中药中萜类与挥发油类化学成份的提取分离技术

1、山西生物应用职业技术学院、山西生物应用职业技术学院山西生物应用职业技术学院、山西生物应用职业技术学院山西生物应用职业技术学院、山西生物应用职业技术学院、山西生物应用职业技术学院、中药化学实用技术、学习情景5、中药中萜类和挥发油类化学成分的提取分离技术， 教育内容学习的提示：(一)萜类化合物的分类和分布，一般天然药物化学成分在常温下多为固体物质，由于经常具有结晶的通用性，根据溶解度可以用结晶法分离，精制。 结晶法是实验室常用成分的纯化方法。 但是，提取液的分离和精制不能用结晶法直接进行。 如果杂质过多，则阻碍结晶的形成，即使是少量的杂质也有时阻碍结晶的析出，因此在结晶化前必须尽量除去杂质。 加成

2、反应、氧化反应、柠檬烯二氢氯化物、等化学组成，一般来说，天然药物化学成分在常温下是固体物质，经常是结晶的通性，因此根据溶解度，用结晶法实现分离、精制、精制的目的结晶法是实验室常用成分的纯化方法。 但是，提取液的分离和精制不能用结晶法直接进行。 如果杂质过多，则阻碍结晶的形成，即使是少量的杂质也有时阻碍结晶的析出，因此在结晶化前必须尽量除去杂质。 3、冷压法、挥发油具有挥发性，可与水蒸气一起蒸馏，因此可以采用水蒸气蒸馏法提取挥发油，该方法是中药中最常用的方法。 1 .水蒸气蒸馏法，2 .有机溶剂提取法，挥发油具有亲油性，用亲油性有机溶剂，例如醚、石油醚等回流提取挥发油，提取液对醚进行蒸馏而得到挥

3、发油。 该方法主要适用于挥发油含量高的新鲜原料中挥发油的提取，如新鲜橙子、柠檬果皮，该方法得到的挥发油能保持新鲜香味，但不纯，混入水分等杂质，挥发油的提取不完全，多经冲压进行水蒸气蒸馏。 提取方法一般来说，天然药物的化学成分在常温下多为固体物质，具有结晶的通性，因此根据溶解度可以用结晶法分离、精制、精制。 结晶法是实验室常用成分的纯化方法。 但是，提取液的分离和纯化不能用结晶法直接进行。 杂质过多的话，会妨碍结晶的形成，即使是少量的杂质也会阻碍结晶的析出，所以在结晶化之前必须尽量除去杂质。 3、化学法，将一些挥发油在(020 )低温下放置，其中含量高的成分能析出结晶，与挥发油中的其他成分分离。

4、 本法操作简单，但分离不完全，适用范围广。 1 .结晶法、2 .分馏法、挥发油中各成分的沸点根据分子结构中的碳原子数、双键的多少和含氧官能基的极性而不同，因此可以用分馏法分离。 为了防止分馏中挥发油中成分的结构破坏，一般采用减压分馏法。 挥发油中的酸(碱)性成分，它们与碱(酸)形成盐，溶解于水中，从醚液中分离，氧化或碱化后，用醚萃取，蒸醚，可以得到酸(碱)性成分。 接着，用亚硫酸氢钠加法或吉拉德试剂法将分离了酸(碱)性成分的挥发油从醚液中分离出来。剩下的挥发油中的醇类成分与邻苯二甲酸酐、琥珀酸酐或丙二酸单酰氯反应，生成相应的酸性酯，溶解于碳酸钠溶液中，用盐酸或硫酸将用醚多次提取的碳酸钠溶液酸性

