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文档简介

1、动物组织块,细胞悬浮,原代培养,传代培养,胰蛋白酶处理分散到单个细胞中,年轻动物的器官组织;动物胚胎、抑制细胞附着接触、原代培养传代培养、添加培养液、胰蛋白酶等附着细胞处理、适宜条件、不死细胞、上课前双打、代孕、胚胎移植、体核移植过程(体细胞克隆动物)、存在的问题(1)成功率极低,主题2细胞工程,2.2.2动物细胞融合和单克隆抗体,主要准备人:姚雪峰讨论时间:15周上课时间:17周,链接:学习目标,1。动物细胞融合与植物细胞杂交的差异和联系。简述动物细胞融合及单克隆抗体的制备过程。3.了解单克隆抗体在医学实践中的应用,并举例说明其应用。阅读教材第5254页,回答以下问题:链接:问题地图,1。植

2、物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术有何不同?日常血清抗体和单克隆抗体有什么区别?如何准备单克隆抗体?单克隆抗体的主要用途是什么?第一,动物细胞融合,93336945,链接:点刻术,细胞融合是正常的生命活动,是指两个细胞融合,受精作用,1,概念:两个或更多动物细胞结合形成一个细胞的过程。2,结果,形成单核细胞的混合细胞,3,原理,细胞膜流动性,4,诱导方法,物理方法:离心,振动,电击,化学方法:聚乙二醇(PEG),生物法:惰性病毒重新排列细胞膜的蛋白质分子和脂质,细胞膜打开,细胞融合。2.不灭病毒不会诱导细胞融合,而是感染细胞。5,过程:动物细胞a动物细胞b,诱导,融合,1个完整的杂交细胞AB,

3、(膜融合,质量融合),(核融合),细胞融合完成的标记3360核融合为一个核,意思:性交,7,应用:成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤及新生物品种培育等的重要手段。单克隆抗体,动物细胞融合,杂交细胞,愈伤组织,杂交植物,植物细胞a,植物细胞b,原生质体a,原生质体b,原生质体b,植物细胞杂交,墙,原生质体融合,植物细胞杂交,动物细胞融合比较,主要用于制造,单克隆抗体,获得杂交植物,用途,物理,化学方法,(左),惰性病毒,物理(离心,振动,电刺激),化学(聚乙二醇),化学(聚乙二醇)植物细胞杂交,动物细胞融合比较,例1下图显示了细胞融合技术的一些过程。图中显示:(1)如果a,b细胞是动物细胞,则经常

4、用作从a和b细胞向c细胞诱导融合的过程。a,b融合成c的过程表明细胞膜具有特性。融合完成的标志是。得到的c细胞是。如果惰性病毒、诱导剂、流动性、核聚变、杂交细胞、(2) a、b细胞是植物细胞的话,这种细胞已经通过酶解去除,这种酶可能成为酶,因此产生的a和b细胞。从a、b到c细胞的过程中常用的物理方法是;融合完成的象征是;形成的d细胞还使用技术将d培养成植物。(3)如果a是人类细胞,则b是老鼠细胞,用红色和绿色的荧光染料分别标记细胞膜的蛋白质。c细胞形成后,细胞的一半变成红色和绿色的荧光。到d细胞阶段,两种颜色的荧光均匀分布的原因是。细胞壁,纤维素酶和果胶,原生质体,离心,振动,电击,新细胞壁的

5、形成,植物组织培养,细胞膜的蛋白质是可运动的,2,单克隆抗体,抗体是什么?产生什么样的细胞?主要分布在哪里?扮演什么角色?效果b细胞、血清、特定免疫效果、抗体:身体受抗原刺激而产生,是具有免疫功能的球蛋白,能与抗原特定结合。阅读以下文本资料,思考以下问题:长期以来,为了获得抗体,反复向动物注射某种抗原后,使用了从动物血清中分离必需抗体的方法。用这种方法得到的抗体不仅产量低,抗体特异性低,纯度低,反应不够灵敏。据悉,在动物的免疫反应过程中,体内b细胞可以产生数百万种以上的特定抗体,但每个b细胞的化学性质单一,只分泌一种特定抗体。要获得大量的单抗体,必须用单个b细胞进行无性生殖,即克隆。1,在上述

6、文本资料中查找单克隆抗体的概念。如何获得单克隆抗体?提示1:只能使用细胞培养技术吗?提示2:我们学到的细胞能无限增殖吗?提示3: b细胞有能力产生抗体,肿瘤细胞有能力无限增殖吗?通过用单个b细胞进行无性繁殖(克隆)而获得的细胞群,可以分泌出被称为单克隆抗体的化学单一、特异性抗体。如果受到抗原刺激,就可以分泌对该抗原的特定抗体,对体液免疫有重要的功能。b淋巴细胞本身就是末日分化细胞,通常不再分裂细胞,存活一段时间后,个短命细胞b淋巴细胞死亡。因此,b淋巴细胞在体外培养时不能无限增殖,癌细胞可以无限增殖。骨髓瘤细胞:营养条件永远分割和生存,尽可能恶性增殖的转基因细胞长寿命细胞。现在经过筛选和驯化,

