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文档简介
2026事业单位笔试-河北-河北病理技术(医疗招聘)历年参考题库含答案详解一、选择题从给出的选项中选择正确答案(共100题)1、组织固定是病理技术的首要环节,下列哪种固定液最常用于常规病理组织的固定?A.95%乙醇B.10%中性缓冲福尔马林C.纯甲醛D.醋酸2、HE染色是病理诊断最常用的染色方法,其中苏木精主要将细胞核染成什么颜色?A.粉红色B.蓝色C.紫色D.橘黄色3、石蜡切片制作过程中,脱水的目的是什么?A.杀死组织中的微生物B.去除组织中的水分以便石蜡浸入C.增强组织的硬度D.提高抗原的免疫活性4、冰冻切片术中,常用的冷冻介质和保护剂是?A.石蜡B.OCT化合物C.甲醛D.乙醇5、免疫组化染色中,抗原修复的主要目的是?A.增加组织颜色深度B.使固定过程中形成的抗原表位暴露C.去除非特异性背景染色D.增强封片剂的透明度6、特殊染色中,PAS(过碘酸雪夫)染色主要用于显示哪种物质?A.胶原纤维B.脂肪C.糖原和黏多糖D.弹性纤维7、Masson三色染色中,胶原纤维被染成什么颜色?A.红色B.蓝色或绿色C.黑色D.黄色8、石蜡切片时,切片厚度一般控制在什么范围?A.0.5~1μmB.3~5μmC.10~15μmD.20~30μm9、病理组织中自溶现象主要由什么引起?A.细菌繁殖B.组织死后溶酶体酶释放C.固定液浓度过高D.脱水时间过长10、免疫组化染色中,DAB显色后呈现什么颜色?A.蓝色B.红色C.棕黄色D.绿色11、病理切片出现皱褶的主要原因不包括?A.切片刀不锋利B.切片厚度不均匀C.蜡块表面温度过高软化D.染色时间过短12、石蜡切片脱片现象的常见原因中,错误的是?A.载玻片清洁不彻底B.组织固定不充分C.切片烤片温度和时间不足D.染色缸pH值偏碱性13、抗体的最佳保存条件是?A.室温长期保存B.4℃冰箱保存,避免反复冻融C.冷冻干燥后室温保存D.液氮中长期保存后立即使用14、石蜡包埋时,包埋机温度一般设定为?A.高于石蜡熔点10~15℃B.低于石蜡熔点5℃C.室温即可D.100℃以上15、透明剂在石蜡切片制作中的作用是?A.去除水分并置换为石蜡B.去除乙醇并使石蜡能渗入组织C.固定组织结构D.增强组织硬度16、免疫组化染色中,内源性过氧化物酶可通过以下哪种方法消除?A.酒精脱水B.3%过氧化氢甲醇溶液孵育C.二甲苯透明D.抗原修复17、下列哪种病变在石蜡切片中常出现收缩伪迹?A.肝癌组织B.脂肪组织C.脑组织D.肾组织18、病理蜡块的常规保存温度为?A.室温即可B.4℃冷藏C.-20℃冷冻D.37℃恒温19、免疫组化染色出现假阴性结果的可能原因中,不包括?A.一抗稀释比例过高B.抗原修复过度C.二抗失效D.显色时间过长20、细胞块技术主要用于哪类标本的病理诊断?A.手术切除组织B.穿刺活检组织C.体腔积液和体液标本D.皮肤组织21、石蜡切片制作过程中,脱水最常用的脱水剂是A.乙醇B.甲醇C.丙酮D.异丙醇22、HE染色中,使细胞核呈蓝色的染料是A.伊红B.苏木精C.甲基绿D.品红23、冰冻切片常用的冷冻剂是A.液氮B.干冰C.冰块D.液态空气24、组织固定液中最常用的固定剂是A.甲醛B.乙醇C.丙酮D.锇酸25、切片出现皱褶的最可能原因是A.切片刀钝B.组织过硬C.切片太厚D.切片未烤干26、免疫组化染色中,抗原修复的主要目的是A.暴露抗原表位B.增强背景染色C.提高特异性D.降低非特异性染色27、HE染色后脱水不彻底会导致A.切片脱落B.染色过深C.切片模糊不清D.组织收缩28、石蜡切片的常规厚度为A.1-2μmB.4-6μmC.8-10μmD.15-20μm29、组织包埋时石蜡的温度一般控制在A.35-40℃B.50-60℃C.70-80℃D.90-100℃30、冰冻切片与石蜡切片相比,其主要缺点是A.染色效果差B.切片质量较差C.耗时较长D.需要特殊染色31、HE染色中脱水的目的是A.去除组织中的水分B.溶解石蜡C.固定组织D.染色32、组织取材时,标本厚度一般不超过A.0.2cmB.0.5cmC.1.0cmD.2.0cm33、细胞内糖原的染色常用A.PAS染色B.普鲁士蓝染色C.油红O染色D.抗酸染色34、苏木精染色后需要用A.盐酸乙醇分化B.碳酸锂返蓝C.伊红复染D.酒精脱水35、切片在水中展片的最佳温度是A.15-20℃B.20-25℃C.40-45℃D.60-65℃36、固定时间过长会导致A.组织变软B.抗原性增强C.组织变硬脆D.染色更清晰37、石蜡切片脱蜡至水这一步骤中,常用的脱蜡剂是A.无水乙醇B.二甲苯C.丙酮D.