湿热灭菌法.ppt

1、第三章 灭菌制剂与无菌制剂 第一节 概 述 一、灭菌与无菌 1灭菌（sterilization）是指用物理、化学或机械 方法杀死或除去所有活的微生物，以获得无菌状态 的过程，所用的灭菌方法称灭菌法。 2无菌（sterility）系指不存在任何活的微生物。,3.无菌操作（asepic technique) 系指在整个操作过程中利用和控制一定 条件，使产品避免被微生物污染的一种操作 方法或技术。,4.防腐（antisepsis） 系指用物理或化学方法抑制微生物的生 长与繁殖的手段，亦称抑菌。对微生物的生 长与繁殖具有抑制作用的物质称抑菌剂或防 腐剂。 5.消毒（disinfection） 系指用物

2、理或化学方法杀灭或除去病原 微生物的手段。对病原微生物具有杀灭或除 去作用的物质称消毒剂。,药物制剂,规定无菌制剂： 不得检出活菌。,非规定无菌制剂（限菌制剂）： 限定染菌的种类与数量。,6.灭菌制剂 系指采用某一物理、化学方法杀灭或除 去所有活的微生物繁殖体和芽孢的一类药物 制剂。 7.无菌制剂 系指采用某一操作方法或技术制备的不 含任何活的微生物繁殖体和芽孢的一类药物 制剂。,无菌制剂,注射用制剂,眼用制剂,植入型制剂,创伤用制剂,手术用制剂,注射剂、输液、注射粉针,滴眼剂、眼用膜剂、软膏剂、凝胶剂,植入片,溃疡、烧伤及外伤用制剂,止血海棉、骨蜡,二、灭菌与无菌技术,提高药物制剂的安全性

3、保护制剂的稳定性 保证制剂的临床疗效,目的,灭菌法,物理灭菌法,化学灭菌法,无菌操作法,（一）物理灭菌技术,利用蛋白质与核酸具有遇热、射线不稳 定的特性，采用加热、射线和过滤方法，杀 灭或除去微生物的技术称为物理灭菌法，亦 称物理灭菌技术。,1. 干热灭菌法 2. 湿热灭菌法 3. 过滤灭菌法 4. 射线灭菌法,1. 干热灭菌法,系指在干燥环境中进行灭菌的技术。 包括： 灭菌温度和时间： 135 145灭菌 3 5h； 160 170灭菌 2 4h； 180 200灭菌 0.5 1h,火焰灭菌法,干热空气灭菌法,1）火焰灭菌法,系指用火焰直接灼烧灭菌的方法。 该法适用于耐火焰材质（如金属、玻璃

4、及瓷器等）的物品与用具的灭菌，不适合药品的灭菌。,2）干热空气灭菌法,系指用高温干热空气灭菌的方法。 该法适用于耐高温的玻璃和金属制品以及不允许湿气穿透的油脂类（如油性软膏基质、注射用油等）和耐高温的粉末化学药品的灭菌，不适于橡胶、塑料及大部分药品的灭菌。,2. 湿热灭菌法,系指用饱和蒸气 、沸水或流通蒸气进行灭菌的方法。 包括：,热压灭菌法,流通蒸气灭菌法,煮沸灭菌法,低温间歇灭菌法,1）热压灭菌法,系指用高压饱和水蒸气加热杀灭微生物的方法。能杀灭所有细菌繁殖体和芽孢，适用于耐高温和耐高压蒸汽的所有药物制剂 、玻璃容器、金属容器、瓷器、橡胶塞、滤膜过滤器等。 灭菌温度（蒸气表压）和时间： 1

