维生素类药物的分析 (4)

1、.第1，5章维生素类药物分析The Analysis of Vitamines，2，维生素是维持人体正常生理功能所需的生物活性物质。 *如果缺少某种维生素，就会引起维生素不足症，影响人体的正常生理功能。 如： VA缺乏症夜盲症VB1缺乏症脚气症，概要，3，脂溶性：溶解性别分类，有VA、VD、VE、VK等b族(VB1、VB2等)、VC、烟酸、叶酸、泛酸等，4，第一节维生素a的分析R=H VA醇VA1 R=COCH3 VA乙酸酯R=COC15H31 VA棕榈酸酯、5、(1)环己烯共轭多(2)天然VA侧链为全反式(3)天然来源主要是肝油，乙酸酯、棕榈酸酯等结构特征：6、a .紫外吸收*具有共轭多烯侧

2、链-紫外吸收。 *最大吸收波长为325328nm，根据VA的存在状态和使用的溶剂，最大吸收波长的位置不同，2 .性质，7，*不溶于水*醚，氯仿，异丙醇，环己烷，溶解于脂肪和油。 b .溶解性：8，*共轭多烯侧链-性质非常活跃，c .不稳定，9，维生素a的氧化物：I .环氧化合物，ii .维生素a醛，iii .维生素a酸，or，10，鉴别含量测定，SbCl3作用- carr-p 2 .鉴别试验1 .三氯化锑反应、无水、12、2 .紫外吸收光谱VA无水乙醇溶液在326nm下最大吸收。13、确认醇或酯为乙酸酯或其他酸酯，例： VA及其标准品用环己烷溶解展开剂：环己烷-乙醚(80:20 ) 板：硅胶g

3、发色： SbCl3T.S. Rf: VA醇0.08 VA醋酸酯0.41 VA棕榈酸酯0.75，3，TLC :14，3 .含量测定，1 .概要*共轭多烯的结构-特征性紫外吸收。 *有关物质结构相似，在维生素a的最大吸收波长附近也有吸收，对测定有影响。 * Morton和Stubbs等人提出了3点补正法。 紫外分光光度法-三点校正法，15，2 .原理(根据，假设)，I .物质对光的吸收有加性，也就是说，ii .维生素a中的不相关吸收在310340nm的范围内几乎是直线的。 有效价为维生素A1的40%、max345350nm、3 .有关物质的吸收、*a .维生素a的衍生物、I .维生素A2脱氢维生素

4、a、17、有效价为维生素A1、max385390nm、* b .维生素a的氧化物被介绍ii .维生素A3脱水维生素a，18，* c .合成时的中间体，侧有4个双键-异构体。 现在发现了包括维生素a在内的6种异构体。 这些是维生素a异构体，维生素a醇的二聚体，没有生物活性，19，20，新维生素Aa，新维生素Ab，21，新维生素Ac，异维生素Aa，22，异维生素Ab，维生素a， 2=316纳米； 3=340nm，这两个波长分别为1两侧的12nm，即25、ii .等吸光光度法：1=325nm； 2=310nm； 3=334nm，VA在这两个波长下的吸光度应该等于1处的吸光度，也就是说，26、5 .方

5、法、Chp搭载了两种方法。 第一法(适用于酯式维生素a的测定)，a .操作方法，27，I .最大吸收波长确认max为326329nm，第一法测定。 max不是用326329nm，而是用第二法测定的。 为了计算b .计算方法，28，29，ii .吸收率比和比之差，首先计算吸收率比。 计算吸收率的比差。 计算吸收度校正公式：30、31、32、iii .校正吸收度，并计算吸收度校正公式：33、34、iv换算系数、定义：相当于各数值的有效价格。 35，1ui=0.344 g全反式维生素a乙酸酯，1g的维生素a乙酸酯，36，维生素a乙酸酯，37，练习问题：维生素AD膏中维生素a的含量的测定：平均膏重量为