甲醇38、H-E染色中伊红染色的主要对象是A.细胞核B.细胞质和红细胞C.纤维组织D.黏液39、组织石蜡包埋时,石蜡的熔点应选择A.45-50℃B.52-56℃C.60-65℃D.70-75℃40、组织切片染色后封片常用的封片剂是A.甘油B.中性树胶C.水D.乙醇41、组织固定是病理制片的首要环节,下列关于福尔马林固定液的说法正确的是A.10%中性缓冲福尔马林是最常用的固定液B.固定液用量应为组织块体积的10倍C.福尔马林固定后组织会收缩变形D.固定时间越短越好42、石蜡切片制作过程中,脱水最常用的试剂是A.乙醚B.乙醇C.丙酮D.氯仿43、HE染色中,苏木素染液的染色原理主要是A.碱性染料与酸性结构结合B.酸性染料与碱性结构结合C.化学键结合D.离子键结合44、冰冻切片制作时,最常用的冷冻介质是A.石蜡B.OTC包埋剂C.明胶D.树胶45、关于组织脱水的叙述,错误的是A.脱水目的是去除组织中的水分B.乙醇浓度越高脱水效果越好C.脱水时间过长会导致组织变脆D.二甲苯可以作为脱水剂使用46、病理切片中出现针状结晶,最可能是由于A.fixation不当B.石蜡纯度不够或温度过高C.染色时间过长D.脱水不彻底47、免疫组织化学染色中,一抗孵育的适宜温度和时间通常是A.37℃,30分钟B.4℃,过夜C.室温,2小时D.60℃,1小时48、PAS染色主要用于显示A.蛋白质B.脂肪C.糖原和黏液物质D.核酸49、病理标本送检时,下列哪项做法是错误的A.手术标本应尽快固定B.冷冻切片标本应干燥保存C.标本容器应贴好标签D.固定液应没过标本50、Masson三色染色中,胶原纤维呈现的颜色是A.红色B.蓝色或绿色C.黄色D.黑色51、关于组织切片的厚度,下列说法正确的是A.常规石蜡切片厚度为2-3μmB.冰冻切片厚度一般为5-10μmC.切片越厚越好D.石蜡切片厚度为10-15μm52、阿利新蓝染色主要用于显示A.酸性黏液物质B.碱性黏液物质C.糖原D.脂肪53、病理切片脱蜡最常用的试剂是A.乙醇B.二甲苯C.水D.甲醇54、下列哪种固定液不含酒精成分A.Bouin固定液B.Zenker固定液C.Carnoy固定液D.FAA固定液55、关于组织切片粘附,下列说法正确的是A.载玻片不需要处理B.明胶涂片可增强切片粘附C.切片无需烘干即可染色D.组织切片不会脱落56、银染法主要用于显示A.胶原纤维B.网状纤维C.弹性纤维D.肌纤维57、关于病理切片的封片,下列叙述正确的是A.中性树胶是最常用的封片剂B.封片无需盖玻片C.封片剂可以是水溶性D.封片后不需干燥58、组织固定时间过长可能导致A.组织变软B.染色加深C.组织变硬变脆D.抗原性增强59、苏丹黑B染色主要用于显示A.糖原B.脂肪C.黏液D.钙盐60、关于病理切片的复染,下列叙述正确的是A.复染颜色应与主染相同B.复染目的是突出细胞核等结构C.复染时间越长越好D.所有染色都不需要复染61、HE染色中,苏木精染色的原理是什么?A.碱性染料与细胞核内酸性物质结合B.酸性染料与细胞质内碱性物质结合C.碱性染料与细胞质内酸性物质结合D.酸性染料与细胞核内碱性物质结合62、福尔马林固定液的标准浓度是?A.10%甲醛溶液B.5%甲醛溶液C.20%甲醛溶液D.40%甲醛溶液63、冰冻切片中常用的冷冻剂是?A.液氮B.石蜡C.乙醇D.二甲苯64、石蜡切片制作过程中,二甲苯的主要作用是?A.脱水B.透明C.固定D.染色65、PAS染色主要用于检测?A.糖原和黏液物质B.脂肪C.铁盐D.钙盐66、免疫组织化学染色中,一抗孵育的温度通常是?A.37℃B.4℃过夜C.60℃D.室温2小时67、细胞学检查中,巴氏染色法常用于哪个部位?A.宫颈涂片B.胸腹水C.痰液D.尿液68、特殊染色中,Masson三色染色主要将胶原纤维染成?A.蓝色或绿色B.红色C.黄色D.黑色69、组织切片出现皱褶的最常见原因是?A.切片刀不锋利B.切片厚度不均C.组织脱水不充分D.切片水温过低70、电镜制样中,固定组织首选的固定液是?A.2.5%戊二醛B.10%福尔马林C.乙醇D.丙酮71、自动组织脱水机中,乙醇梯度脱水的常用程序是?A.70%→80%→95%→100%B.50%→70%→85%→100%C.70%→80%→90%→95%→100%D.60%→70%→80%→90%72、冰冻切片制作中,组织快速冷冻的目的是?A.减少冰晶形成B.增加硬度C.便于切割D.防止腐败73、蜡块制作时,石蜡的熔点一般选择?A.52-58℃B.40-45℃C.60-70℃D.70-80℃74、Sudan黑B染色主要用于检测?A.脂类物质B.糖原C.黏液D.核酸75、组织固定时间过长可能导致什么问题?A.