血小板 抗原抗体检测

1、血小板抗原抗体、广州医科大学附属第五医院输血科、目录、血小板相关疾病、血小板抗原、血小板抗体、抗体检测和交叉配血、血小板抗原、血小板抗原是指血小板膜中存在的刺激生物体的抗体的血小板相关抗原：红血球血型抗原： ABO、Lewis和p系抗原等， 无RH抗原白血球抗原： HLA抗原、血小板特异抗原(humanplatantigen，HPA )、血小板抗原、血型抗原： ABO、Lewis和p系抗原等，无RH抗原：血小板表面的a、b抗原主要有两个来源：大部分是血小板本身固有的(从巨核细胞分化)小部分从血浆吸附在体外加热o型血小板和a或b型血清时，血小板带有a或b抗原。 由于个体间血小板膜ABH抗原量存在

2、差异，同一个体每血小板的抗原量差异非常大，所以进口ABH不兼容血液时，一部分血小板迅速被破坏，其他血小板的生命力不受影响，血小板抗原、白细胞抗原： HLA抗原血小板中存在HLA-I系抗原，主要是HLA-A和HLA-B部位的抗原(HLA-系分子是血小板的固有蛋白质，少量从血浆中吸附。 血小板HLA抗原的免疫原性比白血球弱。 血小板抗原、血小板特异抗原(human platelet antigen，HPA )主要位于人血小板膜的大种类抗原，被称为血小板特异抗原的高频抗原为“a”，低频抗原为“b”，人血小板同种抗原(HPA )自1959年被发现以来，至今已检测出24个抗原其中HPA-1、-2、-3、

3、-4 -5、-6、-15被血小板命名委员会(PNC )列入抗原系统，含有14个对偶抗原，但HPA-7-14、-16、-17因未检测出对偶抗原而没有达到系统命名标准。 血小板抗原，血小板抗原，血小板抗原，血小板抗原，24个抗原主要是糖蛋白gpiib，pgiiia，pgib， 分布在pgaia和CD109上的GPa(CD61 )具有9种HPA抗原，包括HPA-1、HPA-4、HPA-6bw、HPA-7bw、HPA-8bw、HPA-10bw、HPA-11bw、HPA-14bw、HPA-14bw 在GPb上携带HPA-3和HPA-9bw，通过血小板抗体、抗体检查和交叉配血、预防和治疗措施避免流产、出血

4、等，血小板相容性检查、抗原成套、抗体检查、血小板供应商银行的设立，筛选基因型相容性的供应商以避免血小板抗体的产生， 诊断血小板免疫性疾病，、交叉合身性检查，筛选血小板适合性供应商，减少血小板给药，避免紫癜、出血、死亡血小板抗原的定型化， 血清学定型化用已知的特异性抗体检测血小板血型抗原的缺点：特异性抗体来源困难-人血清中血小板抗体通常缺乏多特异性-单克隆抗体，目前国际上只有HPA-1a单克隆抗体，没有其他HPA单克隆抗体。基因组限制片段多态性分析(RFLP )序列特异性寡核苷酸聚合酶链反应(PCR-SSO )序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP )、血小板抗体检测血清学ELISISA法(

5、酶免疫试验)血小板抗原单抗特异性固相化法(MAIPA )固相血小板免疫血清学试验(s 简易致敏红细胞血小板血清学试验(SEPSA )流式细胞仪改良抗原捕获(ELISISA )免疫荧光试验，简易致敏红细胞血小板血清学试验SEPSA简易致敏红细胞血小板血清学试验SEPSA， 直接测定法血小板表面结合血小板抗体的测定间接测定法血清内抗血小板抗体的测定交叉配血试验中配合的血小板供体质量控制阴阳性对照、ELISA法(酶免疫试验)、单克隆抗体免疫固定血小板抗原法(MAIPA ) :此法首先制备羊抗小鼠IgG包复多孔板， 将小鼠抗人血小板糖蛋白单克隆抗体和具有抗体的血小板一起孵出，将孵出的复合体放入多孔板上

