高效液相色谱法原理与应用(详细版)

1、1.高效液相色谱的原理和应用，高效液相色谱及其应用参考书，实用高效液相色谱的建立，2。第1章，色谱的基本原理，1。概述色谱的定义和特征，色谱的分离原理，色谱的分类，3，1。色谱的定义，茨维特实验，4。色谱分离效果图。它由两个相组成，一个是固定相，另一个是流动相，这两个相的运动方向相反。色谱在分析中使用色谱，这被称为色谱分析。色谱分析是一种分离和分析方法。色谱分离原理当流动相中携带的混合物流过固定相时，它将与固定相反应(力)。由于混合物中各组分的性质和结构不同，与固定相的相互作用也不同。因此，在相同驱动力的作用下，不同组分在固定相中的停留时间越来越长，以至于它们以不同的顺序流出固定相。色谱的分类

2、可分为气相色谱、液相色谱、超临界流体色谱和8种。什么是气相色谱？以气体为流动相的气相色谱适用于分离和分析易蒸发(蒸汽压在-190-500范围内为0.2-10兆欧)、稳定、难分解、难反应的样品，特别适用于同系物和异构体的分离。9，应用实例(气相色谱)，10，什么是液相色谱？以液体为流动相的液相色谱适用于高沸点、热不稳定和离子型样品的分离和分析。11、根据固定相的使用形式，液相色谱可分为柱色谱、纸色谱、以滤纸为固定相或固定相载体的薄层色谱，它们均匀地涂在玻璃板上或塑料板上。12、薄层色谱的应用，12、3、4、5、6、7、8、9，谱带描述1三七皂苷F11 2西洋参3人参皂苷Rg1 4人参皂苷Rf 5

3、人参皂苷Rc 7人参皂苷Rb1 8三七皂苷R1，人参、西洋参和三七的鉴别，13、丹参有效成分的高效液相色谱图1。丹参素；2.原儿茶酸；3.原儿茶醛；4.咖啡酸；5.丹酚酸F；6.丹酚酸D；7.丹酚酸J /异构体；8.丹酚酸E；9.迷迭香酸；10.紫草酸；11.丹酚酸B；12.丹酚酸B/E/异构体；13.丹酚酸甲；14.二氢丹参酮；15.四氢丹参酮/异构体；16.隐丹参酮；17.丹参酮；18.丹参酮IIA，14，15，尾峰，舌延长峰，鬼峰，假峰，异常峰底部基线漂移基线噪声带扩展，16，死区时间(tM):完全将部件排除在系统之外的时间保留时间(tR):调整保留时间(tR):死区体积(VR):保留体

4、积(VR):调整保留体积(VR) 3360，17，R :分辨率tR 3:色谱分离的基本方程，18。不同R值的峰重叠示意图。1.5表示两个相邻峰的分离度太小，两个峰的分离时间太长，工作效率低。通常需要1.5，也可以遵循行业的特殊规定。19.根据该公式，优化试验条件，提高分离度。从数学推导来看，分别增加n、k值可以提高分辨率。，色谱分离的基本方程，20，分离选择性()对分辨率(r)的影响，如果t0=1 min，=1.64/1.58=1.04，=1.15/0.85=1.35，=0.95/0.63=1.50，改变分离选择性的方法是通过改变不同的流动相来改变流动相的酸碱度，尽可能优化以前的实验条件，提高A值，改变柱温，避免改变固定相(购买新的柱柱效(N)取决于分辨率(R)。上述两个光谱图中的K值完全相同，只是因为柱效率不同，它们的分辨率也不同。直观地说，峰值的锐度代表了色谱柱的效率。峰越尖锐，柱效率越高。理论塔板数(n)通常用于测量色谱柱效率。22.理论塔板数和理论塔板高度的计算方法：理论塔板数HETP=L/n理论塔板数n越大，塔效率越高。理论塔板数HETP越有效，塔效率越高。23.容量因子(k)对分辨率(r)的影响，容量因子越大，分辨率越大。k1 3 5 7 9 11 13k/k1 0.50 0