5、15(67kPa)、30min； 121(97kPa)、20min； 126(139kPa)、15min,湿热灭菌法,影响湿热灭菌因素,微生物的种类和数量 耐热、压次序： 芽孢繁殖体衰老体 微生物数量 灭菌时间,蒸气性质,蒸气,饱和蒸气,过湿饱和蒸气,过热蒸气,热含量,热穿透力,灭菌效率,药物性质和灭菌时间,灭菌温度愈高，灭菌时间愈长，药品被破坏的可能性愈大。,原则： 在达到有效灭菌的前提下，尽可能降低灭菌温度和缩短灭菌时间。,其他,介质pH值,介质的营养成分,中性 最耐热,碱性 次之,酸性 最弱,抗热性强,营养高,2）流通蒸气灭菌法,系指在常压下，采用100流通蒸气加热 杀灭微生物的方法。

6、灭菌时间通常为3060min。该法适用于 消毒及不耐高热制剂的灭菌。但不能保证杀 灭所有的芽孢，不是可靠的灭菌法。,湿热灭菌法,3）煮沸灭菌法,系指将待灭菌物品置沸水中加热灭菌的 方法。煮沸 时间通常为3060min。该法灭 菌效果较差，常用于注射剂、注射针等器皿 的消毒。必要时加入适量的抑菌剂，如三氯 叔丁醇、甲酚、氯甲酚等，以提高灭菌效 果。,湿热灭菌法,4）低温间歇灭菌法,系指将待灭菌物置6080的水或流通蒸 气中加热60min，杀灭微生物繁殖体后，在 室温条件下放置24h，让待灭菌物中的芽孢 发育成繁殖体，再次加热灭菌、放置，反复 多次，直至杀灭所有芽孢。 该法适用于不耐高温、热敏感物

7、料和制 剂的灭菌。 缺点是费时、工效低、灭菌效果差，加 入适量抑菌剂可提高灭菌效率。,湿热灭菌法,3. 过滤灭菌法,系指采用过滤法除去微生物的方法。属 于机械除菌方法，该机械称为除菌过滤器。 适用于对热不稳定的药液、气体、水等物品 的灭菌。对灭菌用过滤器应有较高要求。常 用的除菌过滤器： 0.22m的微孔滤膜器和0.3 mG6垂熔玻 璃滤器。,4. 射线灭菌法,系指采用辐射、微波和紫外线杀灭微生物和芽孢的方法。,包括：,（1）辐射灭菌法 （2）微波灭菌法 （3）紫外线灭菌法,1）辐射灭菌法,系指采用放射线同位素（60Co和137Cs） 放射的 射线杀灭微生物和芽孢的方法。 辐射灭菌剂量一般为2

8、.5104Gy。 本法适用于热敏物料和制剂的灭菌，常 用于维生素、抗生素、激素、生物制品、中 药材和中药制剂、医疗器械、药用包装材料 及药用高分子材料等物质的灭菌。,射线灭菌法,优点： 不升高产品温度，穿透力强，灭菌效率高。 缺点： 设备费用较高，对操作人员存在潜 在的危险性，对某些药物（特别是溶液 型）可能产生药效降低或产生毒性物质 和发热物质等。,射线灭菌法,2）微波灭菌法,采用微波（频率为300MHz300kMHz)照射产生的热能杀灭微生物和芽孢的方法。 该法适用于液体和固体物料的灭菌，且对固体物料具有干燥作用。 特点：微波能穿透到介质和物料的深部，可使介质和物料表里一致地加热；且具有低

9、温、常压、高效、快速、低能耗、无污染、易操作、易维护、产品保质期长等特点。,射线灭菌法,热效应使微生物中蛋白 质变性而失活。,微波杀菌机理,非热效应干扰了微生物正常的新陈代谢，破坏微生物的生长环境。,低温（7080）即可杀灭微生物，不影响药物的稳定性。,射线灭菌法,3）紫外线灭菌法,系指用紫外线（能量）照射杀灭微生物和芽孢的方法。用于紫外灭菌的波长一般为200300nm，最强灭菌力的波长为254nm。 该法适用于照射物表面灭菌、无菌室空气及蒸馏水的灭菌。不适合于药液的灭菌及固体物料深部的灭菌。,射线灭菌法,灭菌机理： 紫外线可导致核酸蛋白变性，又能使空 气中氧气产生微量臭氧。 紫外线穿透能力弱

