Agilent-GCMS培训(完整版330页)

1、Agilent GCMS化学工作站操作培训,2020年6月24日,第一章 气相色谱/质谱基础,3,主要内容：,MS和GC检测器的对比 MS的基本理论,4,5973 MSD 和 6890 GC,5975B MSD 和 6890 GC,安捷伦GC/MS产品线的演变,5975C MSD 和 7890 GC,5,INTERFACE,GC,MSD,10-5 Torr,150 并且 质量 800u 禁止 ! 在较高温度下，调谐化合物谱图会发生“扭曲”。,196,Kahuna Support Introduction,Page 196,电子倍增器节能,电子倍增器节能只在SIM采集时才会被用到。 用户为一个质

2、量数选择总的强度限制。 防止倍增器因为大的离子电流而“烧伤”(电子倍增器烧伤会导致信号响应下降)。 使用: 用于扩展的线性SIM研究。(高浓度下的SIM) 优势: 在使用高浓度的样品或标准品时，能够得到更连续一致的响应。 不足: 会损失一些离子比率重现性,197,Page 197,电子倍增器节能: 打开或关闭,在 方法 菜单栏中 - 默认状态为关闭的,默认并推荐的总和限值为108。,198,第六章 定性分析,199,本章将学到: 数据分析主菜单的特征 数据浏览工具 熟练处理数据的性能 积分参数 利用反检索 (PBM) 进行定性分析 自动谱库检索及报告 参数恢复 如何自建库,定性分析,200,数

3、据分析窗口,调用数据 放大缩小图 获得质谱图 背景扣除 峰纯度 谱库检索,201,数据分析中鼠标的功能及按相对丰度显示质谱图,202,数据分析界面的鼠标右键功能,可以通过点击工具栏快捷键，切换是否启动右键功能 右键在导航界面，总离子流图和质谱图的内容不同,203,下拉菜单文件（F）,204,本底扣除,205,SIM/Scan 同步数据,可以选择要调用的数据 通常都是同时显示。如图所示,206,方法 下拉菜单,207,重新处理菜单,208,色谱图 下拉菜单,209,提取离子色谱,210,提取离子色谱,211,简易EICs,在EIC图上同时点击左右键,212,不纯,峰纯度,纯,不纯,213,绘制关

4、联色谱图,绘制与当前质谱图相关联的所有扫描的离子流图,214,用于设置化学工作站积分参数 用于保存当前化学工作站积分参数 用于加载，修复，保存化学工作站积分参数,化学工作站积分参数,保存为方法的一部分,215,各种积分事件,216,用于设置 RTE 积分参数 用于保存当前 RTE 积分参数 用于加载，修复，保存 RTE积分参数,RTE 积分参数,峰起点与终点高度差与峰高相比,基线位置。分离相邻两峰的最少扫描次数,基线下落或切线,峰位置（顶点或峰重心,最小峰面积,最多峰数目,保存为方法的一部分RTE积分文件扩展名为 .P,217,将检索结果标注在色谱图上,将PBM检索的第一个匹配结果（连同匹配度

5、）标注在峰上,218,谱图下拉菜单,219,PBM 库检索的概念,220,选择所要检索的谱库 从质谱菜单/选择谱库,谱库检索,选择谱库,221,PBM检索结果,222,PBM检索结果文本文件,223,检索统计表,224,将检索报告作为方法的一部分,自动谱库检索,选择 Method/Edit Method. 选择 LibSearch Report 设定期望的报告风格及打印目的地,225,自动谱库检索摘要报告,226,建立自建库,227,添加和编辑信息 将用户当前数据文件中的一张质谱图放入自建库,228,参数检索,229,参数反向检索结果,230,选用分子结构数据库步骤,231,在molstruc

6、处双击左键,点击确认,232,工具下拉菜单,233,自动化工具：运行扫描,234,信噪比测定,235,信噪比测定(续),236,编写及运行宏程序,237,分析多个数据文件,通过同时显示来自多数据文件的总离子流图和提取离子色谱图比较数据,238,分析多个数据文件窗口,239,分析多个质谱图,通过谱图比较、重叠、差减的方式对照两张质谱图,240,多谱图查看窗口,241,第七章 定量基础,242,校正（定量） 校正即是利用某个峰的峰高或峰面积来确定其对应组分的浓度或含量 当检测器灵敏度针对不同的组分而变化；及检测器对同一组分不同含量响应值发生变化时需做校正 校正方法 *面积百分比法AREA% *峰高

7、百分比法HEIGHT% 归一化法NORM% 外标法ESTD 内标法ISTD *不是校正方法,243,面积百分比法AREA% AREA(pk) AREA%= x100% AREA(pk) 假定 检测器响应都相同 所有组分都流出 所有组分都被检测到 优点 缺点 无需做校正 以上所有的假定 简单、快速的定量过程 需测量所有的组分 进样量不要求严格 所有的面积都必须准确,244,响应因子,绝对响应因子 RF=含量/面积 校正检测器响应 与组分的含量及其它组分的存在无关,含量 100 100 200 面积 3000 2500 4000,245,归一化法(NORM) RF(pk) x AREA(pk) N

