酵母菌的计数

1、完成实验,酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？,提出问题,作出假设,设计实验,分析结果，得出结论,变量如何控制？,探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化,该探究活动中涉及4个科学方法： （1）数学模型法； （2）抽样检测法； （3）显微观察法； （4）微生物培养法。,酵母菌的计数 （1）计数工具血球计数板,实物图,正面图,侧面图,计数室,滴液处,酵母菌的计数 （1）计数工具血球计数板,放大后的计数池,每块计数板由H形凹槽分为2个同样的计数池。 每个计数池分为9个大方格，其中中央的即为计数室，每个计数室的体积为0.1mm3 。,16个小格,25个小格,25X16 = 400小格,16X25 = 4

2、00小格,每个计数室（大方格）共有400小格，总容积为0.1mm3,抽样检测： 516=80个小格,抽样检测： 425=100个小格,酵母菌的计数 （2）计算： 每毫升培养液中的酵母菌细胞数是多少？,例1:酵母菌的计数通常用血球计数板进行，血球计数板每个大方格容积为0.1mm3 ，由400个小方格组成。现对某一样液进行检测，如果一个小方格内酵母菌过多，难以计数，应先 后再计数。若多次重复计数后，算得每个小方格中平均有5个酵母菌，则10mL该培养液中酵母菌总数有 个。,例2 :在用血球计数板（2mm2mm方格）对某一稀释50倍样品进行计数时，发现在一个计数室内（盖玻片下的培养液厚度为0.1mm）

3、酵母菌平均数为16，据此估算10mL培养液中有酵母菌 个。,2x107,2108,稀释,例3 检测员将1 mL水样稀释10倍后，用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量；将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室，并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由2516400个小格组成，容纳液体的总体积为01 mm3。 现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e 5个中格80个小格内共有蓝藻n个，则上述水样中约有蓝藻 个mL。,5n105,酵母菌的计数 （3）计数的操作 稀释：将酵母菌培养液进行适当的稀释；若菌液不浓，可不必稀释。 镜检计数室：在加样前，先对计数板的计数室进行镜检, 若有污

4、物，则需清洗后才能进行计数。 加样品：在清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片，再用无菌细口滴管将稀释的酵母菌液由盖玻片边缘滴入一小滴（将计数室充满即可），让菌液沿缝隙自行渗入计数室。 注意不可有气泡产生。,酵母菌的计数 （3）计数的操作 显微计数：静止5分钟后，先用低倍镜（1610）找 到计数室所在的位置。然后根据血球计数 板规格，每个计数室选取5个（或4个）中 方格中的菌体进行计数。每个小方格内约 有5-10个菌体为宜。对于压在小方格界线 上的酵母菌应取相邻两边及顶角计数。如 要从两个计数室中计得的值来计算样品的 含菌量。,酵母菌的计数 （4）血球计数板的清洗： 使用完毕后，将血球计数板在水龙头上

5、用水柱冲洗，切勿用硬刷洗刷，洗完后自行晾干或用吹风机吹干。镜检，观察每个小格内是否有残留菌体或其他沉淀物。若不干净，则必须重复洗涤至干净为止。,酵母菌的计数 （5）注意事项： 进行计数前，应先将试管摇匀，目的是使酵母菌在培养液中混合均匀，以减少计数误差。 显微镜计数时，对于压在小方格界线上的酵母菌，应取相邻两边及顶角计数。 若一个小方格内酵母菌数量过多，难以数清时，则可将培养液稀释一定倍数后再计数。 本实验无对照实验，酵母菌每天的数量变化可形成前后对照。 血球计数板使用后，切勿用硬物洗刷，可采用浸泡和冲洗的方法清洗。,探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化,酵母菌的计数 （6）讨论：计数前还应有

6、哪些步骤？需注意些什么？,探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化,酵母菌培养： 培养液配制 灭菌 接种 培养,配制质量分数为5的葡萄糖溶液（葡萄糖20g，1000 mL水），分装到5个烧杯中（200mL/烧杯）,用高压蒸汽灭菌锅将培养液和取样、计数时所用的滴管分别灭菌。贴标签。,接种时要在酒精灯附近，用灭菌干净的1mL刻度吸管每次吸取0.1mL酵母菌母液，往每个烧杯中加入。（注意：滴加量不要太多，避免初始菌数过多。）,将烧杯置于28的恒温箱中培养,无菌 操作,结果分析 （1）数据记录 以汤麦式血球计数板的数据记录为例。下表为某一次的数据记录表，其中，A表示五个中方格的总菌数；B表示菌液稀释倍数：,探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化,结果分析 （1）数据记录 下表为一周的数据记录表：,探究培养液中酵母菌种群数