10、，并能被普通玻璃吸 收，装于容器中的药物不能用紫外线灭菌。 紫外线对人体有一定的伤害，照射过久 易引起结膜炎、红斑及皮肤烧灼。,射线灭菌法,（二）化学灭菌法,系指用化学药品直接作用于微生物而将其杀灭的方法。 杀菌剂是指对微生物具有触杀作用的化学药品。分为气体杀菌剂和液体杀菌剂。 杀菌剂只对微生物繁殖体有效，不能杀灭芽孢。 杀菌效能决定于微生物的种类与数量、物体表面光洁度或多孔性以及杀菌剂的性质等。,气体灭菌法： 该法适用于环境消毒和不耐热的医用器具、设 备和设施等的消毒，亦用于粉末注射剂的消毒。常 用的气态杀菌剂：环氧乙烷、甲醛、过氧乙酸等。 药液灭菌法 ： 该法常作为其他灭菌法的辅助措施，适

11、用于皮 肤、无菌器具和设备的消毒。常用的消毒液有： 75%乙醇、1%聚维酮碘溶液、0.10.2%新洁尔灭 溶液、酚或煤酚皂溶液等。,（三）无菌操作法,系指整个过程控制在无菌条件下进行的 一种操作方法。适用于一些不耐热药物的注 射液、眼用制剂、皮试液、海绵剂和创伤制 剂的制备. 无菌操作法包括无菌操作室的灭菌和无 菌操作两个环节。,1. 无菌操作室的灭菌,常采用紫外线、液体和气体灭菌法对 无菌操作室环境进行灭菌。 常用甲醛溶液加热熏蒸法。,气体发生装置 （蒸气加热夹层锅）,液态甲醛,甲醛蒸气,鼓风机,无菌室关闭熏蒸1224h,湿度60%温度25,25%氨水,除气,2. 无菌操作,无菌操作的场所

12、无菌操作室、层流洁净工作台、无菌操作柜。 无菌操作的所用物品、器具、环境 操作人员,三、空气净化技术,空气净化系指创造洁净空气为目的的空气调节措施。 空气净化技术系指为达到某种净化要求所采用的净化方法。分为工业净化和生物净化。,（一）空气净化标准,1.含尘浓度 是指单位体积空气中所含粉尘的个数（计数浓度）或毫克量（重量浓度）。 2.净化方法,（1）一般净化,（2）中等净化,（3）超净净化,主要指标,采用的技术,温度、湿度,温度、湿度，对含尘量和尘埃粒子有一般要求,温度、湿度，对含尘量和尘埃粒子有严格要求,初效过虑,初、中效二级过滤,初、中、高效三级过滤,（二）洁净室的净化度标准,（三）空气净化

13、技术,1. 过滤方式： 1）表面过滤 2）深层过滤 2. 过滤机理： 1）拦截作用 2）吸附作用 3. 影响因素： 粒径、过滤风速、介质纤维直径和密实 性、附尘。,（四）空气过滤器,空气过滤器的种类 板式过滤器、契式过滤器、袋式过滤器、 折叠式过滤器。 空气过滤器的特性 1）过滤效率 2）穿透率和净化系数 3）容尘量,四、微生物致死动力学 （一）致死速度常数（k） 用加热、辐射或气体灭菌，微生物的死亡速度符 合一级或近一级过程，用下式表示为： 其指数形式为：Nt = No e-k t 其对数形式为：1g Nt = lgNo,（二）D值 在1g Nt = lgNo 中，令其斜率的负倒数为D值，

