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文档简介
1、专题2.2动物细胞工程、动物细胞培养、动物细胞融合、单克隆抗体制备、核移植、动物细胞工程技术、动物细胞工程基础、2.2.1动物细胞培养和核移植技术、动物细胞培养、(1)概念,是指从动物体内取出相关组织,将其分散成单细胞,然后将其放置在适当的位置(2)、原理、细胞分裂和增殖、(3)、处理、幼动物、切割组织、原代细胞培养、细胞悬浮、传代细胞培养、 细胞附着:培养贴壁细胞,细胞只有附着在基质上才能生长和繁殖,细胞接触受到抑制,细胞数量在附着生长过程中随着细胞分裂而不断增加。相关概念,原代培养:取出体外后立即培养的细胞为原代细胞。通常,第一代细胞和10代以内的细胞称为原代细胞培养。传代培养:将原代细胞
2、从培养瓶中取出,制备细胞悬液,装入两个或两个以上的培养瓶中进行连续培养,称为传代培养。诱导过程、组织、器官、细胞悬液、酶、覆盖有瓶壁的细胞、单细胞、添加溶液、动物胚胎或幼动物、胰腺蛋白、培养、接触抑制、原代培养(分装前)、1-10代细胞、培养物、添加溶液、4050代细胞(细胞株)、无细胞系:在50代细胞系之后,细胞生长再次停滞,并且由于遗传物质的改变,只有一些细胞在培养条件下可以无限期传代。这个传代的细胞是一个细胞系。细胞系与细胞系的区别:细胞系的遗传物质发生了变化,具有癌细胞的特性,失去接触抑制,易于传代。为什么选择动物胚胎或年轻个体的器官或组织作为动物细胞培养材料?2.为什么组织细胞在培养
3、前要分散成单个细胞?因为这些组织或器官具有很强的分裂能力,易于培养。阻塞组织使细胞紧密结合,限制了细胞的生长和增殖,细胞不能与培养液充分接触,不利于培养。胰蛋白酶的功能是什么?这可以解释细胞间物质的组成。催化蛋白质水解。细胞间物质主要是蛋白质(胶原蛋白等)。)。细胞膜的主要成分是什么?5.胰蛋白酶能消化细胞吗?既然胰蛋白酶可以消化细胞,当我们将动物组织分散成单细胞时,应该注意什么?胃蛋白酶能代替胰蛋白酶吗?为什么?注意控制时间,因为两者的最适酸碱度不同,而正常组织细胞的生存环境接近胰蛋白酶的最适酸碱度。1.无菌无毒环境,保证细胞的顺利生长和增殖,添加一定量的抗生素,定期更换培养基,并添加糖(葡
4、萄糖)、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、动物血清等。(4)动物细胞培养的条件,(2)营养,(3)培养室内温度和酸碱度控制在36.50.5,(7.27.4),在培养箱中提供O2和CO2(95%空气和5% CO2),(4)气体环境:植物组织培养和动物细胞培养的比较,(3)总体(5)动物细胞培养技术的应用,(3)细胞的生理、药理和病理学研究,(1)培养用于烧伤患者皮肤移植的健康细胞,(2)基因工程受体细胞,前景,数据1:培养在培养基中加入许多致畸和致癌物质后,培养细胞的染色体结构和数量会发生变化。根据突变细胞在所有培养细胞中的百分比,可以判断一种物质的毒性。如今,动物细胞培养已经成为一种快速、
5、灵敏、有效的检测有毒物质的手段。资料2:人工关节软骨的再生。1.第一次手术:从病人关节软骨的无应力部分取出一块葡萄干大小的健康软骨。2.软骨细胞被分离并在体外培养三周,这使软骨细胞的数量增加了约1020倍。3.在第二次手术:中,清洁软骨的受损部分,从下部骨中取出与伤口大小相同的骨膜,缝合在伤口上方,并将软骨细胞注射到骨膜下方。资料3:结果:康复一年后可恢复正常生活。动物体细胞核移植技术和克隆动物(1)动物细胞核移植的概念:动物细胞核移植是将动物细胞的细胞核移植到卵母细胞中,并从卵母细胞中取出细胞核,使其能够重组并发育成新的胚胎,最终发育成动物个体。动物细胞核移植是将动物细胞的细胞核移植到卵母细
6、胞中,然后将细胞核从卵母细胞中取出,使其能够重组并发育成新的胚胎,最终发育成动物个体。(2)分类:细胞分化程度低,易于恢复全能性;细胞分化程度高,很难恢复全能性。通过核转移获得克隆动物3360。克隆在希腊语中的意思是“小树的枝叶”,指的是无性繁殖。去核卵细胞,供体细胞,重组细胞,替代牛c,无性繁殖,(3)体细胞的核移植过程,(4)体细胞核移植技术的应用前景,(1)加快畜牧业中家畜遗传改良的进程,(2)保护濒危物种,(3)生产用于组织和器官移植的医用蛋白质和供体,(5)体细胞核移植。克隆技术效率低,畸形率高,死亡率高,而且容易过早老化。3.克隆动物的生产很昂贵。2。其遗传物质在动物细胞培养过程中
7、发生变化的细胞有:(1)B10代内获得的不朽细胞,(2)原代细胞,(3)传代,(4)1。动物细胞工程技术的基础是()在对动物细胞培养的描述中,正确的是:(1)动物细胞培养的目的仅仅是获得大量分泌蛋白B,在动物细胞培养前应使用胰蛋白酶分散细胞C,细胞癌变发生在从原代培养到继代培养的过渡阶段D,继代培养细胞的遗传物质在培养50代后没有改变,B,4,一般来说,动物细胞的体外培养需要满足以下条件()。无毒无菌的环境培养基需要加入与动物体温相近的血清温度,需要O2,不需要CO2。CO2可以调节培养液的酸碱度。动物细胞培养的特点()细胞粘附有丝分裂细胞分化接触抑制减数分裂初级培养一般传至110代。请相应回
8、答:(1)动物器官或组织放在容器a中。它通常取自_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。(2)容器A中的动物器官或组织应首先处理,然后用酶处理,即分散细胞。动物胚胎或幼动物,切成块,胰脏蛋白,使细胞能与培养液充分接触,便于培养。(3)培养首先在瓶B中进行,瓶内培养基有_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _等。在这个瓶子里培养一段时间后,许多细胞会因老化而死亡,这是第一代培养,这个时候的培养叫做_ _。(4)为了将瓶B中的细胞分装到瓶C中,用处理它们,然后制备它们并分装它们。、动物血清、10、原代培养、胰蛋白酶、细胞悬液、动物细胞融合和单克隆抗体、动物细胞融合、细胞a、细胞b、杂交细胞、灭活病毒、物理和化学方法、用灭活病毒诱导动物细胞融合过程、细胞融合和融合诱导的细胞融合物质、诱导剂:病毒、聚乙二醇诱导的细胞融合病毒必须灭活。思考和讨论:为什么用于细胞融合的病毒需要被灭活?第二,单克隆抗体,什么是抗体?抗体是机体受抗原刺激后产生的一种具有免疫功能的免疫球蛋白,能与抗原特异性结合。b淋巴细胞产生抗体。单克隆抗体是由单个B淋巴细胞无性繁殖(克隆)形成的具有相同基因型的细胞群,由该细胞群产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。特点:特异性强、灵敏度高
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