血液凝固和影响血液凝固的因素#内容充实

1、凝血及影响凝血的因素一、实验目的通过测量一定条件下的凝血时间，我们可以加深对影响凝血因素的理解。二、实验仪器和材料兔子；石蜡油、冰块、肝素、草酸钾溶液、肺组织输液(将兔肺切开，清洗血液，在3-4倍的生理盐水中浸泡过夜，过滤，收集滤液，得到肺组织输液，保存在冰箱中备用)。氯化钙、氨基甲酸乙酯、生理盐水；兔手术台、常规手术器械、注射器、小烧杯、试管架、试管、动脉夹、动脉插管、恒温水浴、秒表、竹签。三、实验方法和步骤1.麻醉固定称重后，在耳缘静脉注射200克/升氨基甲酸乙酯，剂量为1克/千克体重。麻醉兔子后，它们仰卧，依次固定四肢和兔子头。2.颈部手术剪去颈部前部的外套，在颈部前部中间切开6 7厘米

2、的皮肤，直至达到下颌角以上1.5厘米，用止血钳被动分离软组织和颈部肌肉，露出左右颈总动脉鞘。用玻璃分针分离两侧鞘中的颈总动脉，结扎一根颈总动脉的远端，用动脉夹夹住近端，预先在动脉下放一根细线，以备后用。用眼用剪刀在结扎点附近的动脉壁上切开一个V形切口，将动脉插管向心方向插入颈总动脉，并结扎导管进行采血。3.取8个试管，根据下表准备不同的实验条件试管编号试验条件凝固时间每支试管添加2ml1控制管(不添加)2放一点棉花3石蜡涂油管内壁4肝素1毫升50.1毫升草酸钾6肺组织0.1毫升72ml生理盐水8冰在一个小烧杯中流出20毫升出血时，用竹签不断搅拌。23分钟后，用水冲洗竹签并观察表1-1凝血加速和

3、抗凝试验4.抽血打开动脉夹，向每支试管中加入2ml血液。将多余的血液放入一个小烧杯中约20毫升，用竹签搅拌。5.记录凝血时间在向每个试管中加入2ml血液后，立即开始计时，每15秒倾斜一次，观察血液是否凝固，并记录血液变成凝胶且不再流动的时间。将血液加入4号、5号和6号试管后，用拇指盖住试管口，将试管倒置两次，使血液与药物混合。四.实验结果促凝和抗凝试验管号试验条件凝结时间/分钟平均值x标准偏差sp值1控件，空管5.555.755.4170.3822棉花44.253.53.9170.3820.0373肝素6060604固体石腊6060605草酸钾一水合物6060606肺组织提取物0.2510.5

4、0.5830.3120.0047生理盐水7.2589.258.1670.8250.0158冰浴606060V.实验讨论凝血是一种酶促反应，涉及许多凝血因子。根据凝血过程中凝血酶原的不同激活途径，凝血过程可分为内源性激活途径和外源性激活途径。内源性凝血是指所有参与血液凝固的凝血因子都存在于血浆中；外源性凝血是指有组织因素参与的凝血过程。在这个实验中，动物从颈动脉出血，并且血液几乎不与组织因子接触。因此，凝血过程主要是内源性凝血系统的功能。肺组织提取物富含组织因子，通过添加试管观察外源性凝血系统的作用。血液凝固指的是血液从流动的液态变成不动的凝胶状态的过程。其本质是将血浆中的可溶性纤维蛋白转化为不

5、溶性纤维蛋白的过程。纤维蛋白交织成网，捕获血细胞和其他血液成分，从而形成血凝块。凝血是一系列复杂的酶促反应过程，需要各种凝血因子的参与。血浆和组织中直接参与血液凝固的物质统称为凝固因子。目前已知的凝血因子有14种，即凝血因子 (简称F F )。此外，还有前激肽释放酶、聚合物激肽原等。在这些凝血因子中，除F 是Ca2外，其他凝血因子是蛋白质，F 、F 、F 、F 、F 、f和前激肽释放酶是丝氨酸蛋白酶，它们可以有限地水解特定的肽链。然而，在正常情况下，这些蛋白酶以非活性酶原的形式存在，并且它们只有在暴露或通过其他酶的有限水解形成活性中心后才具有酶活性。这个过程被称为凝血因子的激活。血液凝固是这样

6、一个过程，在这个过程中，凝血因子按一定的顺序依次激活，产生凝血酶，最后纤维蛋白原变成纤维蛋白。因此，凝血过程可分为三个基本步骤：凝血酶原复合物的形成、凝血酶的活化和纤维蛋白的生成。凝血酶原复合物的形成可由内源性凝血途径和外源性凝血途径产生。两种途径的主要区别在于不同的启动方式和涉及的凝血因素。然而，这两种途径中的一些凝血因子可以相互激活，因此它们彼此密切相关，而不是完全相互独立。(1)内源性凝血途径：内源性凝血途径是指所有参与凝血的因素均来自血液，通常由血液与带负电的异物(如玻璃、高岭土、硫酸盐、胶原蛋白等)接触而引发。)。当血液与带负电的异物表面接触时，f首先与异物表面结合并被激活为f .