14、则：D = 可见： D值的含义为在一 定灭菌温度下被灭 菌物品中微生物数 减少90%所需时间， 单位为min。,D值愈大表明微生物抗热性愈强，需要加热灭 菌较长时间才能将其杀死，故测定D值时应选择耐 热性强的微生物作指示剂。 D值的大小除与微生物种类、灭菌温度有关 外，还与微生物存在的环境有关。 以上关于D值的定义也适用于化学灭菌法和辐 射灭菌法。,（三）Z值 1衡量温度对D值影响的参数称Z。 对特定的微生物在特定介质或环境中，经不同 的温度条件，可得到不同的D值。用1gD 对温度作 图，直线斜率 D2是温度T2时的D值； D1是温度T1时的D值。,所以，Z定义为： 在一定条件下对特定的微生物

15、灭菌时， 改变（或降低）一个1gD值所需改变的温度 数。 Z的单位为。,2不同灭菌温度与121灭菌 对微生物致死效果的比较(Z10) 温度 121 1.000 1.000 120 0.794 1.259 118 0.501 1.955 116 0.316 3.162 114 0.199 5.012 112 0.126 7.934 110 0.079 12.600,测定嗜热脂肪芽胞杆菌在不同溶液中的Z值 溶液 Z值（） 5% 葡萄糖溶液 10.3 注射用水 8.4 5%葡萄糖乳酸盐林格氏溶液 11.3 pH7磷酸盐缓冲液 7.6,（四）致死指数（inactivation factor） 致死指数

16、（IF）定义为经一定方法灭菌后微生 物数减少的程度，用下式表示为： 式中 ： D灭菌条件下微生物的D值； t灭菌时间。 例如，某种微生物在121时D值为1.5min，灭 菌时间为15min，则IF=1010，它说明在121灭 15min，被灭菌物品中的微生物数减少1010。,致死指数常简单地用t/D表示，即： 例如其值为12时，它意味着选择的灭菌方 法能使微生物数目减少1012。 因此，已知微生物的D值和灭菌方法的IF 值，便可确定灭菌时间。,（五）F值和F0值 1F值（用于干热灭菌） F值定义为：在一定灭菌温度T，给定Z值所产生的 灭菌效果，与设计的参比温度T，给定Z值所产生 的灭菌效果相同

17、时所相当的时间，单位为min。用 公式表示如下：,积分式为： 如某个加热灭菌过程的F3，它表示该灭菌过 程对微生物的灭菌效果，相当于被灭菌物品置于参 比温度下灭菌3min的灭菌效果。,2FO值 1）FO值的定义及计算方法 对于热压灭菌法，参比温度定为121，参比 微生物选择特别耐湿热的嗜热脂肪芽胞杆菌，其Z 值为10。此时得到的F值称为FO值。 FO定义为一定灭菌温度（T），Z值为10 所产生的灭菌效果，与121，Z值为10所产生 的灭菌效果相同时所相当的时间（min）。,积分式为： 式中：t测量被灭菌物品温度的时间间隔， T是每个t测得的被灭菌物品的温度。 上式计算的FO值又称物理FO，它是

18、由温度T和 时间两个物理量决定的，只限于应用在热压灭菌 法。,灭菌过程中不同时间的温度（t取1min） 时间 0 1 2 3 4 5 6 7 8 温度 100 102 104 106 108 110 112 115 114 时间 9-39 40 41 42 43 44 温度 115 110 108 106 102 100,+ + + + + + + + + + + + + + + 8.49 F08.49意味着44分钟内一系列温度下的灭菌效 果相当于该物品在121灭菌8.49min产生的灭菌 效果。,2）FO的其它表示方式 （1）FO值还可以用D121与致死指数的对数乘积 表示： FO = D1

