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文档简介
1、第1章,实验室和基本操作,1,植物组织培养实验室设计2,仪器和设备3,玻璃产品和仪器,主要内容,第1节实验室和基本设备,1,实验室设计,组织培养室主要为:准备室无菌操作室培养室温室,a glaimpse of plant tissue要求:干燥、安静、干净、明亮、墙壁光滑、灰尘不堆积,地面平整、平滑,易于清洗和灭菌。3、培养室、培养瓶等碗中接种的植物材料的地方。主要设备:空调、培养基、照明、除湿机、通风机等。植物组织培养材料在移至田间之前,通常移至温室研磨幼苗,生根,存活,然后移至大田。第二,设备和设备,(a)无菌操作设备,烤箱:作用:干燥洗涤容器高温干燥灭菌培养物的干重量干燥和培养材料干燥。
2、2,灭菌锅,类型:普通医用消毒锅大型高压灭菌锅的作用:培养基、水和各种器械的消毒,医用便携式灭菌锅,不锈钢立式灭菌锅,3,超级清洁表,操作室(接种室)的标记类型:垂直和水平作用:灭菌操作,2,秤,在准备室中的陈列作用:取大量元素,微量元素,酶,3,酸度计,在准备室中陈列:培养基及酶制剂的pH值测定,PHS-802中国台式酸度计,通用或经济型酸度计,(3)分析空调效果:培养温度控制2。加湿器和除湿器培养室内湿度状态控制,3 .计时器,照明时间控制4。培养基培养基,5。为了改善气体状况,摇床和旋转床液体培养时使用,3,玻璃器皿和器具,(1)玻璃容器1。培养基培养用:试管、三角瓶、培养皿等2。分流器
3、类型:注射器方式注入器、漏斗分泌器、测量仪漏斗方式注入器3。其他玻璃仪器燃烧器、测量仪、移动管、容量瓶、试用瓶等,(2)仪器类别,1 .镊子类型:总镊子(接种、转让),尖镊子(茎端)2。剪刀类型:大剪刀、小剪刀、弯头剪刀3。解剖刀类型:固定式和活动式4。注射针用于转移细胞或愈伤组织5。细菌过滤器用于清除细菌(高温的影响),第二基本工作是1,洗涤剂2,灭菌剂3,灭菌工作,第一,洗涤,(1)洗涤剂清洗方法,(2)超声波清洗方法,(3)重铬酸钾清洗方法,第二,灭菌干燥热的灭菌方法2。湿热灭菌方法(蒸压)(2)培养基的杀菌1。湿热灭菌方法(高压蒸汽灭菌)2。过滤杀菌方法,3,无菌工作,3节培养基,主要
4、内容:一,培养基的组成2,培养基的制造,一,培养基的组成,(a)水分类型:蒸馏水,纯净水,自来水的作用:构成培养基的主要成分(2) 香蕉泥作用:提供有机营养(6)絮凝剂应用:固体培养基类型:琼脂、明胶等(7)其他添加剂类型:活性炭、Vc等作用:防止褐化、2、培养基选择、(a)培养基基本类型1。 盐分高的培养基:种类:MS培养基、LS培养基、BL培养基、ER培养基等。特征:无机盐浓度高,特别是硝酸根离子、钾离子和铵离子丰富。2 .硝酸钾含量高的培养基,类型:B5培养基,N6培养基,SH培养基。特征:培养基浓度高,氨氮含量低,但硝酸钾和硫胺盐酸盐(VB1)含量高。3 .中无机盐含量培养基,类型:N
5、itsch培养基、Miller培养基和h培养基。特征:大量元素含量约为MS培养基的一半,微量元素较少,但含量高,维生素较多。4 .低无机盐含量徽章,类型:White徽章,WS徽章,HE peiyangbase。特征:无机盐类含量很低,约为MS培养基的四分之一,有机成分也很低。(b)基本培养基选择,培养基:大多数植物,但生长速度慢,对无机盐要求低的植物,尤其是高铵盐,不适合有毒的植物。B5徽章:大豆、木本植物。N6徽章:适合植物的花药文化。特性:KNO3和(NH4)2SO4含量高,但不含元素钼。白色培养基:广泛使用,适用于根培养和未成熟胚培养。WPM培养基:适合木本植物的培养。特征:氮含量比较低
6、。注意!在实际应用中,需要通过实验筛选。,基本培养基对杜鹃花增殖的影响,3,培养基的制备,(a)培养基母液的制备1。基本培养基母液类型:4-液体(钙盐的最后加入)、3-液体、5-液体(钙盐和铁盐分别准备)。成分:大量元素、微量元素、铁盐、有机分裂。保管:24放在冰箱里保管。乘数:10X、100X。标签:名称、准备倍数、日期等。2 .植物生长调节剂,选择单位:mg/L,mol/L;110mmol/L准备方法:2,4D,NAA,IAA,IBA,GA3,ZT:用少量95%酒精溶解后,加入水以确定容量。KT,6ba: 1 mol/l盐酸溶解后,加入水确定容量。(b)培养基的制备,步骤:节iv培养条件,1,光照条件需要光强度,时间长度,光质量等部分材料的培养需要光,部分不需要光;不同的植物需要的光强度也不同。一般10000500lx/1216 h/日,2,温度条件大部分植物2332,一般252。15或35以上对植物生长不利。3、湿度条件培养容器内湿度100培养室湿度一般70 80相对湿度。4,煤气,
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