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文档简介
1、培养液中酵母菌种群数量的变化,探究:,基 础 回 扣 1、酵母菌 酵母菌是单细胞真核生物。 生长周期短,增殖速度快, 还可以用酵母菌作为实验材料研究(探究酵母菌的呼吸方式,判断细胞的死活探究膜的透性),2、种群数量的变化 种群数量的变化包括增长、波动、稳定、下降等 “S”型曲线有一个K值,即环境容纳量。 种群数量的增长也受到许多环境因素(如温度、培养液的pH、培养液的养分种类和浓度、代谢产物等)的影响。,探究过程,1提出问题: 2作出假设: 3设计实验: 4进行实验: 5分析结果和 表达交流: 6得出结论:,培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的?,酵母菌在开始一段时间呈“J”型增长,随着
2、时间的推移,由于资源和空间有限,呈“S”型增长。,连续培养5天,每天用显微镜和血球计数板计数出酵母菌种群密度,各小组汇报实验结果,结合前4天的结果,画出酵母种群增长的曲线图并进行分析。,酵母菌在开始一段时间呈“J”型增长,但随着时间的推移,由于资源和空间有限,将呈“S”型增长,并最终将全部死亡。,3设计实验:,将10mL无菌马铃薯培养液或肉汤培养液加入试管中; 将酵母菌接种入试管中的培养液中混合均匀; 将试管在28条件下连续培养5d; 每天取样计数酵母菌数量; 分析结果,得出结论。,是否设置对照组和多组重复实验?,如何取样计数?记录表怎样设计?计数时有哪些注意事项?,计数室,计数室(中间大方格
3、)的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为_mm3 ,合_mL。,1mm,0.1,110-4,血球计数板:一种专门计数较大单细胞微生物的仪器,计数室,计数室分为25中格(双线边),每一中格又分为16小格,计数室是由_个小格组成,2516=400,如何计数?,五点取样法,样方法,每mL培养液中酵母菌数量=,=A (平均每个中格酵母细胞数)25104,稀释倍数,A1,A2,A5,A3,A4,第 1 天,第 4 天,第 6 天,第 7 天,死亡,酵母菌数量变化记录表,计数时有哪些注意事项?,从试管中吸出培养液进行计数之前,要将试管轻轻震荡几次; 如果酵母菌浓度过大,应先稀释。,对于压在中格界线
4、上的酵母菌,一般只取相邻两边及夹角计数;,对于已经出芽的酵母菌,芽体达到母细胞大小一半时,即可作为两个菌体计算;已死亡的酵母菌不计数。,每个样品一般计数三次,取其平均值。,培养液中酵母菌种群数量的变化,死亡,在计数前,还应有哪些步骤?需注意些什么?,培养液配制 灭菌 接种 培养,无菌操作,培养条件,针对“培养液中酵母菌种群数量的动态变化”,有人提出了新的问题,某同学按下表完成了有关实验。,温度、营养物质对酵母菌生长的影响,以计数酵母菌为例 (1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数. (2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可. (3
5、)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片. (4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内.,血球计数板的使用,(5)计数时,如果使用16格25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25格16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数. (6)当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和左方线上的酵母细胞 (7)对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌
6、液中所含的酵母菌个数.,3.计算公式 (1)16格25格的血球计数板计算公式: 酵母细胞数/ml= 100小格内酵母细胞个数/100400104稀释倍数 (2)25格x16格的血球计数板计算公式: 酵母细胞数/ml= 80小格内酵母细胞个数/80400104稀释倍数,怎样进行酵母菌的计数?,对一支试管中的培养液(可定为10ml)中的酵母菌逐个计数是非常困难的,可以采用抽样检测的方法:先将盖玻片放在计数室上,用吸管吸取培养液,滴于盖玻片边缘,让培养液自行渗入,多余培养液用滤纸吸去,稍待片刻,待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部,将计数板放在载物台的中央,计数一个小方格内的酵母菌数量,再以此为根据,估
7、算计算中的酵母菌总数,盖玻片下,培养液厚度为0.1mm,可算出10ml培养液中酵母菌总数的公式:2.5104x(x为小方格内酵母菌数),从试管中吸出培养液进行计数之前,建议你将试管轻轻振荡几次。这是为什么? 本探究需要设置对照吗?如果需要请讨论对照组应怎样设计和操作;如果不需要,请说明理由。 需要做重复实验吗?,目的是使培养液中的酵母菌均匀分布,以保证估算的准确性,减少误差。,不需要,本实验旨在探究培养液中酵母菌在一定条件下的种群数量变化,只要分组实验,获得平均数值即可。,不用重复,只要分组实验获得平均值即可。,5、怎样记录结果?记录表怎样设计? 如果一个小方格内酵母菌过多,难以计数,应采取怎
8、样的措施?,摇匀试管取1mL酵母菌培养液稀释n倍后,再用血球计数板计数,所得数值乘以n2.5104,即为10mL酵母菌液中酵母菌个数。,只计数相邻两边及其顶角的酵母菌数。,7 对于压在小方格界线上的酵母菌,应当怎样计数?,设计实验: A组为实验组,装培养液10 mL,酵母菌母液0.1mL,环境温度28。 B组装培养液10 mL,酵母菌母液0.1mL,环境温度5,与A组形成温度条件对照。 C组不装培养液,只装无菌水10mL,酵母菌母液0.1mL,环境温度28,与A组形成营养条件对照。,计数 计数:首先取样,每 天取样时间大体一致,并要遵守无菌操作规范。每次取样前要试管振荡摇匀,正确地使用1mL刻度吸管将lmL酵母菌培养液移入1支干净的试管里,然后用滴管吸取1滴培养
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