6、0.0815g的维生素a测量数据如下表所示，39，首先要求样品。 根据比尔定律，a校正吸收率以测量吸收率or，40首先计算吸收率比率和吸收率比率的差。 (填写上表)可知，应该用测定的328nm下的吸收率来计算。 然后，需要计算校正吸收度和未校正的吸收度之差的百分比，根据结果计算校正吸收度。 因此，维生素a的含量为：这样，42，第二种法(皂化法): 消除植物油的干扰：适合于VA醇，用43，b.300，310，325和334nm测定吸收率，求出max c .d .校正式A325 (校正)=6.815 a325-2.555 a310-4.260 a334e .要求44，5，注意事项(1)VA因光氧化

7、容易变质，操作应在半暗室中迅速进行，所使用的试剂不含氧化性物质。 防止VA紫外线和氧化性物质的破坏。 用.45、(2)三校正法测定时，一点是max，剩下的两点是吸收曲线的上升和下降陡坡。 对波长的正确性的要求很严格。 在340nm下，如果波长误差为0.5nm，则影响结果-3.12.07%。 因此，测定中使用的机器波长的读取值必须注意，并根据需要设定基准。46、维生素a乙酸酯颗粒含量测定：采集内容物39.1 mg，溶解环己烷稀释成100ml，用以下5个波长测定吸收率a的值：平均颗粒内容物重量为0.08736g； 维生素a的显示量用3000 IU/丸药求出：维生素a的显示量的比例是？ 测定、47、

8、维生素a乙酸酯丸的含量，采集内容物w，加入环己烷溶解，稀释成10ml，均匀，精密计量0.1ml，加入环己烷，稀释成10ml，其浓度为915IU/ml。 已知内容物的平均重量为80.0mg，每发射的显示量为10000IU。 样品量(w )的范围是多少？48，第二节维生素e的分析，名称：外消旋-生育酚乙酸酯母核：苯二氢吡喃衍生物乙酰化成苯环的酚性羟基侧链：脂肪链，1 .化学结构和性质，49，2 2、水解后的氧化反应：本品在碱性条件下水解，得到-生育酚，在吡啶和氯化铁的试验液的作用下，反应产生血色的配离子。 取VE的0.01%无水乙醇液：max=284nm min=254nm，51，3，杂质检查游离

9、生育酚： ChP2000 P798为0.1g样品，用铈量法取Ce(SO4)2 (1)铈量法1，原理： VE用硫酸加热回流，水解成生育酚，用硫酸铈定量氧化成对生育酚，用过量的硫酸铈氧化二苯胺指示剂指示滴定的终点。 终点：亮黄灰紫空白试验，四，含量测定，53，2，反应条件(1)VE优选在H2SO4酸性条件下水解。 碱性溶液中的游离生育酚容易被氧化。 Ce(SO4)2液滴定在酸性溶液中进行，碱性中生成碱性盐，影响测定。54、(2)Ce(SO4)2溶解于酸水溶液中，不溶解于醇，-生育酚溶解于酸中，不溶解于水，在滴定过程中需要一定浓度的乙醇。 (3)本法适用于高纯度的VE供试品。55、(二)气相色谱：

10、Chp2000 1、色谱条件和系统适应性试验柱：2m4mmI.D .硼硅酸玻璃柱、内置硅藻土(80100目)的固定相：硅酮(OV-17 )涂布浓度2%载体含有流速：固定相：含有优选1820分钟的5%固定相：优选3032分钟，柱温度： 265内标： n32烷基检测器： FID (氢火焰电离检测器)性能要求：理论级数在VE峰值为500以上，VE峰值和内标，57，2，溶液配制：内标准溶液： n32烷烃的环己烷溶液(1.0mg/ml )对照溶液：对照品溶解于内标准溶液(1mg/ml )供试品溶液：供试品约50mg，用内标准溶液溶解稀释为50ml，58，4，供试品mg=f As Ax :供试品的峰面积f

11、 :修正因子As :内标准物的峰面积5，特征： (1)简便快捷，专业性强，适用于VE、VE制剂及多种(2)特殊机器，59，(3)高效液相色谱日本药典(JP13 ) 色谱条件：柱： ODS流动相：甲醇-水(49:1 )检测波长： 292nm对照品的法定量，60，第三节维生素B1的分析，一，化学结构和性质1 .结构氯化3-(4-氨基-2-甲基嘧啶-5- )甲基 -4-甲基噻唑的盐酸盐，61，2 .结构特征： a .氨基嘧啶-次甲基-噻唑环的季铵化合物b .碱性基：嘧啶环上的氨基和酸盐噻唑环上的季铵，62，3 .性质：硫色素反应VB1 、63、沉淀反应VB1的含氮杂环与生物碱沉淀试剂反应产生沉淀。