7、a . f . a .的主要功能是激活f .进入f .a，从而启动内源性凝血途径。(2)外源性凝血途径：由外周血液中的组织因子暴露于血液而引发的凝血过程成为外源性凝血途径，也称为组织因子途径。组织因子是一种跨膜糖蛋白，存在于大多数组织细胞中。在生理条件下，与循环血液直接接触的血细胞和内皮细胞不表达组织因子，但约0.5%的F 被激活(F a)。当血管受损时，组织因子暴露出来，与F a结合形成Fa-组织因子复合物，在磷脂和钙的存在下，该复合物迅速激活F形成F a。内源性和外源性凝血途径产生的F A在Ca2存在下，在磷脂膜表面与FVa形成FXA-FVa-Ca2-磷脂复合物，进而激活凝血酶原。凝血酶原

8、的活化和纤维蛋白原的产生在凝血酶原复合物的作用下被活化成凝血酶。1.棉花为血液凝固提供了粗糙的表面，这容易导致血小板粘附和聚集，然后分解，释放许多凝固因子和血小板因子；此外，棉花含有许多带负电荷的植物纤维，它们也能激活凝血因子X ，启动内源性凝血途径。因此，使用棉花的试管中的血液凝固加速。2.抗凝血酶和肝素是体内重要的抗凝剂。抗凝血酶与丝氨酸残基结合，丝氨酸残基是许多凝血因子如凝血酶的活性中心，这意味着这些凝血因子的活性被抑制或失活，从而实现抗凝血作用。肝素主要与血浆中的抗凝蛋白如抗凝血酶结合，以增强后者的抗凝作用。此外，肝素还可以从血管内壁的细胞中释放凝血抑制剂和纤溶酶原激活剂，从而增强纤维

9、蛋白溶解。因此，当肝素被放入试管时，血液不会凝结。3.由于石蜡油表面光滑，很难引起血小板粘附，即血小板很难发挥促进血液凝固的作用。此外，石蜡油是一种绝缘体，它覆盖着试管表面的负电荷，不利于凝血因子X 的活化。因此，血液凝固比棉试管慢，比正常对照组慢。4.Ca2是凝血过程中一个重要的凝血因子，参与血液凝固的许多环节。当血液中没有钙时，血液就不会凝结。当将草酸钾加入试管时，因为草酸钾与Ca2反应，草酸钙沉淀，这意味着血液中没有Ca2，所以血液不会凝结。5.肺组织浸出液富含凝血因子，易通过外源性途径引起快速凝血反应。因此，在加入肺组织浸出液的试管中，凝血发生得最快。6.加入生理盐水稀释血液，降低凝血

10、酶浓度，延长凝血时间。7.血液凝固的过程涉及许多蛋白酶，因此当温度降低时，酶的活性减弱，因此置于冰水中的试管血液不会长时间凝固，这意味着低温会影响凝血酶的活性。8.无论是内源性凝血还是外源性凝血，凝血的最后阶段都是在凝血酶的作用下，凝血酶将纤维蛋白原水解成纤维蛋白，形成的纤维蛋白不断地交叉成网络结构，在网络结构中血液中的所有血细胞都形成网络，从而导致血液凝固。上述凝固过程发生在静止的烧杯中，形成的纤维蛋白没有被破坏，因此烧杯中的血液凝固。在将血液与竹签混合的过程中，虽然发生了凝固过程，但是纤维蛋白原被水解成纤维蛋白，但是形成的纤维蛋白被连续地缠绕在竹签上。用水冲洗后，白色丝状纤维蛋白留在竹签上。搅拌后，杯中血液中的纤维蛋白原被完全耗尽，纤维蛋白不再形成以捕获血细胞，因此血液不再凝固。六.实验结论含有肝素和草酸钾等抗凝剂的试管在规定时间内没有凝结。温度对血液凝固也有影响，放置在冰水中的试管中的血液凝固明显减慢，在规定的时间内没有发生凝固现象。用棉花和石蜡油观察血液接触面粗糙度对凝血的影响。结果表明，血液中的棉花使凝血时间明显，而石蜡油润滑使试