临床PCR检测的标准化

1、临床聚合酶链反应检测标准化，李，卫生部临床检验中心，标准化的概念，标准：字标准3360材料标准化：通过标准化的测定方法和检测程序，测量结果可以追溯到同一标准物质或参考方法，从而使测定结果在不同方法，不同试剂和不同实验之间具有可比性。标准物质的标准化、测定方法和检测程序之间的关系，为什么要标准化？通过标准化来提高实验室测定的准确性，从而提高不同实验室之间结果的可比性。没有标准化，不同试剂、不同方法和不同实验室的测定结果不可能一致和可比，不可能正确评价一种方法和一种试剂。标准化的先决条件、测试物质的特性和标准物质的特性，以及世界卫生组织(世卫组织)生物标准化专家委员会(ECBS):负责建立生物物质

2、的国际标准和参考材料。国家生物标准和控制研究所：世卫组织通过它提供国际标准。一些地区和区域性组织：美国疾病预防控制中心、美国儿科学会、美国国家卫生研究院国际科学协会：IFCC、国家临床实验室标准化委员会、美国临床化学学会、加拿大临床化学学会、加拿大、AACC和CSCC等。组织编写部分临床检验指南及其他文件、标准和质控品(1)。能够提供标准的国际标准化组织有：世界卫生组织生物标准化专家委员会(ECBS)、国家生物标准与控制研究所(美国国家生物标准与控制研究所)、美国疾病控制与预防中心(美国疾病控制与预防中心)、美国国家卫生研究所(美国国家卫生研究所)、IFCC等。有中国药品生物制品检定所、卫生部

3、临床检验中心、标准品和质控品(2)。在美国，临床聚合酶链反应检测试剂必须经美国食品和药物管理局批准才能用于临床；在德国，监督机构是INSTAND；在中国，SFDA负责试剂的批准号。仅使用标准不能保证聚合酶链反应结果的可比性，但其在保证聚合酶链反应检测质量方面的重要性是不可替代的。(3)标准品和质控品，标准品和质控品的功能：可用作临床试验的校准品；它可以用来评估测试的有效性；作为室内质量控制样品；作为房间质量评估的样本，国际标准分类：可分为三个等级：一级、二级和三级。一级标准数量有限，可使用10-20年，并含有载体蛋白。一级标准可用于校准二级和三级标准。在国际标准中，二级标准可用于保持校准。国内

4、标准分为一级和二级。标准和质量控制(4)，标准：病毒核酸国际标准的单位以国际单位制表示，关于标准单位和可追溯性、长度单位的测定和可追溯性、标准值测定的参考方法：和最终方法：的问题是具有高精度和无系统偏差的参考方法。参考方法：应具有较低的测定下限，不受非特异性干扰和与相关化合物的交叉反应，并且易于获得。为了保持参考方法的有效性，有必要建立一个参考实验室网络。国际单位的起源，国际单位的定义，国际单位):国际标准的应用目的是为确定提供一个通用的标准单位。使用相同的测量生物单位来指定标准或工作校准品的单位。国际核酸检测标准，HBV DNA尼布斯卡1999 97/746 106国际单位/毫升丙型肝炎病毒

5、核糖核酸尼布斯卡1997 96/790 105国际单位/毫升尼布斯卡2005 96/798 105国际单位/毫升HIV-1核糖核酸尼布斯卡1998 97/656 105国际单位/瓶HAV核糖核酸尼布斯卡2003 00/560 105国际单位/毫升B19脱氧核糖核酸尼布斯卡2000 99 HBV DNA浓度NCCL 2005 GBW (E) 090031 1.03106国际单位/毫升NCCL 2007 GBW 09151丙型肝炎病毒核糖核酸NCCL 2005 GBW (E) 090032 1.29105国际单位/毫升NCCL 2007 GBW 09152测定方法的标准化，以及测定方法的组成(1 (2)扩增和产物分析方法； (3)如果是靶核酸，有一个反转录过程。核酸提取方法、抑制剂去除的有效性；简单。扩增和产物分析方法、实时荧光聚合酶链反应-酶联免疫吸附法等。扩增检测条件(循环条件、试剂等)的理想化。)。假阴性质控最有效的方法。工作程序的标准化，标本采集程