5、化后，醚提取单酯，蒸醚，将残渣分离方法一般来说，天然药物的化学成分在常温下固体物质多，经常具有结晶的通用性，因此根据溶解度可以用结晶法进行分离、精制、精制。 结晶法是实验室常用成分的纯化方法。 但是，提取液的分离和纯化不能用结晶法直接进行。 如果杂质过多，就会阻碍结晶的形成，即使是少量的杂质也会阻碍结晶的析出，所以在结晶化前必须尽量除去杂质。 4 .色谱分离法，一般用上述方法分离的各部分必须进一步分离，通常用色谱分离法分离就能得到好的分离效果。 最常用的是硅胶和氧化铝吸附色谱法，流动相是石油醚、醚、己烷和乙酸乙酯等以一定比例构成的溶剂系，进行溶出，或根据极性以小的梯度溶出，或分阶段收集和识别，

6、合成相同的成分不饱和化合物根据其双键的数量、位置、异构体，容易与硝酸银形成配合物，根据形成配合物的稳定性可以分离。 吸附剂中硝酸银的含量一般以2.5%为合适，很经济。 一般的吸附规律是双键数多，吸附牢固，难溶出的末端双键比一般的双键难溶出； 顺式双键比变压器双键难溶出。 一般来说，天然药物的化学成分在常温下多为固体物质，具有结晶的通性，因此根据溶解度可以用结晶法分离、精制、精制。 结晶法是实验室常用成分的纯化方法。 但是，提取液的分离和纯化不能用结晶法直接进行。 如果杂质过多，则阻碍结晶的形成，即使是少量的杂质也有时阻碍结晶的析出，因此在结晶化前必须尽量除去杂质。 3、功能基的鉴定，样品制成的

7、石油醚溶液放在滤纸上，在空气中挥发，不残留油斑，可能挥发油，油斑不消失，可能油脂。 1 .一般检查，2 .物理常数和化学常数的测定，常用的物理常数有折射率、相对旋转度、相对密度和凝固点等，一般要测定折射率，在折射率满足规定后再检查其他物理常数。 化学常数是表示挥发油质量的重要化学指标，主要有酸值、酯值、皂甙值和碘值。 (1)用酸碱性pH试纸测定挥发油的pH值，酸性的情况下，表示含有游离的酸或酚类化合物的碱性，表示含有挥发性生物碱类等碱性化合物。 (2)酚类在挥发油的乙醇液中加入氯化铁的乙醇溶液，产生蓝、青紫或绿色，显示挥发油中有酚性成分存在。 (3)羰基化合物挥发油样品和氨性硝酸银试剂发生银镜

8、反应，显示醛类(或其他还原性化合物)的存在。 挥发油的乙醇溶液显示，如果能与2，4 -二硝基苯基肼或氨基脲、羟胺等试剂反应，并引起结晶沉淀，则存在醛和酮类化合物。 (4)向不饱和化合物和胡枝子类衍生物挥发油氯仿溶液中滴加5溴氯仿溶液，红色退时，继续滴加表示不饱和化合物的溴氯仿溶液，出现蓝、紫、绿时，表示挥发油中存在胡枝子类衍生物。 另外，向外向挥发油的无水甲醇溶液中加入浓硫酸，会产生蓝色和紫色，显示出蕨类的存在，检查方法，一般来说，天然药物化学成分在常温下为固体物质，总是有结晶的通用性，因此，根据溶解度，可以用结晶法实现分离、精制、精制的目的。 结晶法是实验室常用成分的纯化方法。但是，提取液的

9、分离和纯化不能用结晶法直接进行。 如果杂质过多，就会阻碍结晶的形成，即使是少量的杂质也会阻碍结晶的析出，所以在结晶化前必须尽量除去杂质。 4、色谱鉴定、挥发油色谱鉴定可以采用薄层色谱和气相色谱，而薄层色谱却很常用。 (1) .薄层色谱多以硅胶g和中性氧化铝()为吸附剂。 为了分离烃系化合物多以石油醚(3060 )或正己烷为展开剂，为了分离含氧萜烯系化合物多以石油醚(3060 )或正己烷为极性大的有机溶剂，例如石油醚一乙酸乙酯(85:15 )为展开剂用于识别挥发油类成分的薄层色谱显色剂有两种。 一种是用香草醛-浓硫酸或香草醛-浓盐酸试剂，喷雾后烤105次，挥发油中的各成分显示出不同的颜色。 另一