6、孵出、清洗，最后加入酶联合羊抗人抗体和酶反应基质显色，定量测定血小板抗体。 血小板相关疾病，临床上由血小板血型抗原引起的血小板减少症主要是血小板输血无效(PTR )输血后紫癜(PTP )新生儿同种免疫血小板减少症(FMAIT/NAIT )被动免疫血小板减少症(PAT )移植相关同种免疫血小板减少症(TAT )， 血小板相关疾病血小板免疫性疾病血小板输血无效症新生儿血小板减少症输血后紫癜自身免疫性血小板减少症药物引起的血小板减少症移植相关的血小板减少症、血小板抗原同种异体抗原HLA-I、HPA、ABH同种抗原gpiib/iiia、CD36自身抗原gpiib/iiia gpgib/ix药物依赖性抗

7、原肝素、奎宁等非特异性抗原，临床病症郁斑流产(颅内)出血死亡，血小板相关疾病血小板给药无效(PTR )，plaelettransfusionrefractoriness，PTR:患者足够治疗量(2.5x1011个/次) 一般在临床上，如果血小板给药至少2次以上效果不好，就可以进行PTR诊断。 1 .给药后1小时CCI 7500/L 12小时CCI 6000/L 24小时CCI 4500/L连续3次，可以判断血小板无效给药。 血小板恢复率(PR% )血小板给药后，可以判断PR%20%血小板无效给药，由HLA抗体引起的PTR约占80%，其次是HPA或ABO抗体。 目前，由于临床广泛输血白细胞的成分

8、血治疗血液病，发病率已大幅度下降，血小板相关疾病血小板输血无效(PTR )非免疫学原因(67.3% )，发热脾功能亢进感染药物作用DIC血小板的质量问题免疫学原因(17.5% ) HLA抗体HPA抗体ABO血型不合格血小板自身抗体药物预防1 .白血球过滤2 .照射3. HLA和HPA健身注射，血小板相关疾病血小板注射无效(ptr ) plaelettransfusionrefractoriness，PTR:患者治疗量足够的血小板输血后，血液循环中血小板数量没有有效提高，临床出血的表现没有明显改善，血小板治疗处于不恰当状态。 一般在临床上，如果血小板给药至少2次以上效果不好，就可以进行PTR诊断

9、。 1 .给药后1小时CCI 7500/L 12小时CCI 6000/L 24小时CCI 4500/L连续3次，可以判断血小板无效给药。 血小板恢复率(PR% )血小板给药后，可以判断PR%20%血小板无效给药，由HLA抗体引起的PTR约占80%，其次是HPA或ABO抗体。目前，临床上广泛输血白细胞分血治疗血液病，发病率大幅下降，因此血小板相关疾病输血后紫癜、输血后血小板减少性紫癜(post-transfthrombobocytopenicpurpura，PTTP )又称为“输血后紫癜”，post-post 患者因不兼容的血小板/全血或多次妊娠而产生血小板抗体，破坏进口的自身血小板，减少急性和

10、暂时性的血小板。 患者多见(95% )有妊娠和输血史的老年女性。 血小板相关疾病输血后紫癜，HPA-1a是引起该病的主要抗原。 我国大部分为HPA-1a抗原阳性。 实验室检查：血小板数下降，骨髓巨核细胞增殖活跃，血清学检查存在血小板抗体，但有效值与病情无关。 本病给血小板无效，有加重病情的危险，肾上腺皮质激素虽然不能缩短病程，但有改善出血症状的可能性。 主要治疗措施是血浆置换或血液交换，血浆交换优于全血交换。 输血后血小板显着减少，发生严重出血症状时，立即进行血浆置换，一次更换65%85%的血浆量，平均15天后出血症状减退，血小板数上升。 尽量避免或减少含有血小板和血小板的血液制品的输血。 血