组织硬化影响切片B.染色效果增强C.细胞结构更清晰D.抗原性增强76、革兰染色中,脱色时间的控制关键在于?A.乙醇脱色时间的长短B.结晶紫用量C.碘液浓度D.复染时间77、Mallory染色主要用于显示?A.胶原纤维和神经纤维B.弹性纤维C.网状纤维D.淀粉样物质78、石蜡切片出现切片碎裂的可能原因不包括?A.组织过硬B.切片刀钝C.切片厚度太薄D.切片角度不当79、银染法主要用于显示哪种纤维?A.网状纤维B.胶原纤维C.弹性纤维D.肌纤维80、病理切片的封片介质常用的有?A.中性树胶B.石蜡C.乙醇D.甲醛81、石蜡切片制片过程中,组织固定最常用的固定液是:A.75%酒精B.10%中性缓冲福尔马林C.丙酮D.甲醇82、HE染色中,使细胞核呈蓝色的染液是:A.伊红YB.苏木精C.亚甲蓝D.甲苯胺蓝83、冰冻切片时,最常用的冷冻介质是:A.石蜡B.OCT包埋剂C.明胶D.树胶84、免疫组织化学染色中,DAB显色剂最终呈现的颜色是:A.蓝色B.红色C.棕色D.绿色85、肿瘤标记物CEA主要来源于:A.肝脏B.胚胎性消化道组织C.肾脏D.胰腺86、骨髓增生程度通常根据有核细胞与成熟红细胞的比例来划分,增生活跃的比例范围是:A.1:10~1:20B.1:20~1:50C.1:50~1:100D.1:100~1:20087、病理切片的脱蜡步骤应使用的试剂是:A.无水乙醇B.二甲苯C.蒸馏水D.75%酒精88、PAS染色主要用于显示组织中的:A.脂质B.糖原和黏多糖C.蛋白质D.核酸89、病理实验室安全操作中,关于甲醛(福尔马林)的叙述正确的是:A.甲醛对人体无害,可长期接触不需防护B.甲醛为挥发性气体,需在通风橱中操作并佩戴防护装备C.甲醛遇碱稳定,储存时无需密封D.甲醛可长时间重复使用不影响固定效果90、免疫组化染色中,抗原修复最常用的方法是:A.高温高压修复B.室温孵育C.紫外线照射D.冷冻干燥91、细胞学检查中,巴氏染色法主要用于:A.血液细胞形态分析B.脱落细胞学检查C.细菌鉴定D.寄生虫检查92、在病理组织切片中,观察血管壁有无玻璃样变,最常选用的染色方法是:A.Masson染色B.HE染色C.银染色D.刚果红染色93、流式细胞术在病理诊断中最主要的应用领域是:A.细菌培养鉴定B.淋巴细胞亚群分析C.组织切片染色D.酶活性测定94、病理实验室中,组织脱水时最后一步透明剂是:A.丙酮B.乙醇C.二甲苯D.戊二醛95、关于石蜡熔点的选择,常规病理切片使用的石蜡熔点一般为:A.30~40℃B.45~56℃C.70~80℃D.90~100℃96、HE染色切片中出现蓝灰背景(过染)的可能原因是:A.苏木精分化过度B.伊红染色时间过长C.苏木精反蓝不足或分化不够D.切片过薄97、病理报告中的冰冻切片诊断一般应在多长时间内完成:A.1小时内B.30分钟内C.15分钟内D.24小时内98、肾组织石蜡切片中,观察肾小球基底膜的染色应选择:A.PAS染色B.Masson染色C.碘酸希夫反应D.PAS染色或六胺银染色99、病理科废弃的含甲醛固定液属于哪类废物:A.一般医疗废物B.化学性危险废物C.病理性废物D.放射性废物100、关于石蜡切片厚度的标准,常规病理检查切片的推荐厚度是:A.1~2μmB.3~5μmC.8~10μmD.15~20μm
参考答案及解析1.【参考答案】B【解析】10%中性缓冲福尔马林是病理组织最常用的固定液,其固定效果好,能较好地保存组织形态和抗原性,且对后续染色影响小。纯甲醛浓度过高易使组织过硬;高浓度乙醇会导致组织收缩变形;醋酸主要用于血液涂片固定,不适用于常规组织固定。2.【参考答案】B【解析】苏木精为碱性染料,可与细胞核内的酸性物质如DNA、RNA结合,将细胞核染成蓝色或蓝紫色。伊红为酸性染料,主要将细胞质和细胞外基质染成粉红色。HE染色之所以成为病理诊断的基础,正是依靠这种蓝紫与粉红的鲜明对比来观察组织形态结构。3.【参考答案】B【解析】石蜡不溶于水,若组织中含有水分,石蜡无法渗透进入。因此需用脱水剂将组织中的水分逐步置换出来。常规采用梯度乙醇脱水,从低浓度至高浓度逐级进行,最后用二甲苯等透明剂过渡,再浸入石蜡完成浸蜡。4.【参考答案】B【解析】OCT化合物是一种水溶性冷冻包埋介质,具有良好的组织穿透性和低温稳定性,可防止冰晶形成导致组织损伤。石蜡用于常规石蜡切片;甲醛用于固定;乙醇用于脱水,均不适用于冰冻切片的冷冻包埋。5.【参考答案】B【解析】甲醛固定过程中,蛋白质的醛基可与氨基发生交联反应,遮蔽部分抗原表位。抗原修复通过热诱导或酶解方式打断这些交联,使隐藏的抗原表位重新暴露,从而恢复抗体与抗原的结合能力,提高免疫组化染色的敏感性和特异性。