8、ORM%= x100% RF(pk) x AREA(pk) 假定 所有组分都流出 所有组分都被检测到 优点 缺点 简单、快速的定量过程 所有组分峰都要流出 进样量不要求严格 需测量所有的组分 必须校正所有的峰,246,外标法（ESTD） 含量面积(pk) x RF(pk) 优点 校正检测器的响应 只对欲分析的组分峰做校正 无需所有峰都能被检测到 缺点 进样量必须准确 仪器必须有良好的稳定性 需定期做再校正,247,定量分析,248,单级校正 对每一峰只做一次校正 单级校正中做了如下假设： 响应因子不会因为某峰对应物质的含量 变化而发生变化 响应曲线须通过原点,249,多级校正 对每一峰需做至少

9、两次校正 可以补偿检测器对不同含量的样品组分而给出 非线性响应。 响应曲线可以不通过原点,250,多级校正过程 首先准备一个混合标样，其浓度应高于欲分析物 的浓度 将浓标样等梯度稀释，其中最低浓度低于待测物的浓度 运行每一级稀释好的标样 在每一级上进行校正 运行待测样品并使用校正表分析它 需要时进行再校正,251,252,内标法（ISTD）,253,选择内标物的标准 样品中不存在 化学性质与样品相似 与样品有相同的浓度范围 不会与样品发生反应 在感兴趣组分附近流出 * 可得到分离良好的、干净利落的峰 色谱性质稳定 可迅速容易得到,254,本章将学到: 如何设置并调试定量数据 如何编辑定量结果

10、如何产生定量报告,定量数据分析,255,步骤 3: 查找限定离子,步骤 2: 保留时间窗口内查找目标离子,步骤 1: 在信号窗口内查找峰积分,化学工作站定量概念,256,分析标准物,分析未知物,建立标准曲线,由曲线计算含量,定量过程,257,连同校正表下载方法文件. 下载第一个标准数据文件 选择 校正 / 设置定量,设置定量数据资料,258,选择校正 / 设置定量.,定量数据资料表,参考峰窗口：仅用于内标 非参考缝窗口：用于其它化合物 相关窗口：允许目标离子与限定离子的保留时间之差 默认值+/-：峰起点与终点须在此范围内,是否用RTE积分,259,260,单击 “插入上方,输入化合物,261,

11、输入化合物 (续),262,内标指令,263,用于: 增加新级别 级别再校正 删除级别,更新校正表,内标物浓度,264,编辑化合物信息表鉴定,265,266,编辑化合物信息表校正,267,编辑化合物信息表用户定义,268,编辑化合物信息表高级的,269,编辑化合物信息表报告中,270,用于: 增加新级别 级别再校正 删除级别,更新校正表(1701DA版),内标物浓度,271,化合物信息 - 第 1页,272,273,化合物信息 - 第 2页,274,化合物信息 - 第 3页,校正曲线,275,校正曲线,276,调用未知化合物的数据使用定量/计算,277,1. 选择 方法/编辑方法. 2. 选定

12、“定量报告,3. 选定报告格式和目的地 4. 保存方法!,自动生成定量报告,278,定量报告选项,279,使用 定量编辑定量结果 手动再积分,280,使用下列工具: 跟踪模式定量 查找化合物/查找全部化合物 快捷定性,如果 峰/限定离子找不到, 检查: 1. 积分 2. 数据文件中的质量数 3. 时间范围 4. 信号相关窗口 如果出现奇怪的校准曲线, 检查: 1. 数量 2. 积分事件 3. 响应,定量数据库故障排除,281,修正保留时间 校正离子比率 设置信号萃取窗口,快捷定性,282,第八章 用户报告和资料库,283,本章将学到: 如何建立模板及产生报告 如何建立资料库及其更新,用户报告和

13、资料库,284,形象的运行时间程序 一旦安装, 直接建立 hpchemcustrpt 添加 CustRpt 菜单 用户报告模板文件为 *.crt 用户报告资料库文件为 *.crd,用户报告和资料库,285,建立新报告模板 编辑用户报告模板 指定新报告模板,用户报告,286,从右边表中选择报告内容. 从左侧所列的报告选项中选择项目. 击 Add 键. 重复至选项添加完毕. 击 OK.,用户报告 - 完善报告,287,用户报告 - 拖放式,288,选择 文件 / 保存 或文件 / 另存为 输入文件名并击 OK.,选择它，为方法建立一个作为报告模板的文件. 选择它，运行方法时打印用户报告 将报告与每

