×10^-5AU，基线漂移≤1×10^-4AU/h。（4）自动进样器性能核查（2分）：①进样精密度：取浓度为10μg/mL的萘-甲醇标准溶液，连续进样6次，每次进样10μL，记录峰面积、保留时间；②残留核查：进样1000μg/mL的高浓度萘标准溶液后，连续进样3针空白甲醇，记录空白中萘的峰面积。合格标准：保留时间RSD≤1.0%，峰面积RSD≤1.0%；空白中萘峰面积≤高浓度对照品峰面积的0.5%。（5）系统适用性核查（2分）：将C18色谱柱安装到位，采用甲醇-水（80:20）为流动相，流速1.0mL/min，柱温30℃，检测波长254nm，进样10μL浓度为10μg/mL的萘-甲醇溶液，连续进样6针。合格标准：色谱柱理论塔板数按萘峰计算≥5000，拖尾因子在0.9~1.1范围内，相邻峰无干扰，压力波动≤0.3MPa。（6）核查结果处理（1分）：所有项目全部满足要求则判定设备期间核查合格，可继续使用；若某一项目不符合要求，需排查原因、维护校准后重新核查，仍不合格的设备需停止使用，联系维修或计量校准，经确认性能恢复后方可投入使用。五、案例分析题（共1题，总计10分）某实验室2025年12月新采购一台超高效液相色谱仪（配置紫外检测器、自动进样器、柱温箱），2026年3月日常检测时发现以下异常：连续进样6针对照品时，保留时间RSD为2.8%，峰面积RSD为3.2%，系统压力较上月同期升高2.2MPa，进样高浓度样品后空白中目标物残留为2.1%，基线噪声较之前增大3倍。请结合维保及核查知识，分析故障原因并给出对应的排查解决流程。答案：该故障为多部件性能异常叠加导致，需按照从流路上游