电泳法几种常用的电泳纸电泳醋酸纤维薄膜电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳

1、蛋白质的纯化方法中，通过施加电场而带电的蛋白质粒子在电场中移动的速度(v )依赖于电场强度(e )、带电荷的净电荷(q )、蛋白质的分子量、分子形状以及与介质的摩擦系数(f )。 电聚焦(IEF )，如电泳法、一些普通电泳、纸电泳醋酸纤维膜电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE ) (分为圆盘电泳和垂直平板电泳)琼脂糖凝胶电泳SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳等聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE )是以聚丙烯酰胺凝胶为支撑体的电泳法，聚丙烯酰胺凝胶是单体的丙烯酰胺与交联剂的亚甲基双丙烯酰胺交联而成的多孔质网格凝胶。 不连续PAGE有分离胶、浓缩胶、样品胶。 PAGE的分辨率很高。 电泳法、聚丙烯酰胺凝胶电泳法、电

2、影、电泳过程、蛋白质纯化方法、SDS (十二烷基磺酸钠)是一种阴离子表面活性剂，可以与蛋白质多肽链中的氨基酸残基以约11.4的比例结合。 虽然各个蛋白质分子由于多结合SDS而含有很多负电荷，但是蛋白质分子的本来电荷可以忽略。 该方法主要利用蛋白质分子量的大小不同来分离蛋白质。 以已知分子量的蛋白质为基准，可以估计不同蛋白质的分子量。 将电泳法、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法、蛋白质精制方法、两性电解质(eg:pH3-9、pH5-7)与蛋白质样品一起放入注入的凝胶中，在电场下，两性电解质首先达到其等电点并平衡，蛋白质样品等电聚焦：生物分子在该等电点的大小有pH梯度的位置聚焦的行为称为等电聚焦。 电

3、泳法、等电聚焦、等电聚焦的特征是利用被称为两性电解质载体的物质，在电场中构成连续的pH梯度，使具有蛋白质和其他两性电解质性质的样品聚焦，实现分离、测定、鉴定的目的。 蛋白质双向电泳、银染色结果显示，考马斯亮染色为蓝色、连续电泳，几种常用色谱、吸附色谱分配色谱-离子交换色谱-凝胶过滤色谱亲和色谱、柱色谱离子交换树脂可以分为羧甲基纤维素(CM纤维素)等阳离子交换纤维素、二乙基氨基乙基纤维素(DEAE纤维素)等阴离子交换纤维素。 带正电荷的蛋白质与纤维素强结合，带正电荷的蛋白质与纤维素弱结合。 用不同浓度的阳离子洗脱液，如NaCl溶液进行梯度洗脱，通过Na的离子交换作用，可以分离出具有不同正电荷的蛋

4、白质。 色谱、离子交换色谱、蛋白质的纯化方法、色谱、离子交换色谱、蛋白质的纯化方法也被称为分子筛色谱。 凝胶过滤中使用介质是将葡萄糖、琼脂糖、聚丙烯酰胺交联而成的凝胶珠。 凝胶珠的内部是多孔质的网状结构。 SephadexG10-G200 (糊精凝胶) Sepharose2B、4B、6B (琼脂糖凝胶) SephacrylS100、S200、S300、S400、S400 (聚丙烯酰胺糊精凝胶)、色谱其原理是，不同的蛋白质分子对固定在载体上的特殊配体具有不同的识别和结合能力。 选择纯化蛋白质和具有特殊识别和结合作用的配体，用化学方法将该配体与载体共价键合。 将结合了该配体的载体放入柱中，含有精制蛋白质的溶液通过柱后，该蛋白质与配体特异性地结合并吸附在柱上，其他蛋白质流出柱外。 与色谱柱特异性结合的蛋白质可以用适当的配体洗脱液洗脱。色谱、仿射色谱、蛋白质纯化方法，常用配体有抗体、抗原、激素和受体蛋白质、酶的基质和抑制剂等。 柱载体是琼脂糖凝胶等。色谱法、仿射色谱法、蛋白质纯度等测定，纯度和分子量的测定：采用电泳(如聚丙烯酰胺凝胶电泳)、分子筛色谱、高速离心、高效液