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文档简介
1、.,药物对离体豚鼠回肠的作用,.,实验原理(Principle),ACh,回肠M受体,平滑肌收缩,胞浆Ca2+,Ca2+内流,平滑肌Ca2+通道开放,阿托品,回肠M受体,.,H1受体,组胺,扑尔敏,H1受体,G蛋白,平滑肌收缩,肌浆网释放Ca2+,Ca2+通道,外Ca2+内流,.,氯化钡,平滑肌收缩,肌浆Ca2+,触发肌浆网释放Ca2+,Ba2+经钙通道进入胞浆,胆碱能神经释放ACh,.,实验目的(Objectives):,1.掌握豚鼠离体肠肌灌流方法,2.熟悉乙酰胆碱和组胺对肠道平滑肌M胆碱受体和H1受体的激动作用,以及它们的受体拮抗剂阿托品和扑尔敏的阻断作用。,.,1.材料与方法(mate
2、rialsandmethods):,1.1实验动物豚鼠,1.2药品与试剂10-2g/Lacetylcholinechloride溶液,1g/Latropinesulfate溶液,10-2g/Lhistaminephosphate溶液、10-3g/Lchlorpheniramine溶液、10g/LBaCl2溶液、台氏液。,.,1.3仪器和装置,1.3.1麦氏浴槽,出水口,进水口,固定钩,麦氏浴槽,.,1.3仪器和装置,1.3.2记录仪器,RM6240C微机生物信号处理系统,.,1.4.1用木槌击豚鼠头部致昏死,立即剖开腹腔,找到回盲部,然后在离回盲部1cm处剪断,取出回肠约10cm左右一段,置于
3、氧饱和的台氏液培养皿中,沿肠壁除去肠系膜,然后将回肠剪成数小段(约11.5cm),用注射器吸取台氏液将肠内容物冲洗干净。,1.4离体肠肌制备,.,1.4.2取一小段肠管置于盛有台氏液的培养皿中,在其两端对角壁处,分别用缝针穿线,并打结。注意保持肠管通畅,勿使其封闭。1.4.3肠管固定:取一小段肠管置于盛有台氏液的培养皿中,在其两端对角壁处,分别用缝针穿线,并打结。注意保持肠管通畅,勿使其封闭。肠管一端连线系于浴槽固定钩上,然后放入37麦氏浴槽中。再将肠管的另一端系结在张力换能器的悬臂梁上。1.4.4肠肌稳定:调节张力至1g,稳定1030分钟。,.,2.1ACh洗脱,2.2AChatropine
4、洗脱,2.3histamine洗脱,2.4chlorpheniraminehistamine洗脱,2.5BaCl2atropine,2.观察项目,3.结果,表1药物对离体豚鼠回肠张力的影响(g),3.1Acetylcholine作用于离体豚鼠回肠,其张力由1.1g增至3.5g,在acetylcholine作用基础上向灌流夜中加入atropine,回肠张力由3.5g降低至1.1g。见表1和图1。,Ach:acetylcholine,乙酰胆碱Atr:atropine阿托品His:histamine组胺Chl:chlorpheniramine氯苯那敏,图1药物对离体豚鼠回肠作用,Ach换液AchAtrAch换液His换液ChlHisBacl2Atr稳定20min(每次换液后稳定10min),.,4.讨论,4.1Acetylcholine作用于离体豚鼠回肠使其张力升高,用atropine后,回肠张力降低,atropi
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