19、21lgIF 或： FO = D121 式中的t、D分别为灭菌温度时的灭菌时间和D 值。 上式的FO相当于用121灭菌减少相同个数的D值所需用的时间。,(2)微生物死亡速度方程： 若确定灭菌后被灭菌物品内微生物残存数Nt为 106，即达到可靠的灭菌效果； 同时，D = 故也可将在一定温度T下杀死容器中全部微生物所需的时间称为F值，它等于D值与微生物对数 降低值的乘积，即： FT DT( lgN0 lg106 ),T 121 时，有： FO D121 (lgN0 lgNt ) 即FO为D121值与微生物对数降低值的乘积； 式中的Nt为灭菌后希望达到的微生物残存数，又 叫染菌度概率，一般取Nt为1

20、06即认为达到可靠 的灭菌效果。则： FO D121 (lgN0 lg106 ) 因此，FO又相当于121热压灭菌时杀死被灭 菌物中全部微生物所需的时间，由于该F0由微生物 的D值和微生物的初始数及残存数所决定，故又称 其为生物F0。,例如： 将含有200个嗜热脂肪芽胞杆菌的 5%葡萄糖溶液以121热压灭菌时， 其D=2.4min，则： FO = 2.4(1g2001g106) = 19.92min. =20min.,3)FO的计算及其影响因素 FO值的计算对于灭菌过程的设计及验证 灭菌效果极有意义，它将温度与时间对灭菌 的作用统一于FO值中，计算时应用的温度和 时间更为精确。 应用中，将FO

21、 D121 (lgN0 lg106 ) 编入计算机程序中，并与灭菌器相联，根据 测得数据，就可自动显示F0值。,影响FO值的因素主要有： 容器的大小、形状、热穿透系数；灭菌溶 液的粘度；容器的填充量；容器在灭菌装置 内的数量和排布等；注射剂的溶剂不同，灭 菌需要的FO有时也不一样。 实践中，应当测定灭菌器内不同位置的温 度，合理的安放灭菌物品，以使计算的FO值 更为可靠。,为了使FO值测定准确，应选择灵敏 度高，重现性好，精密度为0.1的热电 偶，并对热电偶进行校验。灭菌时将热 电偶的探针置于被灭菌物品的内部，经 灭菌器与柜外的温度记录仪相连，对灭 菌工艺及灭菌器进行验证，要求灭菌器 内热分布

22、均匀一致，重现性好。,为了确保灭菌效果，还应注意两个问题： 由式FO D121 (lgN0 lg106 ) 知：No越大， 即被灭菌物中微生物越多，则灭菌时间越长，故尽 可能减少各工序中微生物对药品的污染，分装好的 药品应尽快灭菌，以使初始微生物数在最低水平， 最好使每个容器的含菌量控制在10以下； 应适当考虑增加安全系数，一般实际操作增加 50%。,五、灭菌方案的制定 1.选择参比微生物 常用的参比微生物： 1）湿热灭菌为嗜热脂肪芽胞杆菌； 2）干热灭菌为枯草芽胞杆菌 或大肠杆菌内毒素； 3）环氧乙烷灭菌为枯草芽胞杆菌黑色变种芽胞（B.subtilis var niger spores）。,

23、2.测定D值和Z值 选择了参比微生物后，考虑到外界条件能够影 响参比微生物的对抗性，因此应在类似产品灭菌条 件下测定D值。然后计算Z值。,3.确定IF值 确定IF值前应了解被灭菌物品污染 微生物的数量、种类和确定最大可接受 的无菌度概率。污染的微生物愈多，选 择IF应愈大，才能保证灭菌效果。,第二节 注射剂,一、注射剂的定义 注射剂(Injection) 俗称针剂，系指药物 制成的供注入机体内的一种制剂。包括灭菌 或无菌溶液、乳状液和混悬液以及供临用前 配成溶液或混悬液的无菌粉末。,二、注射剂的分类,1.溶液型注射剂 对于易溶于水（或油）而且在水（或油）溶 液中稳定的药物，则制成溶液型注射剂，

