阿奇霉素和头孢克肟对金黄色葡萄球菌的体外抑菌试验_王凡

1、阿奇霉素和头孢克肟对金黄色 葡萄球菌的体外抑菌试验 王 凡 , 方 玲 , 纪丹丹 ( 洛阳师范学院生命科学系, 河南洛阳 471022) 摘要: 研究两种抗生素类药物对金黄色葡萄球菌的体外抑菌作用.通过在 L B琼脂平皿上贴药敏片, 测量抑 菌圈的直径来确定药物的抑菌作用.结果表明: 在本试验浓度范围内, 金黄色葡萄球菌对阿奇霉素颗粒和头孢 克肟均较敏感, 头孢克肟颗粒和阿奇霉素均在 0. 20g m L - 1时抑制作用最强, 而在同等药物浓度下阿奇霉素对 金黄色葡萄球菌的抑菌作用较头孢克肟的抑菌作用强. 关键词: 金黄色葡萄球菌 ; 抗生素;敏感性 中图分类号:Q939. 1文献标识码:

2、A文章编号:1009- 4970( 2011) 05 - 0066 - 03 金黄色葡萄球菌是临床上最常见的致病菌之一, 对人和动物的危害性较大, 同时也严重影响了畜牧 业的发展 . 大环类酯类抗生素因其经济 、 不良反应 少、 半衰期长、 方便和适用症广而被经常使用在金黄 色葡萄球菌的感染上. 同时由于头孢菌素具有广谱 抗菌活性的优点 , 在临床上也得到了广泛的应用 . 关于大环类酯类抗生素和头孢菌素对于金黄色 葡萄球菌的抑菌研究已有较多报道 1 - 5 . 但是, 长 期使用同一种抗生素用来治疗疾病时 , 机体容易产 生耐药性, 从而引起治疗效果下降, 于是大量新的 抗生素不断产生 . 例

3、如出现了新一代的环类酯类抗 生素和头孢菌素 . 阿奇霉素是新一代大环类酯抗生 素 , 其抗菌活性更强 , 抗菌谱更广, 不良反应更少 ; 头孢克肟为第三代口服头孢菌素, 其抗菌谱也较前 两代头孢菌素广 . 到目前为止 , 上述两种新一代的 抗生素对于金黄色葡萄球菌的抑菌作用鲜有报道 . 因此, 本实验通过研究阿奇霉素和头孢克肟这两种 抗菌药物对金黄色葡萄球菌的抑菌情况, 来比较这 两种新一代的抗菌药物的抑菌效果 , 其目的是为了 进一步指导临床正确合理的使用新一代抗菌药物. 1 材料与方法 1. 1 材料 1. 培养基 . L B 固体培养基 , L B 液体培养基 2试验药物. 阿奇霉素 (

4、 哈药集团三金制药诺 捷有限责任公司生产) , 头孢克肟颗粒 ( 深圳致君制 药有限公司生产) . 3. 试验菌种. 金黄色葡萄球菌( 为实验室保存 菌种 ) . 4. 试验仪器 . 高压蒸气灭菌锅, 恒温培养箱 , 烘箱 , 双人超净工作台, 三角涂布棒 , 接种环, 无 菌培养皿 , 无菌试管等 . 1. 2方法 1. 2. 1 培养基的制备 L B 液体培养基的制备: 胰蛋白胨 5g , 氯化钠 2. 5g , 酵母膏 5g , 蒸馏水 500m L ,p H :7. 2 7. 4, 121灭菌 20 m i n 6 . L B 固体培养基的制备: 胰蛋白胨 5g , 氯化钠 2. 5g

5、 , 酵母膏 5g , 琼脂 7. 5 10g , 蒸馏水 500m L , p H : 7. 2 7. 4, 121 灭菌 20 m i n . 1. 2. 2 金黄色葡萄球菌的活化 用接种环挑取冷藏保存的金黄色葡萄球菌菌种 一环 , 在 L B固体培养基上划线,37恒温培养 24h , 反复活化 2 3代 , 使菌种活力恢复 . 活化的 金黄色葡萄球菌菌种挑取一环于装有 L B 液体培养 基的试管中, 37恒温培养 16 18h . 其余菌种置 于 4 8 冰箱中保存备用. 收稿日期:2010-10-25 作者简介:王凡 ( 1976-) , 男, 江苏邳州人, 博士研究生, 讲师. 20

