免疫组化在肿瘤病理诊断中的应用ppt课件

1、。1。免疫组织化学在肿瘤病理诊断中的应用。2。免疫组织化学是免疫学和组织化学的结合。其基本原理是应用抗原和抗体的特异性结合，然后用显色剂显色，实现对标记细胞的某些抗原物质的定性和定位检测技术。这是一种简单有效的肿瘤标记技术。目前，免疫组织化学技术已经围绕提高敏感性和特异性而不断完善和发展，但在蛋白水平上仍有其局限性，其敏感性和特异性不足，应与其他组织化学、电镜和分子生物学技术相结合。1.免疫组织化学在诊断中的应用原理1。防止假阳性和假阴性，防止操作污染，规范操作，设置阳性和阴性对照。2选择两种以上同种抗体：目前肿瘤均为相关抗原，特异性不足。多种同种抗体可提高阳性率。免疫组化结果的正确评价：结果

2、受多种因素影响，如抗体、特异性和质量、操作、标本固定等。抗体的合理选择：应满足设计要求，价廉物美，分为1、2、3行抗体。5 .待检标本的抗原保存应更好：应要求快速、新鲜和充分的固定，应采用合适的固定剂，用福尔马林溶液固定的标本应修复抗原。免疫组织化学在肿瘤诊断中的应用(1)上皮肿瘤标志物角蛋白：一种中间丝蛋白，分为(1)表皮角蛋白鳞状上皮或高分化鳞状细胞癌标志物；(2)细胞角蛋白(CK)是一种低分子量角蛋白，它标志着腺癌、移行细胞癌和低分化鳞状细胞癌。一般来说，最好使用常用的广谱角蛋白抗体。上皮膜抗原(EMA):这也是一种常见的上皮细胞标记抗体，并且细胞膜是阳性的，所以最好将其固定在Zanke

3、rs、Bouin或B5固定液中。它在低分化和未分化上皮中表达良好，但也可在间变性大细胞淋巴瘤和恶性横纹肌样瘤中表达。桥粒蛋白：主要标记上皮桥粒，桥粒仅在复层上皮中表达。癌胚抗原(CEA)是一种从结肠癌中分离的球蛋白，位于细胞膜上，对腺癌如肠、胃、肺、胰腺、肝和乳腺呈阳性，但一些非上皮性肿瘤也可呈阳性。甲胎蛋白(AFP)，一种从胎儿肝细胞提取的酸性糖蛋白，在细胞质和细胞膜中表达，是肝细胞癌和卵黄囊癌的特异性标志物。睾丸、间充质组织的免疫组化标记，(2)间充质肿瘤包括纤维结缔组织、脂肪、肌肉、血管、骨、软骨和周围神经等。间充质肿瘤通常由多向分化的原始间充质细胞产生，它们具有共性，但缺乏标记抗体的特

4、异性和交叉反应。1波形蛋白(Vim):是一种细胞中间丝蛋白抗体，可在大多数软组织肿瘤中表达，但在纤维细胞中明显，在一些上皮性肿瘤中也有阳性反应。它经常被用作鉴别间质性肿瘤和上皮性肿瘤的第一线抗体。结蛋白：平滑肌和横纹肌可以是阳性的。3肌动蛋白：平滑肌、血管内皮和肌上皮细胞标记物，HHF35是特异性的。4肌球蛋白：最好标记横纹肌。第五个因素，CD34，对血管内皮细胞的肿瘤标志物是特异性的。10，6S-100蛋白是外周神经许旺细胞的特异性标记抗体，可发现其对脂肪细胞、朗格汉斯细胞、肌上皮细胞、黑素细胞及其肿瘤呈阳性。酸性或碱性磷酸酶：标记骨和软骨肿瘤。双向分化肿瘤标志物是具有上皮和间充质细胞分化的

5、肿瘤的标志物，例如滑膜肉瘤、间皮瘤、脑膜瘤、癌肉瘤、上皮样肉瘤等。通常，CK和EMA用于标记上皮细胞，Vim用于标记间充质细胞。此外，还有一种恶性纤维组织细胞瘤，它是由纤维细胞、肌成纤维细胞和组织细胞组成的恶性肿瘤，因此Vim和组织细胞标记用于诊断。，12，(4)神经元细胞，胶质细胞和神经内分泌肿瘤标志物1神经元特异性烯醇化酶(NSE):神经元肿瘤标志物。胶质纤维酸性蛋白(GFAP):脑胶质细胞的特异性标记抗体。CD34 F8血管、神经内分泌肿瘤标志物：类癌、胰岛、垂体肿瘤、甲状腺髓样癌、皮肤默克尔细胞癌、原始神经外胚层肿瘤(PNET)等。目前，神经元特异性烯醇化酶、CGA和Syn同时或一起使

6、用，因为神经元特异性烯醇化酶不够具体。14，(5)淋巴网状肿瘤(淋巴瘤)标记的1B细胞标记的抗体：CD20(L26)，Ig重链(IgG，M，A，E)，轻链(，CD79a。用2T细胞标记的抗体：CD45RO(UCHL-1)，CD3较好。CD56 3组织细胞标记抗体：Mac387，CD14，溶菌酶，-1抗胰蛋白酶等。霍奇金淋巴瘤(HL)R-S细胞标记抗体：CD15、CD30-5白细胞共同抗原(LCA):对淋巴网状细胞呈膜阳性，最好作为一线抗体。注：(1)世界上有100多种标记抗体统称为CD(聚类设计)系列。(2)大多数淋巴细胞标记和R-S细胞为膜阳性，免疫球蛋白和组织细胞标记为胞浆阳性。肿瘤细胞增

7、殖活性和凋亡标记抗体肿瘤细胞增殖指数反映细胞增殖活性，是肿瘤细胞新生(恶性)的客观指标，与凋亡指数呈反比关系。常用的抗体有：1增殖性神经核抗原(PCNA)，它是核阳性的。2Ki-67，Brdu抗体：最初需要新鲜组织。最近，Ki-67石蜡切片标记抗体问世。17，3凋亡标记抗体：发现凋亡发生在受基因调控的正常细胞自然死亡时。后来，人们发现肿瘤细胞也可以发生，并且一些药物的放疗和化疗也可以诱导细胞凋亡，因此它成为肿瘤发生、发展和治疗的研究热点。标记抗体有：(1)抗凋亡基因蛋白抗体：Bcl-2、Bcl-XL和mtp53。(2)抗凋亡基因蛋白：Fas/FasL系统、wtp53、Bax、Bcl-xs、Fas等。Tunel标记。18，(7)癌基因和抗癌基因，转移促进基因和转移抑制基因的蛋白抗体标记。目前，有许多应用，因为这种方法比分子生物学技术简单，但这种结果不能直