12、例如，VB1可以与硅钨酸反应，生成一定的组成沉淀。 *重量法测定VB1含量。64、硫胺素的碱性基团： 噻唑环上的季铵盐嘧啶环上的氨基变成酸和盐。 例如盐酸硫胺素、硝酸硫胺素。 加入、65、碱分解后，与醋酸铅反应的VB1与NaOH试液一起加热，分解后产生NaS，与PbAc2反应，生成PbS的黑色沉淀。 维生素B1的水溶液显示氯化物的特征反应。 用于鉴别试验，1 .硫色素荧光反应，VB1专用反应，鉴别和含量测定。 67，2，沉淀反应：碘化钾、淡黄色沉淀、碘生成红色沉淀、硅钨酸生成白色沉淀和苦味酸生成扇形白色结晶等，能生成某些生物碱沉淀试剂和组成一定的沉淀，68，3 .含量测定非水滴定法(ChP使用

13、法) 硅钨酸重量法银量法硫色素荧光法紫外分光光度法比色法络合滴定法69 (一)非水溶液滴定法： 1，原理： VB1分子中含有成盐的伯胺和季铵基，在非水溶液中在醋酸汞的存在下进行高氯酸滴定。 70，2，方法：溶剂：冰醋酸指示剂：喹法索红-亚甲基蓝混合指示剂：高氯酸水银：终点：天蓝色空白修正： T=16.86mg/ml，71，(2)硅钨酸重量法，2VB1硅钨酸，白色沉淀4HCl，1，1 、72、2、计算： 2VB1的分子量2337.27沉淀的分子量为3479.22换算系数=0.1939 (意思： 1g沉淀相当于0.1939gVB1 )、73、3、测定方法：74、4、实验条件(1)样品量： 50mg

14、左右，必须为25mg以上(2)加入盐酸的目的：容易过滤。 *酸量不足：沉淀的粒子很细。 *酸的量太多：影响不大。 (7)硅钨酸使用量：硅钨酸： VB1=8:1的使用量不足，结果低(4)干燥温度： 80，干燥3hr，至恒重，沉淀中含有4分子的结晶水，换算系数为0.1939，76，(5)硅钨酸的添加防止吸附在沉淀表面的杂质分离，被沉淀包围。 (6)煮沸时间25min使沉淀粒子变大，有利于过滤清洗。 (7)沉淀的清洗用热稀盐酸清洗，清洗液的用量不得超过50ml。 否则，沉淀部分溶解的(8)清洗机最好是4号熔结玻璃漏斗。78，4，重量法的特点(1)比较准确灵敏(2)方法简便，不需要特殊设备(3)恒重比

15、较花费时间。，79，第四章维生素c的分析1 .化学结构，80，结构特征：维生素c分子有两个手性c原子，光学异构体有四种。 其中生理活性最强的是L()-抗坏血酸，81，D(-)-异抗坏血酸，L()-异抗坏血酸，L()-抗坏血酸，D(-)-抗坏血酸，82，具有内酯结构。 用碱性水解。 具有烯醇基。 还原性，被脱氢抗抗坏血酸氧化。 在酸性下，可以制造碱和盐。83、2 .性质和鉴别试验1 .酸性烯醇结构-酸性。 C3-OH、pKa=4.17 (共轭效果)C2-OH、pKa=11.57 (原羰基)一元酸。 和NaHCO3起作用可以生成钠盐。84、2 .还原性乙二醇-还原性。 如：85，3 .水解反应，L-二酮葡萄糖醛酸(无生物活性)，86，4 .荧光反应，5 .糖的性质VC的结构与糖的结构相似，具有糖的性质。 87、这个反应的摩尔比是1:2。 三.含量测定，1 .碘测定法，a .原理，88，b .操作，终点色：无色蓝色1ml 0.1mol/L碘液1ml8.806mg C6