14、个文件一起保存或覆盖,用户报告 - 保存模板,289,加载一个定量数据文件. 选择“定量 / 打印报告”.,打印用户报告 - 交互式,290,第九章 序 列,291,在本节将学到: 怎样通过样品“序列”自动进行分析 如何建立，运行和修改序列,序列,292,序列,293,编辑样品明细表,建立序列,D.02.00后增加了更多的鼠标右键选项,294,配置序列格式,295,停止或暂停一个序列,运行序列,296,各别命名 系统为文件名赋值 Swapped 系统为文件名赋值 用户定义命名依据,所有文件名由系统自动加扩展名”。D“!,为文件名赋值,297,序列的附加选项,将另一个序列内容加入本序列 为第一个

15、文件命名 第一个样品瓶号 更改方法,298,模拟序列,299,第十章 仪器维护及日常保养,300,这一章将学到： GC 和 MS预防性维护,301,日常维护 - GC,302,分流/不分流进样口的日常维护,定期更换进样垫 定期更换和清洗干净的衬管 定期更换O形环 定期用溶剂清洗分流平板 定期用溶剂清洗进样口 定期更换分流捕集肼,303,隔垫吹扫分流/不分流进样口,GC6890 锣纹款进样口需要先定位再拧,304,分流/不分流进样口的维护隔垫,1.逆时针滑开锁扣，让隔垫组件离开进样口，防止隔垫更换时碎屑掉入进样口。 2.拧开螺帽 3.用镊子摘下旧的隔垫 4.用钢丝球和镊子把旧隔垫的残余部分刮去

16、5.用压缩空气将隔垫组件吹干净,6.将隔垫组件对准豁口放回进样口组件,7. 装上新的隔垫，如果你使用的是 Merlin隔垫，请将金属面向下 8. 拧上螺帽直至C形环突出1mm 9.重置隔垫使用次数,305,衬管的维护,不挥发的基体将会停留在衬管当中，吸附以后注入的样品，造成峰的拖尾，鬼峰或峰的丢失。,306,分流/不分流进样口的维护衬管,1.逆时针滑开锁扣，让隔垫组件离开进样口，以免碰碎衬管。,2.用镊子拨松O形环,3.用镊子将衬管取出,4.检查分流平板是否有污染，如果有污染，更换。清洁进样口。将新的O形环放在衬管上。将衬管放回进样口，推入衬管，直至衬管接触到分流平板。装上隔垫组件。用载气吹扫

17、进样口15分钟。老化进样口。重置衬管使用次数。,307,分流/不分流进样口的维护分流平板,移开保温套,移开色谱柱接头,松开螺母,分流平板,垫片,螺母,在溶剂中超声处理 烘干 用非氯化剂去活化 HMDS BSTFA BSA TSIM 用溶剂清洗 先惰性洗涤 - 甲苯 再用醇类清洗- 甲醇 烘干,308,分流/不分流进样口的维护更换分流捕集阱,1 拧松固定夹螺丝，拧松两颗定位螺丝,2.使用扳手将分流捕集阱拧下,3.更换分流捕集阱及两个O形环,309,常见柱流失离子碎片,310,普通维护建议,了解待测样品的含量，尽量减少进样量。如果全 部未知，最好先摸色谱条件. 避免用大孔径柱 避免用厚液膜柱 用检

18、测性能的标样检查系统性能 定期进行预防性保养，减少维修次数 保留仪器维护档案,311,色谱柱的维护避免色谱柱断裂,不要让色谱柱接触尖锐的边角 避免太紧缠绕或弯曲色谱柱,312,色谱柱的维护避免色谱柱热损坏,不要超过指定的柱温上限： 等温上限：柱子能够无限期承受的温度 程序升温上限：最高柱温，色谱柱只能在此温度下工作5-10分钟 将GC最高柱箱温度设定为色谱柱的温度上限。若柱箱中有两根色谱柱，则确保将最高柱箱温度设定为柱温上限最低的色谱柱的温度上限值。 老化柱子 :程序升温、分段升温、反复升温、充足载气。,313,色谱柱的维护避免色谱柱氧化损坏,通过以下措施保持系统无氧气和泄漏。 进行定期的检漏

19、工作 定期更换隔垫 采用高质量载气 安装并维护氧气捕集阱 在气瓶完全空之前就更换,314,色谱柱的维护避免色谱柱化学损坏,进行样品制备，从样品中去掉无机酸碱 安装保护柱并定期截去柱头的一段 若必须使用酸碱，则选择一种有机替代物或盐酸或氨水,315,色谱柱的保存,1.将色谱柱堵头插在柱两端以防止碎片进入柱内。 2.重新安装色谱柱的时候需要从柱头截去24厘米 以确保隔垫碎屑不会堵塞在柱子内。,色谱柱的堵头出厂时配有。请妥善保管。保存色谱柱的时候装上堵头。,316,日常维护 - MSD,317,真空系统维护,检查前级泵油（每周） 检查校准样品瓶（每 6 个月） 气震前级泵（对于使用氨气反应气的 MSD 应每日执行） 更换前级泵油（每 6 个月；对于使用氨气反应气的 CI MSD 应每 3