6.【参考答案】C【解析】PAS染色利用过碘酸氧化糖类中的乙二醇基,产生醛基,再与雪夫试剂中的无色品红结合生成紫红色化合物。该染色主要用于显示糖原、黏多糖、基底膜、真菌等含多糖结构的物质,在肾小球疾病和肿瘤诊断中具有重要价值。7.【参考答案】B【解析】Masson三色染色可区分胶原纤维、肌纤维和细胞核。胶原纤维被苯胺蓝或亮绿染成蓝色或绿色,肌纤维和细胞质呈红色,细胞核呈黑色或深棕色。该染色广泛应用于肝纤维化、肾小球硬化等疾病的病理诊断。8.【参考答案】B【解析】常规石蜡切片厚度一般为3~5μm,此厚度既能保证组织结构完整清晰,又便于光线穿透进行显微镜观察。厚度小于3μm时组织易破碎,大于5μm时多层结构重叠影响观察。超薄切片0.5~1μm主要用于电镜技术。9.【参考答案】B【解析】自溶是指组织死后,其内部溶酶体破裂释放水解酶,分解自身细胞成分的过程。这是一种内源性消化作用,与细菌繁殖引起的腐败不同。及时固定可有效抑制自溶,若组织离体后未能及时固定,自溶会影响病理诊断的准确性。10.【参考答案】C【解析】DAB(二氨基联苯胺)在过氧化氢存在下被辣根过氧化物酶(HRP)催化氧化,生成棕黄色不溶性沉淀物,定位于抗原抗体结合部位。DAB显色灵敏度高、背景清晰,是目前最常用的免疫组化显色底物。蓝色多为DAB的底物显色体系产物。11.【参考答案】D【解析】切片皱褶多因切片刀钝利度不足、切片时蜡带折叠、蜡块温度过高致组织软化或切片厚度不均所致。染色时间长短影响的是颜色深浅和对比度,不会直接导致切片物理性皱褶。解决皱褶需检查刀片状态、调整室温及切片操作手法。12.【参考答案】D【解析】切片脱片主要与载玻片洁净度、组织固定质量、烤片条件及防脱片处理有关。染色缸pH值影响的是染色效果和细胞着色,不会导致组织从玻片上脱落。玻片有油污、固定不良致组织脆弱或烤片温度不够均可能导致脱片。13.【参考答案】B【解析】抗体在4℃条件下可保持稳定较长时间,频繁冻融会破坏抗体活性,故应分装保存避免反复冻融。室温保存会加速抗体失活;冷冻干燥虽可长期保存但需特定条件;液氮保存效果最好但不便于日常使用,通常用于长期储备而非常规工作保存。14.【参考答案】A【解析】石蜡熔点一般为56~58℃,包埋机温度应设定为高于熔点10~15℃,以确保石蜡处于完全液态状态,利于组织充分浸润和包埋成形。温度过低石蜡凝固影响操作,温度过高则可能损伤组织抗原性和形态结构。15.【参考答案】B【解析】脱水后的组织含乙醇,而石蜡不溶于乙醇但溶于二甲苯等透明剂。透明剂的作用是置换出组织中的脱水剂,同时使组织与石蜡互溶,从而实现石蜡顺利渗入组织。常用的透明剂为二甲苯,透明时间过长会导致组织变脆。16.【参考答案】B【解析】血液富含红细胞,其中含大量内源性过氧化物酶,可与DAB显色系统产生非特异性棕黄色沉淀干扰结果。用3%过氧化氢甲醇溶液处理可灭活内源性过氧化物酶。酒精脱水用于脱水步骤,二甲苯用于透明,抗原修复用于暴露抗原表位,均不能消除过氧化物酶活性。17.【参考答案】B【解析】脂肪组织因脂肪滴在固定和脱水过程中被溶剂溶解,导致组织内出现空泡样收缩间隙,称为收缩伪迹。该伪迹在HE染色中表现为大小不一的空隙,易与脂肪变性混淆。鉴别要点是收缩伪迹边界清晰、周围无脂质沉淀。18.【参考答案】B【解析】病理蜡块在4℃冷藏条件下可长期保存而不易变形或虫蛀。室温保存时间过长可能导致石蜡软化变形;-20℃冷冻可能使石蜡变脆开裂;37℃恒温会加速石蜡老化软化。蜡块应标注清晰信息并妥善排列存放。19.【参考答案】D【解析】假阴性指抗原存在但未检出。一抗稀释过度、抗原修复不足或过度破坏抗原、二抗失效均可导致信号减弱或消失。显色时间过长只会使阳性信号增强,不会造成假阴性,反而可能导致假阳性背景升高。20.【参考答案】C【解析】细胞块技术是将离心收集的上皮细胞制成类似组织切片的蜡块,再进行HE染色和免疫组化染色。该技术主要用于体腔积液、胸腹水、脑脊液等体液标本,可有效补充细胞学涂片信息的不足,提高诊断准确性。21.【参考答案】A【解析】在石蜡切片技术中,脱水是关键步骤之一。95%乙醇和无水乙醇是最常用的脱水剂,因其脱水效果好、对组织损伤小、价格低廉且易于获取。脱水过程通常采用梯度乙醇,从低浓度逐渐过渡到高浓度,以确保组织内水分被充分置换,为后续透明和浸蜡步骤做好准备。22.【参考答案】B【解析】HE染色是最基本的组织学染色方法。苏木精是一种碱性染料,与细胞核内的酸性物质(如DNA、RNA)结合,使细胞核呈现蓝紫色。伊红则为酸性染料,与细胞质中的碱性成分结合,使细胞质呈粉红色。两者配合使用可清晰区分细胞核与细胞质,是病理诊断中最常用的染色方法。