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文档简介
1、实验二 徒手切片与临时装片的制作,授课教师:郑 磊 2008.12.04,实验目的与要求,熟练掌握徒手切片技术,能够切出只有一层细胞的切片。,实验器材与用具,显微镜、培养皿、单面刀片、双面刀片、载玻片、盖玻片、毛笔、 吸水纸。,实验材料与试剂,实验材料 新鲜的吊兰茎和叶、芹菜叶柄、黄豆芽,胡萝卜(支持物)。 试剂 1%番红水溶液、 45%醋酸。,实验原理,徒手制片一般指徒手用刀片把新鲜的或固定好的植物材料切成薄片,不经染色或经简单染色后用水封片制成临时制片的方法。 此制片法主要优点是:(1)能及时观察研究植物生活组织的结构和天然色彩;(2)方法及用具简单,不需切片机等机械设备,短时间即可完成。
2、 主要缺点是:(1)对于微小、柔软、水分过多以及坚硬的材料,难以用徒手切成薄片;(2)不能制成连续的切片;(3)对于操作不熟练者,往往难以切成厚薄均匀和完整的切片。,实验方法,材料的准备和修整 将植物茎切成23cm长的小段,并将其切面削平; 若为质地较软而薄的材料,如叶片,可沿主脉两侧切成宽56mm、长11.5cm的小块,夹在支持物中进行切片。 支持物通常为萝卜、胡萝卜、马铃薯、通心草等。先将支持物切成高35cm、长、宽0.5cm的立方体小块,将其中部纵切一缝,然后将修整好的材料夹在其中。,切片 切片前在培养皿内盛放适量清水。 以左手拇指、食指、中指捏住材料,拇指应低于食指,以免切伤手指,材料
3、高出食指23mm。 切片前,用水润湿刀片,以减少切片阻力。 右手执刀,将刀片平放在左手食指上,刀口朝内,刀面与材料断面平行,然后以均匀快捷的动作自左前方向右后方以臂力带动刀片水平切割,不要用腕力。同时还要注意,切时动作要迅速,材料一次切下,切忌停顿或拉锯式切割。 切下数片后,用湿毛笔轻轻将薄片移入清水中,防止材料萎蔫。,染色与镜检 若要观察植物组织的天然色彩:挑选薄而透明、平整的切片,放在载玻片上,水封,制成临时装片。 若想染色以观察更清楚的切片:采用单染色,即用1%番红水溶液染色35min,用蒸馏水洗去浮色,水封,镜检。,观察材料,剃刀,双面刀片,拿材料的手势,胡萝卜,木髓,切取标本,切取的标本,擦拭载玻片,滴水,放置标本,加盖盖玻片,叶的横切,玉米茎横切,南瓜茎横切,南瓜茎纵切,任务与要求,1.制作一张
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