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第52讲动物细胞工程考点1动物细胞培养一、动物细胞培养1.原理:________。2.地位:动物细胞工程常用的技术包括动物细胞培养、动物细胞核移植、________________等,其中________________是动物细胞工程的基础。3.培养条件(1)营养:除糖类、氨基酸、无机盐和维生素等细胞所需的营养物质外,通常还需加入________等一些天然成分。(2)无菌、无毒的环境:对培养液和所有培养用具进行________处理以及在无菌环境下进行操作。培养液需要________,以便清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。(3)温度、pH和渗透压:哺乳动物细胞培养的温度多以(36.5±0.5)℃为宜,多数动物细胞生存的适宜pH为__________,此外,渗透压也是动物细胞培养过程中需要考虑的一个重要环境参数。(4)气体环境:95%空气+________(维持培养液的pH)。4.过程(如图)二、干细胞培养及其应用考点2动物细胞融合技术与单克隆抗体一、动物细胞融合技术1.概念:使两个或多个动物细胞结合形成______细胞的技术。2.方法:PEG融合法、电融合法和________________________等。3.原理:________________。4.结果:形成具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞,称为________。5.意义:突破了有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能;成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段,为制造____________开辟了新途径。二、单克隆抗体及其应用1.制备原理:一个B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体,B淋巴细胞在体外____________无限增殖;骨髓瘤细胞能____________;B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合得到的杂交瘤细胞,既能迅速大量繁殖,又能____________________________________________________________________________________________。2.制备过程3.优点(1)能准确地识别抗原的细微差异,与特定抗原发生________结合。(2)可以________制备。4.应用(1)被广泛用作________试剂,在多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥重要的作用。(2)运载________,形成抗体—药物偶联物,实现对肿瘤细胞的________杀伤。(3)用于________。考点3动物体细胞核移植技术和克隆动物一、动物细胞核移植技术1.概念:将动物一个细胞的______________移入________________________中,使这个重新组合的细胞发育成新胚胎,继而发育成动物个体的技术。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。2.原理:____________的全能性。3.分类(1)________核移植。(2)________核移植。4.体细胞核移植的过程二、体细胞核移植技术的应用前景及存在的问题前景畜牧业加速家畜________进程、促进优良畜群繁育保护濒危物种有望增加濒危物种的存活数量医药卫生①作为__________生产医用蛋白;②转基因克隆动物的细胞、组织或器官可以用于异种移植③人核移植__________,经过诱导分化能形成相应的细胞、组织或器官,可用于器官移植问题①该技术成功率________②绝大多数克隆动物存在健康问题,许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷自主诊断考点1一、1.细胞增殖2.动物细胞融合动物细胞培养3.(1)血清(2)灭菌定期更换(3)7.2~7.4(4)5%CO24.胰蛋白胶原蛋白单个细胞细胞悬液原代悬浮贴壁分裂受阻或停止传代培养二、任何一种类型成体神经干细胞特定的细胞或组织胚胎干细胞考点2一、1.一个2.灭活病毒诱导法3.细胞膜的流动性4.杂交细胞5.单克隆抗体二、1.不能无限增殖产生足够数量的特定抗体2.B淋巴细胞选择杂交瘤细胞3.(1)特异性(2)大量4.(1)诊断(2)药物选择性(3)治疗
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