10、种是挥发油各种功能基的显色剂，常用的是、表6-4挥发油各种功能基的显色剂，一般来说，天然药物化学成分在常温下为固体物质，总是具有结晶的通用性，因此根据溶解度的不同，可以用结晶法实现分离、精制、精制的目的。 结晶法是实验室常用成分的纯化方法。 但是，提取液的分离和精制不能用结晶法直接进行。 如果杂质过多，会妨碍结晶的形成，即使是少量的杂质也会阻碍结晶的析出，所以在结晶化前必须尽量除去杂质。 (2) .气相色谱是分离检测挥发油成分的一种有效简便的方法。 特别气相色谱质谱联用微机数据处理系统(GCMSDS )促进了挥发油成分的检测速度和准确性，成为目前研究挥发油的重要手段。 一般的气相色谱主要用于已

11、知挥发油的定性分析，在相同色谱条件下，利用相同物质具有相同保持值的原理进行鉴定。 挥发油中未知成分的鉴定通过气相色谱-质量分析-微机数据处理系统(GCMSDS )并用器进行分析鉴定。 方法：首先将样品注入气相色谱中，将分离出的各成分依次放入分离器中，将浓缩后的各成分依次放入质谱仪中，然后用微机数据处理系统对得到的各成分的质谱图进行数据处理、分析、鉴定。 4、色谱鉴定、任务一黄蒿中青蒿素的提取分离技术、学习目标、二黄蒿中青蒿素的提取分离技术、黄蒿是菊科植物黄蒿(Artemisia annual L.)的干燥地面部分。 具有清热、消暑、蒸、除虐待的功效，用于炎热邪发热、阴凉发热，夜晚炎热凉爽，用于

12、骨蒸劳动热、疟疾寒、湿热黄疸。 用乙醇提取法提取艾蒿中的青蒿素，用活性炭脱色，用有机溶剂再结晶精制。工艺流程：对分子量大的化合物的吸附力比分子量小的化合物大，知识链、活性炭吸附色谱：活性炭是吸附力强的非极性吸附剂，吸附原理为“结构相似者容易吸附”，特别适合水溶性物质的分离。 例如，氨基酸、糖类和糖苷类在制药工业中经常被用于脱色、除味、除热原。 吸附规则如下：1，水中的吸附能力强，有机溶剂中的吸附能力弱，因此水的溶出能力最弱，有机溶剂的溶出能力最强，2，对极性大的化合物的吸附力大； 3、4、对芳香族化合物的吸附力比脂肪组化合物大，(一)艾蒿的主要有效成分的结构、理化性质，艾蒿的化学成分大致可分为

13、挥发油、倍半萜、黄酮和香豆素四种。 其中倍半萜类化合物青蒿素是艾蒿的抗疟疾成分。 青蒿素是无色针状结晶，易溶于氯仿、丙酮、乙酸乙酯，易溶于乙醇、醚，易溶于石油醚、苯，难溶于水。、青蒿中青蒿素的提取分离、知识链、1、此技术将生药粗粉放入渗透筒，不断添加新溶剂，使溶剂从上到下等速流动，达到了提取天然物的浸出法。 溶剂经常处于动态状态，能引起生药细胞内外的浓度差，进行良好的扩散，因此本法比浸渍法浸出效率高。 但是，溶剂的使用量多，提取时间长，常温下渗出，所以适合提取容易被热破坏的成分。 常用溶剂有不同浓度的乙醇、酸性乙醇、碱性乙醇、酸性水、碱水和水等。 渗透法提取技术、操作程序为药材的润湿、弹壳、排

