第五章免疫佐剂

1、第五章 免疫佐剂,佐剂的产生,白喉、破伤风疫苗,木薯淀粉 琼脂 面包屑 油 化脓性细菌,产生抗血清（抗毒素）,1925年， Ramon,接种：马,佐剂的产生,Glenny发现： 用明矾沉淀的白喉毒素： 可诱导较好的免疫效果 明矾：KAl(SO4).12H20 净水作用 氢氧化铝：人用佐剂,佐剂研究的必要性,1. 氢氧化铝： 优势： 无毒性作用 能诱导产生高水平的抗体应答 不足： 不能诱导产生较强的T细胞免疫。,佐剂研究的必要性,2. 基因重组疫苗、多肽疫苗和核酸疫苗等 优势： 在理论上，比传统的减毒疫苗和灭活疫苗安全 不足： 其免疫原性不强，需要佐剂辅助其刺激机体产生强的免疫应答,一、免疫佐剂

2、的定义和类别,佐剂(adjuvant) 搀入疫苗制剂后，能促进、延长或增强对疫苗抗原特异性免疫应答的物质。,应用免疫佐剂的潜在优点：,能优化免疫应答; 使疫苗能黏膜接种; 能促进细胞介导免疫应答;,应用免疫佐剂的潜在优点：,能增强较弱免疫原的免疫原性; 可减少提供保护性免疫所需的抗原量或接种次数; 能提高疫苗在免疫应答减弱者(如新生儿、老年人和免疫缺损者)的疫苗接种效力。,运载体（carrier）,与半抗原或免疫原性较弱的抗原相结合的一类具有免疫原性的物质。 一种生物或载体(vector)，通过其携带的基因在其表面表达外源的抗原。 通过刺激机体的T细胞反应来加强机体对抗原的免疫反应。,传输工具

3、（ vehicle）,是对佐剂、抗原或者抗原-运载体复合物起运输和托衬作用的一类物质。 不具有免疫原性 单独传输工具：加强抗原的免疫原性， 传输工具+佐剂：进一步加强抗原的免疫原性。,正在研制和试验的人用疫苗佐剂,二、临床研究中的新型佐剂,1. 乳化佐剂,（1）MF59 用Span85和吐温80稳定的水包鲨烯乳剂 获得批准的新型人用佐剂,Span85：山梨醇酐三油酸酯 吐温80：聚氧乙烯山梨醇酐三油酸酯 鲨烯：3碳6烯,1. 乳化佐剂,（1）MF59 临床试验： 实验组：接种含MF59的流感疫 苗 n=6000 对照组：接种不含MF59的流感疫苗 n=6000 结果： 该疫苗佐剂是安全的，且机

4、体耐受性较好 能提高接种者对病毒的抗体应答能力，尤其是慢性病患者和免疫前低抗体滴度者。,以MF59为佐剂的流感疫苗(FLUAD)已在意大利获准使用,1. 乳化佐剂,（2）SBAS2佐剂 是含有单磷酸脂质(monophosphoryllipid， MPL)和QS21的水包油型 乳剂 副反应较大，主要用于治疗性疫苗,1. 乳化佐剂,（2）SBAS2佐剂 恶性疟原虫环子孢子蛋白(CSP)+ SBAS2佐剂 对蚊传疟原虫攻击，良好的保护作用 还用于慢性HBV感染和宫颈癌病人的治疗性疫苗试验。,2. 皂苷和免疫刺激复合物( ISCOM),QS21 从皂 的富含的皂苷抽提物中纯化的一种复合糖脂。 不是乳剂

5、，易于配制 能诱导Th1、Th2和细胞毒性T细胞(CTL)应答 可通过肠 道外或黏膜途径免疫。,已在29项临床试验中与不同疫苗一起应用,QS21 疟原虫sp66肽疫苗试验(哥伦比亚) 抗体: 第3针接种后： 两名受试者出现严重不良反应(过敏性休克) 尚不清楚这些反应是不是佐剂依赖性？,2. 皂苷和免疫刺激复合物( ISCOM),疫苗+QS21+（铝盐）,疫苗+铝盐,2. 皂苷和免疫刺激复合物( ISCOM),ISCOM 临床前研究：（小鼠、羊、灵长类动物） 强佐剂 ：诱导Th1、Th2和CTL应答 持久的抗体滴度和保护性应答 小鼠：鼻内接种流感病毒良好的应答,3. MPL衍生物,单磷酸脂质（m