23.【参考答案】C【解析】冰冻切片是手术中快速诊断的重要手段。冰块是最常用的冷冻介质,操作简便、成本较低,适用于大多数冰冻切片需求。液氮温度过低,易造成组织脆裂;干冰虽可用但不如冰块普及;液态空气因成分复杂且危险较少使用。冰冻切片一般要求温度在-20℃左右,冰块可满足这一要求。24.【参考答案】A【解析】甲醛(福尔马林)是最常用的组织固定剂,其优点包括穿透力强、固定效果好、价格低廉、易于保存。10%中性缓冲甲醛是最标准的固定液,能很好地保存组织的形态结构,特别是核酸和蛋白质的结构。乙醇和丙酮主要用于脱水而非固定,锇酸则主要用于电镜样品的固定。25.【参考答案】B【解析】切片出现皱褶通常是因为组织过硬或脱水过度所致。当组织经脱水、透明和浸蜡处理后变得过于坚硬时,切片刀难以均匀切割,容易产生皱褶。解决方法包括适当延长软化时间、减少脱水程度或在切前适当回软。切片刀钝主要导致切片碎裂,切片太厚影响观察但不直接引起皱褶。26.【参考答案】A【解析】福尔马林固定会导致蛋白质交联,使抗原表位被掩蔽,影响抗体与抗原的结合。抗原修复通过加热或酶消化等方式打破这些交联,重新暴露抗原决定簇,从而提高免疫组化染色的阳性率和灵敏度。抗原修复是免疫组化成功的关键步骤之一,常用的方法包括微波法和高压锅法。27.【参考答案】C【解析】HE染色过程中,染色后的组织必须经过充分脱水才能进行透明和封片。如果脱水不彻底,残留的水分会影响二甲苯等透明剂的效果,导致封片时出现混浊、模糊不清的现象,严重影响切片的质量和解剖结构的观察。此外,脱水不彻底还可能导致封片剂乳化,使切片无法长期保存。28.【参考答案】B【解析】石蜡切片的常规厚度为4-6微米,这是经过长期实践确定的最佳范围。过薄(1-2μm)的切片适用于特殊观察如电镜前期准备,但常规光镜观察难以看清组织结构;过厚(8-10μm以上)的切片会导致层次不清,影响病理诊断的准确性。4-6μm的厚度既能保证组织结构的完整性,又能提供良好的显微镜下观察效果。29.【参考答案】B【解析】石蜡包埋时,石蜡的温度应控制在50-60℃之间。温度过高会导致组织碳化、收缩变形,影响切片质量;温度过低则石蜡流动性差,难以充分渗透组织。包埋时还需注意石蜡的纯度和熔点选择,一般石蜡熔点为56-58℃,包埋时保持适当温度既能保证石蜡良好流动性,又不会损伤组织。30.【参考答案】B【解析】冰冻切片虽然快速,但其主要缺点是切片质量相对较差。由于冷冻过程可能导致组织冰晶形成,影响细胞结构的完整性,且冰冻切片较厚(通常8-10μm),切片容易出现断裂、皱褶等问题。相比之下,石蜡切片可以切得更薄(4-6μm),组织形态保持更好,是病理诊断的金标准方法。31.【参考答案】A【解析】HE染色过程中的脱水是指用高浓度乙醇置换组织中的水分。这是石蜡切片技术的必要步骤,因为后续的透明和浸蜡步骤需要使用有机溶剂,而水会与这些溶剂不相容。脱水通常采用梯度乙醇,从70%逐渐升至无水乙醇,确保组织中的水分被完全置换,为后续步骤创造条件。32.【参考答案】B【解析】组织取材时,标本厚度一般不超过0.5cm(5mm)。过厚的标本会影响固定液的渗透,导致固定不充分,中心部位可能发生自溶或腐败,影响组织形态的保存。理想的取材大小约为1.5-2.0cm×0.3-0.5cm×0.2-0.3cm,这样既能保证固定效果,又便于后续处理操作。33.【参考答案】A【解析】PAS染色(过碘酸雪夫染色)是检测糖原的常用方法。过碘酸可将糖原中的乙二醇基氧化为醛基,醛基与雪夫试剂反应生成紫红色产物。PAS染色对糖原、黏蛋白、基底膜等含多糖的物质均有染色作用,是病理诊断中重要的特殊染色方法。普鲁士蓝用于检测铁,油红O用于检测脂肪,抗酸染色用于检测分枝杆菌。34.【参考答案】B【解析】苏木精染色后,组织呈蓝色,但此时蓝色不够鲜艳,需要经过返蓝处理。碳酸锂是最常用的返蓝剂,它能使苏木精由红紫色转变为蓝色,使细胞核染色更加鲜明。分化是用盐酸乙醇去除多余染料,返蓝是在分化后使蓝色充分显现的过程。这两步顺序不能颠倒,否则会影响染色效果。35.【参考答案】C【解析】切片在水中展片时,水温一般控制在40-45℃。水温过低,切片不能充分展开,容易卷曲;水温过高,可能导致组织变形、褪色或脱片。展片前需确保水面清洁无杂质,切片展开后应及时捞取并平整铺于载玻片上,避免产生气泡和皱褶,这是获得优质切片的重要环节。36.【参考答案】C【解析】固定时间过长会使组织过度固定,导致组织变硬变脆,切片时容易出现碎裂、毛边等问题。甲醛固定一般建议6-24小时,具体取决于组织块大小。过度固定还会影响抗原性,使免疫组化染色效果下降。因此,固定时间应根据组织类型和大小适当控制,避免过长或过短。