6、11年 5月 第 30卷 第 5期 洛阳师范学院学报 J o u r n a l o f L u o y a n gN o r m a l U n i v e r s i t y Ma y . , 2011 V o l . 30N o . 5 DOI : 10. 16594/ j. cnki . 41 - 1302/ g4. 2011. 05. 018 1. 2. 3供试药液的制备 头孢克肟药液配制取头孢克肟 1g , 加灭菌蒸 馏水配制成 0. 05g /m L 、0. 10g /m L 、0. 15g /m L 、0. 20 g /m L 的梯度稀释液, 并以蒸馏水设对照组. 阿奇霉素药液

7、配制取阿奇霉素 1g , 加灭菌蒸 馏水配制成 0. 05g /m L 、0. 10g /m L 、0. 15g /m L 、0. 20 g /m L 的梯度稀释液, 并以蒸馏水设对照组. 1. 2. 4滤纸片的制备 选择吸水性强的优质滤纸 , 用打孔器打成若干 直径为 6m m 的圆形滤纸片, 经干热灭菌后备用 . 1. 2. 5琼脂扩散纸片法 吸取 0. 1m L 菌液 , 均匀涂布在 L B 固体平板 上 , 自然干燥 30m i n , 用无菌镊子分别夹取灭菌的纸 片, 充分蘸取各个稀释度的药液贴在含菌平板上 , 每个平板放置相同的药敏片 4片 , 等距离放在琼脂 表面上. 将培养皿皿

8、盖盖上 , 平置于 37温箱中培 养 24h 后取出 , 用直尺测量抑菌圈的直径, 取其平 均直径, 即为该药物对金黄色葡萄球菌的抑菌结 果. 2 结果与分析 相同的药物浓度下, 阿奇霉素对金黄色葡萄球 菌的抑菌作用明显强于头孢克肟的抑菌作用, 其抑 菌圈直径明显大于后者 ( 见图 1、图 2和表 1) . 在 0- 0. 20g /m L 浓度范围内, 阿奇霉素和头孢克肟均 随着浓度的增加而抑菌效果加强. 图 1阿奇霉素( 左) 和头孢克肟( 右) 的抑菌观察 ( 正面图) 图 2阿奇霉素( 左) 和头孢克肟( 右) 的抑菌观察 ( 反面图) 表 1阿奇霉素和头孢克肟对金黄色葡萄球菌的抑菌圈

9、大小平均值( c m ) 药物0g /m L0. 05g /m L0. 10g /m L0. 15g /m L0. 20g /m L 头孢克肟0. 00000. 41250. 73750. 75201. 0375 阿奇霉素0. 00001. 66251. 65001. 75001. 8375 3 讨论 金黄色葡萄球菌是人类和动物化脓感染中最常 见的病原菌, 可引起局部化脓感染, 也可引起肺 炎、 伪膜性肠炎、心包炎等, 甚至败血症、脓毒症等 全身感染 . 金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决 67 洛阳师范学院学报 2011年第 5期 于其产生的毒素和侵袭性酶 3 , 医学上治疗金黄色 葡萄球菌

10、感染者主要是利用各类抗生素 , 如: 红霉 素 、 新型青霉素 、庆大霉素、万古霉素或先锋霉素 7-9 , 但随着抗生素的大量使用 , 细菌普遍出现 了耐药性, 因此各种新型抗生素的出现和它们耐药 性的研究对于临床医疗显得格为重要 . 本实验探究 头孢克肟和阿奇霉素这两种新型抗生素药物对金黄 色葡萄球菌的抑菌作用, 可作为治疗疾病时选用新 一代抗生素药物的参考. 两种药物对金黄色葡萄球 菌均有抑菌作用 , 且在试验浓度范围内, 均在 0. 20 g /m L 下抑菌效果最好, 但同等剂量下阿奇霉素的 抑菌作用更为明显. 因此本试验结果可以为治疗金 黄色葡萄球菌引起的疾病, 提高治疗疾病的效果并

