实验：酵母细胞的固定化_第1页
实验：酵母细胞的固定化_第2页
实验：酵母细胞的固定化_第3页
实验：酵母细胞的固定化_第4页
实验：酵母细胞的固定化_第5页
已阅读5页，还剩5页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

1、实验四 酵母细胞的固定化,高大响,一、 实验目的和要求,了解固定化细胞的原理。 掌握用海藻酸钠制备固定化酵母细胞的方法。,二、 实验原理,工业上常用包埋法固定微生物细胞。根据包埋剂的特性，海藻酸钠在水相中加热溶解呈溶液状。将细胞加入混匀，滴入氯化钙溶液中，由于离子的转移作用而凝固，形成凝胶颗粒，凝胶颗粒中的微小空格将细胞固定。 海藻酸钙凝固的颗粒能反复使用，细胞在空格中可新陈代谢（固定活细胞），也可以利用细胞中的酶进行酶促反应（固定死细胞）。 本实验利用海藻酸钙凝胶包埋酵母生长细胞。,固定化细胞材料 2.5海藻酸钠溶液20mL，加热助溶，冷至45备用。 配制50mL 1.5CaCl2。 20毫

2、升注射器，150ml烧杯和50ml烧杯各一个、三角瓶、玻璃棒、温度计、镊子,三、 实验材料和仪器,酵母细胞的活化 取市售干酵母按1g投入到20ml 3638的温水中活化1520分钟，酵母细胞活化时体积会变大，活化前应该选择体积足够大的容器，以避免酵母细胞的活化液溢出容器外。,四、 实验方法和步骤,酵母细胞的固定化 在冷却至4550左右海藻酸钠溶液中，加入5mL预热至35的酵母培养液，混合均匀。将混合液装入注射器中，装上大好针头，以缓慢而稳定的速度将其滴入1.5CaCl2溶液中，边滴边摇动三角瓶，即可制得直径为3mm左右的凝胶珠。 在CaCl2溶液中钙化30min，即可使用。,四、 实验方法和步骤,加热使海藻酸钠溶化是操作中最重要的一环 一定要溶解彻底，在溶解过程中不断搅拌，在降温过程中不能低于45 ，否则会凝固。,五、注意事项,海藻酸钠的浓度涉及到固定化细胞的质量 如果海藻酸钠浓度过高，将很难形成凝胶珠； 如果浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目少，影响实验效果。,五、注意事项,刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间，以便形 成稳定的结构 检验凝胶珠的质量是否合格，可以使用下列方法。 一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压，如果凝胶珠不容易破裂，没有液体流出，就表明凝胶珠的制作成功。 二是在实验桌上用

人人文库> 全部分类> 教育资料 > 课件下载

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论