37.【参考答案】B【解析】石蜡切片在染色前需要脱蜡,即将石蜡从组织中去除。二甲苯是最常用的脱蜡剂,它能有效溶解石蜡且对组织损伤较小。脱蜡过程通常在二甲苯中进行10-15分钟,必要时可更换一次二甲苯以确保石蜡完全去除。脱蜡不彻底会影响后续染色效果,是切片质量控制的常见问题之一。38.【参考答案】B【解析】H-E染色中,伊红是一种酸性染料,主要与细胞质中的碱性蛋白以及红细胞中的血红蛋白结合,使其呈现粉红色。伊红对细胞质的亲和力较强,能清晰显示细胞质的形态和范围。细胞核由苏木精染色呈蓝色,两者配合使用可形成鲜明的对比,便于观察组织的细微结构。39.【参考答案】B【解析】石蜡包埋时,应根据切片厚度选择合适的石蜡熔点。常规石蜡切片要求石蜡熔点为52-56℃,这样既能保证切片时组织硬度适宜,又能在染色脱蜡时方便去除。熔点过高会导致切片困难,熔点过低则切片时易碎。对于较厚的组织切片或特殊用途,可能需要选择不同熔点的石蜡。40.【参考答案】B【解析】组织切片染色脱水透明后,需要用封片剂封固。中性树胶是最常用的封片剂,它具有折射率适中、透明度好、不易变黄、能长期保存切片等优点。封片时应避免气泡产生,盖玻片应平整放置。甘油主要用于临时封片或活体观察,水和乙醇不能作为长期封片剂使用。41.【参考答案】A【解析】10%中性缓冲福尔马林是最常用且效果良好的固定液,能较好地保存组织形态和抗原性。固定液用量应为组织块体积的5-10倍,而非10倍;福尔马林固定后组织会有轻微收缩,但变形不明显;固定时间需根据组织大小和类型而定,并非越短越好,一般需6-48小时。42.【参考答案】B【解析】乙醇是石蜡切片中最常用的脱水剂,因其价格低廉、脱水效果好、对组织收缩小。常用浓度梯度为70%、80%、95%、100%乙醇。乙醚主要用于脱钙,丙酮和氯仿虽也可用于脱水,但不如乙醇应用广泛。43.【参考答案】A【解析】苏木素是一种碱性染料,主要与细胞核内的酸性物质(如DNA、RNA)结合,使细胞核呈蓝色。伊红为酸性染料,与细胞质中的碱性成分结合呈红色。这种酸碱结合是HE染色的基本原理。44.【参考答案】B【解析】OTC(OCT)包埋剂是最常用的冰冻切片冷冻介质,由乙二醇、明胶和聚乙烯醇组成,能在低温下保持组织形态,便于切片且不易产生冰晶artifact。石蜡用于常规石蜡切片,明胶主要用于特殊染色,树胶用于封片。45.【参考答案】D【解析】二甲苯是透明剂而非脱水剂,用于置换乙醇。脱水目的是去除组织中的水分以便石蜡渗透。高浓度乙醇确实脱水效果更好,但过度脱水会使组织变脆。常用梯度乙醇逐步脱水以避免组织损伤过大。46.【参考答案】B【解析】石蜡切片中出现针状结晶通常是由于石蜡纯度不够或融蜡温度过高所致。这些结晶会干扰显微镜下的观察。固定不当主要影响组织形态,染色时间过长导致颜色过深,脱水不彻底则影响切片质量而非产生结晶。47.【参考答案】B【解析】一抗孵育通常在4℃冰箱中过夜(12-16小时),这样可以提高抗体与抗原结合的亲和力和特异性,减少非特异性背景染色。37℃孵育时间短但效果不如4℃过夜,室温孵育效果一般,60℃温度过高可能导致抗原失活。48.【参考答案】C【解析】PAS(过碘酸雪夫)染色主要用于显示糖原、黏蛋白、黏多糖等碳水化合物含量丰富的物质,呈紫红色。蛋白质常用银染或免疫组化显示,脂肪用油红O或苏丹黑染色,核酸用甲基绿-派洛宁染色。49.【参考答案】B【解析】冷冻切片标本不应干燥保存,应保持湿润状态并及时送检。手术标本应立即固定以保持组织形态;标本容器必须贴好标签以防混淆;固定液量应足够没过标本以确保充分固定。50.【参考答案】B【解析】Masson三色染色是一种常用的结缔组织染色方法,胶原纤维呈蓝色或绿色,肌纤维和细胞质呈红色,细胞核呈黑色或深棕色。该染色广泛用于观察组织纤维化程度和胶原分布。51.【参考答案】B【解析】冰冻切片厚度一般为5-10μm,适合术中快速诊断。常规石蜡切片厚度为3-5μm,过厚会影响观察,过薄则可能缺损结构。切片厚度应根据观察目的和染料特性选择,并非越厚越好。52.【参考答案】A【解析】阿利新蓝(AlcianBlue)是一种阳离子染料,在酸性pH条件下可与酸性黏液物质(如硫酸黏液和羧酸黏液)结合,呈蓝色。常用于鉴别不同类型黏液物质,对肿瘤诊断有重要价值。53.【参考答案】B【解析】二甲苯是最常用的脱蜡剂,能有效溶解石蜡并使组织重新水合。切片进入染色前需先用二甲苯脱蜡,再经梯度乙醇复水至水,最后进行染色。乙醇用于脱水,水不能脱蜡,甲醇毒性较大。54.【参考答案】B【解析】Zenker固定液由汞、重铬酸钾和冰乙酸组成,不含酒精,适合骨髓和淋巴组织固定。