11、 降低耐药菌的产生提供一些基础数据 . 由于单一抗 生素受到多种因素的限制, 因此必要时可联合用药 以减少细菌耐药现象的产生 , 使抑菌作用更加明 显 10 . 本实验也有诸多需要改进的问题 , 如上述两种 药物对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度的测定和上 述两种药物的联合用药对金黄色葡萄球菌的抑菌效 果的测定, 以上问题均需进一步的试验来探究. 参考文献 1 应春妹, 汪雅萍, 甘如饴, 等. 双纸片法检测葡萄球菌中 可诱导的克林霉素耐药 J . 中国抗感染化疗杂志, 2005, 5:171-173. 2 羽泽生. 6种抗生素对常见菌群的药敏观察 J . 中国医 药学杂志, 1989, 6( 1

12、2) :32. 3 H a r o l dC . R e l a t i o no ft r u c t u r a l p r o p e r t i e so fb e t a-l a c t a m a n t i b i o t i c st oa n t i b a c t e r i a l a c t i v i t y J . A mJM e d ,1985, 79( 2A ) : 2-13. 4 李惠卿, 曹丽君, 苏颖. 金黄色葡萄球菌体外药物敏感 性分析 J . 医学创新研究, 2008, 5( 2) :120-121. 5 朱德妹, 汪复, 张婴元. 2004年上海地区

13、细菌耐药性监 测 J . 中国抗感染化疗杂志, 2005, 5:195-200. 6 周德庆. 微生物学试验( 第二版) M . 北京:高等教育 出版社, 2006:115-133. 7 崔晓霞, 王秀敏, 侯晓礁, 等. 13种抗生素类药物对大肠 杆菌的体外抑菌试验 J . 吉林畜牧兽医, 2008, 29( 7) : 9-10. 8 文细毛, 任南, 徐秀华, 等. 全国医院感染监控网医院 感染病原菌分布及耐药性分析 J . 中华医院感染学杂 志, 2002, 12( 4) : 4-7. 9 李岩, 王晶, 刘新元, 等. 金黄色葡萄球菌 3年耐药性 变迁研究 J . 中华医学感染学杂志,

14、2008, 18(11) : 1621-1623. 10 陶传敏, 陈慧莉, 杜晓青, 等. 金黄色葡萄球菌的耐药 性监测与预防对策 J . 中华医学杂志, 2006, 21( 1) : 52-53. 责任编辑王保玉 B a c t e r i o s t a s i s T e s t o f S t a p h y l o c o c c u s A u r e u s o nA z i t h r o m y c i n D i s p e r s i b l e T a b l e t s a n dC e f i x i m e G r a n u l e s i nV i t r

15、o WA N GF a n , F A N GL in g , J I D a n - d a n ( L if eS c i e n c eD e p a r t m e n t , L u o y a n g N o r m a l U n i v e r s i t y , L u o y a n g471022, C h in a ) A b s t r a c t : S u r v e i ll a n c e o na n t i b i o t i c r e s i s t a n c e o f S t a p h y lo c o c c u s a u r e u s

16、s tr a i n s w a s c o n d u c t e db y 2 a n t im i c r o - b i a l d r u g s( A z i th r o m y c i nD i s p e r s i b l eT a b l e t sa n dC e f i x i m eG r a n u l e s ) .S ta p h y l o c o c c u sa u r e u ss e n s i ti v i tyte s t , w h i c ho b t a i n e dfr o mo u r l a b o r a t o r yw a s

17、 c a r r ie do u t b yu s i n gth em e t h o dd i l u t e w i tht h e s o l id .T h er e s u lt s s h o w e d t h a t S t a p h y lo c o c c u s a u r e u s a r e a l l s e n s i t i v etot h e 2 a n t i m i c r o b i a l d r u g s , w h e nt h e d r u g s m a s s w e r e 0. 20g m L -1 t h eh i g h e s t i n h ib i t i o na p p e a r d b u t w h e ni n t h e s a m e d r u g m a s s t