7、多个骨髓瘤细胞株没有抗体分泌物。因此,如果同时使用小鼠骨髓瘤细胞,就能得到无限增殖、产生单一抗体的细胞。特征:低产量、特异性差异、低纯度、敏感不足的常规抗体制备,1个b淋巴细胞:1个特定抗体,单克隆抗体,异种杂交瘤细胞,小鼠骨髓瘤细胞:无限增殖和融合,反复给动物注射抗原,产生动物在血清中需要的抗体优点:特异性强,灵敏度高。2,准备单克隆抗体,1。单克隆抗体制备过程,3。为什么选两次?第二次审查怎么办?多孔培养板每个孔只有一个杂交瘤细胞。首次筛选杂交瘤细胞(多种)。二次筛选获得了能产生特定抗体的杂交细胞群。这个过程使用什么原理?免疫原理,细胞融合原理和动物细胞培养原理,2 .为什么小鼠骨髓瘤细胞

8、与b细胞融合和选择?这样融合的杂交瘤细胞继承了双亲细胞的遗传物质,不仅具有b细胞分泌抗体的能力,还具有无限增殖的能力,可以得到多种单克隆抗体。事故:2。单克隆抗体的优点:3 .单克隆抗体的应用,特异性高,灵敏度高,大量准备,(1)作为诊断试剂最广泛使用的准确、高效、简单、快速,(2)用于疾病和携带药物治疗的“生物导弹”=单克隆抗体药物单克隆抗体指南,作为弹头主要用于治疗癌症的药物,单克隆抗体作为载体携带抗癌药物。,例2下图为单克隆抗体的制备过程,根据问题:(1)抗体的化学性质主要分布在,组氨酸和外部分泌液中。(2) 如果想通过过程获得所需的b淋巴细胞,首先要处理老鼠。这种处理的本质是鼠标内部发

9、生的过程。制造单克隆抗体的b淋巴细胞通常从收集。球蛋白,血清,注射(相应的)抗原,体液免疫,脾脏,(3)过程除了诱导植物细胞原生质体融合的方法外,还可以用作诱导剂。细胞融合两个后,可能出现一种融合细胞。(4)过程中异种杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖和氨基酸的方式。(5)过程要选择可继续培养的细胞群。特定抗体,灭活病毒,3,活性转运,2个“过程”,“动物细胞融合过程”,单克隆抗体准备过程,3个“一个”,诱导细胞融合的新方法灭活病毒,新细胞杂交瘤细胞,优点在动物细胞融合和植物细胞杂交的比较中,准确的是()a .结果是相同的b .杂交细胞的形成过程基本相同,c .操作中酶作用相同,d .诱导融合的手

10、段相同,b,link:糖检查,2 .能融合动物细胞的特有诱导因子是。a .离心力B .惰性病毒c .电刺激d .振动,B,3,科学家将小鼠骨髓瘤细胞与特定细胞融合,获得杂交细胞。培养后会产生大量的单克隆抗体。与骨髓瘢痕细胞融合的是()A .免疫的b淋巴细胞b .未免疫的t淋巴细胞c .未免疫的t淋巴细胞d .未免疫的b淋巴细胞D. A,4 .要获得大量的单克隆抗体,需要用单个b淋巴细胞无性繁殖,形成细胞群。原因是()。A. b淋巴细胞在体外培养条件下可无限增殖。b .可以在动物内的b淋巴细胞产生数百万个抗体。c .每个b淋巴细胞参与特定的免疫反应。d,5 .有些b淋巴细胞只分泌一种特定的抗体。

11、有些学生在学习“细胞工程”的时候,正在比较动植物细胞工程的内容。认为错了就行了。B、6。在制造单克隆抗体的过程中,骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后,应选择杂交绵羊细胞作为特定培养基,在该培养基中未能存活和增殖的细胞为()淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞B淋巴细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞()B . B .B .c . 7 .下图显示了单克隆抗体,(1)_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _(3)单克隆抗体与通常的血清抗体相比,最大的优越性是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _(4)动物细胞融合除了使用植物细胞原生质体融合常用的诱导物外,还使用_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _(5)选定的异种杂交瘤细胞具有骨髓瘤细胞的_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _特性和淋巴细胞的(6)淋巴细胞是动物

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