Bouin固定液含苦味酸、甲醛和冰乙酸;Carnoy固定液含无水乙醇、氯仿和冰乙酸;FAA固定液含甲醛、乙醇和冰乙酸。55.【参考答案】B【解析】明胶涂片可有效增强组织切片与载玻片的粘附力,防止切片在染色过程中脱落。载玻片通常需要处理以提高粘附性;切片需要适当烘干以增强附着力;染色过程中的洗脱步骤可能导致切片脱落。56.【参考答案】B【解析】银染法(如Gomori银染)主要用于显示网状纤维,使其呈黑色。网状纤维是细薄的胶原纤维,普通HE染色不易观察。胶原纤维常用Masson染色,弹性纤维用Verhoeff染色,肌纤维用Masson或MMR染色。57.【参考答案】A【解析】中性树胶是最常用的永久性封片剂,折射率与玻璃相近,透光性好。封片必须使用盖玻片以保护切片;水溶性封片剂适用于需要后续免疫组化染色的切片;封片后需要适当干燥以固定封片剂。58.【参考答案】C【解析】固定时间过长会导致组织过度硬化变脆,切片时容易产生碎裂和皱褶。同时过度固定还可能影响染色效果和抗原保存。一般组织固定时间为6-48小时,具体视组织大小和类型而定。59.【参考答案】B【解析】苏丹黑B是一种脂溶性染料,可将脂肪染成黑色,常用于显示组织中的脂滴和脂肪变性。糖原用PAS染色,黏液用阿利新蓝或PAS染色,钙盐用vonKossa染色。该染色在脂肪肝等病变诊断中有重要价值。60.【参考答案】B【解析】复染使用与主染不同颜色的染料,目的是突出细胞核或其他结构,使组织成分更易区分。复染时间应适中,过长会影响观察效果。许多染色方法都需要复染步骤以提高对比度,如HE染色用伊红复染细胞质。61.【参考答案】A【解析】苏木精为碱性染料,主要与细胞核内带负电荷的酸性物质(如DNA、RNA)结合,使细胞核呈蓝紫色。伊红为酸性染料,与细胞质内带正电荷的碱性物质结合呈粉红色。掌握HE染色的基本原理是病理技术的基础知识,需区分酸碱染料的作用靶点。62.【参考答案】A【解析】临床常用的福尔马林固定液为10%中性缓冲福尔马林,由一份40%甲醛原液与九份水稀释配制而成。该浓度既能有效固定组织,又不会因浓度过高导致组织过度硬化。固定液浓度直接影响组织形态保持和后续染色效果。63.【参考答案】A【解析】冰冻切片常使用液氮或异戊烷作为冷冻剂,其中液氮温度可达-196℃,能迅速冻结组织,保持组织形态和抗原活性。石蜡用于包埋而非冷冻,乙醇和二甲苯用于脱水透明步骤。选择合适冷冻剂对切片质量至关重要。64.【参考答案】B【解析】二甲苯在石蜡切片中起透明作用,它能置换酒精并溶于石蜡,使组织透明便于石蜡渗透。脱水使用梯度酒精完成,固定使用固定液,染色使用各种染料。二甲苯透明是石蜡包埋前的关键步骤,确保后续浸蜡充分。65.【参考答案】A【解析】PAS(过碘酸雪夫)染色利用过碘酸氧化糖原等多糖中的乙二醇基,生成醛基后与雪夫试剂反应呈紫红色,主要用于检测糖原、黏液物质、基底膜等。脂肪用苏丹III染色,铁盐用普鲁士蓝染色,钙盐用vonKossa染色。66.【参考答案】B【解析】免疫组化一抗孵育通常在4℃冰箱中过夜,低温条件可减少非特异性结合,提高抗体与抗原的特异性结合效率。37℃常用于二抗孵育或显色反应,高温会增强背景染色。准确控制温度是保证IHC结果可靠的重要因素。67.【参考答案】A【解析】巴氏染色法由Papanicolaou创立,专为宫颈刮片细胞学检查设计,能清晰显示细胞核细节和角化程度,是宫颈癌筛查的标准染色方法。虽然也可用于其他体液细胞学,但其在妇科细胞学中的应用最为经典和广泛。68.【参考答案】A【解析】Masson三色染色可将胶原纤维染成蓝色或绿色,肌纤维和角质染成红色,细胞核染成黑色。该染色广泛应用于肝纤维化、心肌纤维化等疾病的病理诊断。不同改良方法可能呈现不同颜色组合,需掌握各成分的典型着色特征。69.【参考答案】D【解析】切片水温过低或水浴不充分会导致石蜡切片不能充分展开,产生皱褶。应使用40-45℃的温水展片。刀钝主要引起切片碎裂,厚度不均影响观察,脱水不充分导致切片困难但未必产生皱褶。控制展片水温是避免皱褶的关键。70.【参考答案】A【解析】电镜观察需要ultrastructure的精细结构,首选2.5%戊二醛进行初步固定,它能很好地保存细胞膜结构和超微结构。福尔马林主要用于光镜,乙醇和丙酮常用于冷冻切片的脱水固定。双重固定技术中常以锇酸后进行二期固定。71.【参考答案】A【解析】标准梯度脱水程序为70%→80%→95%→100%乙醇,逐级递增以确保组织内水分充分置换。过渡梯度过大可能导致组织收缩变形。不同组织可根据硬度和含水量适当调整,但基本遵循从低浓度到高浓度的原则,最终两次100%乙醇确保完全脱水。72.