14、气、浸渍和渗透。 一般湿30min后安装墨盒时，墨盒均匀，橡胶适度，流速最好为每分钟2ml15ml。 通常，收集浸透液的是生药重量的约8倍的10倍，或通过成分鉴别试验决定浸透终点。 在该方法的操作中，药剂的充分润湿和流速的控制是提取是否完全的关键。 四教室相互作用，1 .基于活性炭吸附的原理和规律，说明青蒿素生产技术中活性炭吸附的成分主要是什么？2 .青蒿素提取应该注意什么问题？ 五知识开拓，1 .从艾蒿中提取分离青蒿素的方法是，过程1 :过程2 :过程3 :知识开拓：1、超临界流体在稳定的纯物质在临界温度和临界压力以上时，形成了特殊的相状态，其物理性质在液体与气体之间，密度接近液体， 粘度接

15、近气体，扩散系数是液体的百倍，具有介电常数也随着压力的增大而增加等特性，表明比液体溶剂更容易渗透到样品中。 超临界流体萃取法是以超临界流体为萃取剂，从液体或固体试料中提取成分的方法。 2、超临界流体萃取法，这是近年来国际上兴起的一种新方法。 该方法可在常温下进行挥发油的提取，不使用对人体有害的溶剂，能保护产品的天然活性，是一种比较先进的“绿色分离技术”。 但是，该方法技术要求高，设备费用大，在我国的应用并不普遍。实训一黄青蒿中青蒿素成分的提取分离和鉴定，【实训目的】、1 .可以用渗透过滤法和活性炭吸附法提取和纯化青蒿中青蒿素。 2 .用薄层色谱和显色反应检查青蒿素。 【化学成分的概要】，艾蒿类

16、菊科植物艾蒿的干燥地面部分。 其中除了有防止虐待作用的青蒿素之外，还含有山莨菪碱、山莨菪碱、异黄嘌呤、拉米宁等。 【实训原理】，1 .青蒿素属于倍半萜类内酯化合物，利用可溶于乙醇、丙酮、氯仿等溶剂的性质，可以选择性地提取乙醇和丙酮。 2 .把青蒿素溶解在氯仿和乙酸乙酯等溶剂中再结晶。 3 .利用活性炭吸附纯化黄酮和香豆素等杂质。【操作步骤】，1 .提取分离青蒿，筛分枝梗，取250g。 放入烧杯中用70%乙醇润湿约30分钟后，放入渗透筒中开始渗透过滤，流速为每分钟35ml，将渗出水聚集到原料量的68倍，加入原料重量的4%左右的活性炭进行脱色，搅拌30分钟，澄清，过滤滤液减压，回收乙醇适量，进行晶

17、析母液浓缩至浑浊，静止，冷却，结晶析出后过滤，得到青蒿素粗品。 将两次得到的青蒿素粗品合并，称重量，加入二氯甲烷5倍量，或者加入乙酸乙酯10倍量溶解，过滤，回收溶剂并干燥，趁热加入粗品重量2倍的乙醇，注入乙醇液，放置，结晶，使结晶少量【设备、仪器及药品】，1 .实验生药：艾蒿2 .实验仪器及设备：渗透筒、减压蒸馏装置、烧杯、玉米瓶、硅胶G-CMC板、温度计、色谱汽缸。3 .实验药品：乙醇、氯仿、石油醚、乙酸乙酯、活性炭、苯、醚、甲醇、盐酸羟胺、间二硝基苯、香草醛-浓硫酸溶液、氯化铁试剂、2.4-二硝基苯基肼、2 .青蒿素的检测(1)显色反应异羟基肟酸铁反应：将本产品10mg溶解于1ml甲醇中，加入7%盐酸鞍座甲醇溶液45滴，用水浴加热至沸腾，冷却后加入稀盐酸使其成为酸性，然后，加入1%氯化铁溶液12滴2.4-二硝基苯基肼反应：将本产品10mg溶解在1ml氯仿中，向滤纸片上滴下氯仿溶液，