6、onophosphoryllipid， MPL） 人体试验：（ 经胃肠外给予MPL） 癌症、过敏及传染病 迄今，尚未进行过黏膜给药的临床试验。 SBAS4 （MPL+铝盐联合）+乙型肝炎疫苗 临床试验：很好耐受 老年人(免疫应答不佳者)：获得了对HBcAg的良好应答，加强免疫后的应答尤其显著。,3. MPL衍生物,OM-174： 与脂质A相关的新型葡糖胺二糖佐剂 化学结构清楚、稳定，造价低廉 临床前毒理学试验：结果良好 作为流感疫苗佐剂，在小鼠中诱导的保护性免疫力优于铝佐剂。 可诱导体液和细胞免疫应答 目前，正在健康志愿者中进行I期临床试验。,4.细胞因子和其他免疫调节剂,IL-12： 最有希

7、望进入临床试验的细胞因子佐剂之一; 在各种免疫佐剂的免疫调节活性中起关键作用; IL-12+铝佐剂吸附的HIV-1 gp120疫苗： 能在小鼠中诱生Th1型细胞因子及IgG2和IgG3抗体应答; 铝佐剂吸附的HIV-1 gp120疫苗： 则诱生Th2型细胞因子和IgG1抗体应答。,4. 细胞因子和其他免疫调节剂,IL-12： 某些小鼠病毒感染(鼠肝炎、伪狂犬病、淋巴细胞脉络丛脑膜炎、水泡性口炎) 无效 临床试验: 重组人IL-12+甲型肝炎/乙型肝炎疫苗 IL-12是安全的，且有很好耐受性。 仅在加强免疫后：才诱导抗体滴度的轻微增加。 正作为肿瘤抗原佐剂在癌症病人中进行试验。,5. CpG-O

8、DN,具有很好的耐受性，稳定且生产成本低廉，并可用于黏膜途径。 能激活巨噬细胞，诱导B细胞增殖，诱生较强的Th1应答。 其效果能达到弗氏完全佐剂的水平，可用于治疗性疫苗并能与其他佐剂(如铝盐)协同作用。,三、免疫佐剂对免疫系统的影响,1. 佐剂的作用机理 （1）储存作用 凝胶型佐剂(如氢氧化铝) 乳化佐剂(如弗氏不完全佐剂) 与抗原相连，并促进将抗原转运至淋巴结，产生免疫应答。,三、免疫佐剂对免疫系统的影响,1. 佐剂的作用机理 （2）直接或间接作用于APC，增进抗原递呈作用 乳化佐剂MF59：能被DC内化 某些新型佐剂(如纯化的皂苷、ISCOM和脂质体) 有效地诱导MHC1类分子限制性CD8

9、+CTL应答,三、免疫佐剂对免疫系统的影响,1. 佐剂的作用机理 （3）刺激APC分泌免疫调节细胞因子 细胞因子作用于淋巴细胞而诱导以Th1或Th2型为主的免疫应答 通过诱生IFN-和迟发型超敏反应、而增强Th1型免疫应答,2. 疫苗佐剂的选择,病原体的生长繁殖方式： 胞外繁殖的细菌/寄生虫： 机体通常通过体液免疫应答来清除病原体; 胞内增殖的病毒/细菌/寄生虫： 机体需诱导细胞介导免疫应答与其抗争。,四、免疫佐剂的安全性及发展前景,1.佐剂的安全性,佐剂的益处：增强疫苗免疫原性 佐剂的危险性：引起不良反应 佐剂引起的局部不良反应： 注射部位的局部炎症 罕见的肉芽肿 无菌性脓肿 实验动物：不适

10、、发热、佐剂性关节炎等,权衡利弊,佐剂对机体的不良影响,由于局部脓肿、结节、溃殇的形成而导致的急性或慢性炎症反应。 导致流感样疾病，伴发热、头痛、肌肉痛、关节痛等。 过敏反应。 对组织和器官的系统毒性。,佐剂对机体的不良影,诱导宿主组织的超敏反应，产生自身免疫性关节炎或淀粉样变。 同机体抗原产生交叉反应，引起肾小球肾炎或脑膜脑炎。 使机体对结核菌素或其他皮试抗原敏感。 免疫抑制。,佐剂对机体的不良影,致肿瘤作用和致畸作用。 导致流产。 将活的载体留在体内、或传给环境的潜在可能性。,2. 佐剂研究的发展前景,(1)理想的佐剂的特点： 安全性有保障，且无短期及长期的毒副作用； 佐剂与抗原联用能刺激机体产生较强免疫反应； 在使用较少的免疫剂量的情况下即可产生效力； 佐剂的化学成分和生物学性状清楚，在制备时批间差异小、且于生产。,2. 佐剂研究的发展前景,(1)理想的佐剂的特点： 加入佐剂的疫苗，需有大