【参考答案】A【解析】快速冷冻可使组织内水分形成微小冰晶,减少大冰晶对细胞结构的破坏,保持组织形态完整性。冷冻速度过慢会产生大冰晶,影响切片质量和后续染色观察。液氮速冻优于缓慢冷冻,是保证冰冻切片质量的关键技术环节。73.【参考答案】A【解析】常规石蜡熔点选择52-58℃,既能保证组织充分渗透,又不会因温度过高损伤组织抗原和形态。熔点过低切片易碎,过高则可能引起组织硬化和收缩。根据不同季节和切片需求可微调熔点,这是石蜡包埋质量控制的重要参数。74.【参考答案】A【解析】Sudan黑B是一种脂溶性染料,可特异性地染脂肪和脂类物质呈黑色,常用于骨髓细胞化学染色检测脂肪滴。与苏丹III相比着色更深更稳定。该染色对脂代谢相关疾病的病理诊断有重要价值,是组织化学常用染色方法之一。75.【参考答案】A【解析】固定时间过长会使组织过度硬化,切片时容易出现碎裂和刀痕,同时可能导致抗原masked,影响免疫组化染色效果。一般固定时间为6-48小时,具体根据组织大小和类型调整。过度固定是病理制片中常见的质量问题来源。76.【参考答案】A【解析】革兰染色中乙醇脱色是鉴别革兰阳性菌和阴性菌的关键步骤。脱色不足会导致假阳性结果,脱色过度则出现假阴性。通常以涂片上残存紫色刚刚褪去为宜,约20-30秒。需根据涂片厚度和细菌种类灵活调整脱色时间。77.【参考答案】A【解析】Mallory三色染色可将胶原纤维染成蓝色,神经纤维染成红色,肌纤维染成黄色,细胞核染成黑色。该染色在肝脏病理和神经病理诊断中应用广泛,能清晰显示肝纤维化和神经病变。掌握各成分的典型着色是正确判读的基础。78.【参考答案】C【解析】切片碎裂多因组织过硬(固定过度或钙化)、切片刀钝、切片角度不当所致。切片厚度太薄反而不易碎裂,适当厚度(3-5μm)有利于完整切片。解决碎裂问题需检查组织处理流程、更换刀片和调整切片参数,综合排查原因。79.【参考答案】A【解析】银染法(如Gomori银染)可将网状纤维染成黑色,背景呈淡黄色,是显示网状纤维的经典方法。该方法在肝纤维化、淋巴瘤等疾病的诊断中有重要价值。胶原纤维常用Masson染色,弹性纤维用Verhoeff染色,需区分各特殊染色的应用范围。80.【参考答案】A【解析】中性树胶是最常用的封片介质,折射率与玻璃相近,透明性好,能使切片长期保存且不易褪色。石蜡用于包埋而非封片,乙醇和甲醛分别为脱水和固定液。封片时应避免气泡产生,盖玻片边缘需用指甲油或专用封条密封以防水分蒸发。81.【参考答案】B【解析】10%中性缓冲福尔马林是最常用的组织固定液,能良好保存组织形态和抗原性,防止过度硬化,适用于大多数病理检查。酒精固定脱水过快易致组织变脆,丙酮和甲醇多用于特殊染色或冰冻切片,不作为常规石蜡制片的首选固定液。82.【参考答案】B【解析】HE染色即苏木精-伊红染色法。苏木精为碱性染料,可将细胞核内的染色质和核蛋白染成蓝紫色,属于嗜碱性结构;伊红为酸性染料,使细胞质和间质呈粉红色,属于嗜酸性结构。亚甲蓝和甲苯胺蓝主要用于特殊染色,非常规HE染色成分。83.【参考答案】B【解析】OCT(OptimalCuttingTemperature)包埋剂是水溶性冷冻包埋介质,熔点低、透明度好,能快速冷冻组织并在低温切片机上获得优质冰冻切片,广泛应用于术中快速病理诊断。石蜡用于常规切片,明胶多用于包埋细小标本,树胶用于封片而非冷冻介质。84.【参考答案】C【解析】DAB(3,3'-二氨基联苯胺)是HRP(辣根过氧化物酶)标记系统中常用的显色底物,在过氧化氢存在下被氧化后生成棕色不溶性沉淀,沉积于抗原抗体结合部位。蓝色多由ABC法的BCIP/NBT系统产生,红色和绿色分别对应不同的荧光或酶标显色体系。85.【参考答案】B【解析】CEA(癌胚抗原)是一种糖蛋白肿瘤标志物,最初从胎儿胃肠道组织中提取,在成人中主要由胚胎性消化道组织表达,正常成人血清中含量极低。其升高常见于结直肠癌、胃癌、肺癌等恶性肿瘤,也可见于吸烟者和炎症性疾病,但不具有高度特异性。86.【参考答案】B【解析】骨髓增生程度按有核细胞与成熟红细胞比值分为五级:增生极度活跃(1:1)、增生活跃(1:20~1:50)、中度减低(1:50~1:100)、减低(1:100~1:200)、抑制(>1:200)。增生活跃为正常骨髓象标准,见于正常人及部分血液病状态,是临床最常见的增生程度描述。87.【参考答案】B【解析】石蜡切片包埋后需先经二甲苯脱蜡,使组织周围的石蜡溶解,然后经梯度酒精复水至水相,再进行后续染色。二甲苯是常用的脱蜡透明剂,溶解力强且不损伤组织形态。
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