11、小板相关疾病-新生儿同种免疫血小板减少症(FMAIT/NAIT )、胎儿血小板怀孕时或分娩时母体循环胎儿血小板刺激母体产生抗体母亲IgG抗体通过胎盘进入胎儿体内使胎儿血小板过敏血小板破坏增加FAIT、血小板相关疾病-新生儿同种免疫血小板减少症(FMAIT/NAIT )，第一子发病治疗：输入匹配的血小板提高患儿血小板数量。 如果找不到相符的血小板，可以给接受洗涤和放射线照射的母亲的血小板输血，对患儿进行放血治疗前交叉配血：母亲血清和供应商血小板进行交叉配血试验的预防：母亲在妊娠期间可以进行血浆置换，被动免疫血小板减少症和与移植相关的同种免疫血小板减少症， passiveallioidmmunet

12、hrombcytopenia，PAT:患者进口含有血小板特异抗体的血浆，数小时内出现血小板减少症，约1周后缓解。 如果发现献血者的血浆、血清中含有血小板特异抗体，就应该立即停止献血，这样的献血者多有妊娠史。 transplant ation-associationaloimmunentthrombcytopenia，t 特发性血小板减少性紫癜(idiopathicthrombocytopeniapurpura，I T P)ITP，发病机制一，抗血小板抗体约75%ITP患者可检测血小板相关自身抗体(PAIg )，后者在IgG、IgA中多为IgM。 抗体通过Fab片段与血小板膜糖蛋白(gpiib/

13、iiia等)结合。 带有抗体的血小板与单核巨噬细胞表面的FC受体接触，容易被吞噬破坏。 另外，抗血小板抗体对巨核细胞分化也有抑制作用。 二、缩短血小板生成时间ITP血小板生存可缩短到23天以下，ITP患者的血小板容易被抑制在脾脏。 脾脏产生抗血小板抗体，脾内巨噬细胞参与血小板破坏过程，切除脾对大部分患者有效。 特发性血小板减少性紫癜(idiopathicthrombcytopeniapurpura，I T P)ITP，急性型：儿童多见，首次有上感，主要由病毒细菌引起。 有寒热、全身皮肤粘膜出血(瘢痕点、紫癜和血肿)、内脏出血。 11111000000000000000000652慢性型：主要见

14、于40岁以下女青年，症状多偶然发现，也有皮肤粘膜出血，内脏出血少，月经过多者可引起贫血。特发性血小板减少性紫癜(idiopathicthrombcytopeniapurpura，I T P)ITP，特发性血小板减少性紫癜(idiopathicthrombcytopeniapurpura，I T P)ITP， LIFECODES PAKAUTO试剂盒特发性血小板减少性紫癜(idiopathicthrombocytopeniapurpura，I T P)ITP，一、糖皮质激素二、脾切除三、免疫抑制剂四、高剂量免疫球蛋白和血浆置换， 血栓性血小板减少性紫癜(thromboticthrombocyto

15、penicpurpura，TTP) TTP是一种严重的分散性血栓性微血管病，以微血管病性溶血性贫血、血小板聚集消耗性减少和微小血栓形成引起的器官损害(肾脏、中枢神经系统等)为特征。 以前TTP预后差，病程短，病死率不能及时治疗8090%。 随着血浆置换的临床应用，预后有很大变化，病死率下降到1020%。 临床的五个特征：血小板减少性紫癜、微血管性溶血、中枢神经系统症状、发热及肾脏损害被称为TTP五连征，只有前三个特征被称为三连征。 大多数TTP患者发病急迫，病情危险，不治疗死亡率高达90%。 TTP，大多数患者都是由vWF蛋白分解酶(vWFCP )异常引起的。 vWFCP是在正常止血过程中必须处于高剪断力血流状态的内皮细胞表现、血小板表面受体和vWF多聚物三者之间的相互作用，导致血小板