24、如氯化钠 注射液，葡萄糖注射液、二巯丙醇注射液等。 2.混悬型注射剂 水难溶性药物或注射后要求延长药效作用的药 物，可制成水或油的混悬液，如醋酸可的松注射 液、喜树碱静脉注射液。这类注射剂一般仅供肌内 注射。,3.乳剂型注射剂 水不溶性液体药物，根据医疗需要可以制成乳 剂型注射剂，例如胶丁钙注射液和静脉营养脂肪乳 注射剂等。 4.注射用无菌粉末 注射用无菌粉剂亦称粉针，是指采用无菌操作 法或冻干技术制成的注射用无菌粉末或块状制剂， 制剂需用用适当的溶剂溶解或使其混悬而应用。例 如遇水不稳定的药物青霉素，-糜蛋白酶等的粉针 剂。,三、注射剂的给药途径,1.皮内注射intradermal (ID)

25、 route 皮内注射系注于表皮和真皮之间，一次 注射量在0.2ml以下，常用于过敏性试验或疾 病诊断，如青霉素皮试液和结核菌素稀释液 等。,2.皮下注射subcutaneous (SC) route 注射于真皮和肌内之间的松软组织内， 注射剂量通常为12ml，皮下注射剂主要是 水溶液，药物吸收速度稍慢。由于人体皮下 感觉比肌肉敏感；故具有刺激性的药物混悬 液一般不作皮下注射。 3.肌内注射intramuscular (IM) route 注射肌肉组织中，一次剂量一般在5ml以 下，除水溶液外，油溶液、混悬液、乳浊液 均可作肌内注射。,4.静脉注射intravenous (IV) route

26、静脉注射分静脉推注和静脉滴注，前者 用量小，一般550ml，后者用量大，多至 数千ml。静脉注射药效最快，常作急救、补 充体液和供营养之用，多为水溶液。平均直 径1m的乳浊液，可作静脉注射。油溶液 和一般混悬型注射液不能作静脉注射。凡能 导致红血球溶解或使蛋白质沉淀的药物，均 不宜静脉给药。,5.脊椎腔注射vertebro caval route 由于神经组织比较敏感，脊髓液循环较 慢，渗透压的紊乱，能很快引起头痛和呕 吐，所以脊椎腔注射产品质量应严格控制， 其渗透压必须与脊椎液相等，注射体积在 10ml以下，pH值在5.08.0之间，注入的速 度应缓慢。,6.动脉内注射（intra-arte

27、rial route) 注入靶区动脉末端，如诊断用动脉造影 剂、肝动脉栓塞剂等。 7.其他 包括心内注射、关节内注射、滑膜腔注 射、穴位注射以及鞘内注射等。,四、注射剂的特点,1. 药效迅速，作用可靠 药剂直接注入人体组织或血管，所以吸 收快，作用迅速。特别是静脉注射，不需经 过吸收阶段，适用于抢救危重病人之用。注 射剂由于不经过胃肠道，故不受消化液及食 物的影响，作用可靠，易于控制。,2.适用于不能口服给药的患者 如不能吞咽或昏迷的患者，可以注射给药。 3. 适用于不宜口服的药物 某些药物由于本身的性质不易被胃肠道吸收， 或具有刺激性，或易被消化酶破坏等，可制成注射 剂应用。如青霉素或胰岛素

28、可被消化液破坏，链霉 素口服不易吸收。所以这些药物只能作成注射剂， 才能发挥它应有的疗效。,4.发挥局部定位作用 局部麻醉药可以产生局部定位作用，如 牙科和麻醉科用的局麻药等。 5.注射给药不方便且注射时疼痛 6.制造过程复杂，生产费用较大，价格 较 高。,五、注射剂的质量要求,1.无菌 注射剂成品中不应含有任何活的微生物和芽 孢。不管用什么方法制备，都必须达到药典无菌检 查的要求。 (2) 无热原 无热原是注射剂的重要质量指标，特别是用大 量的，供静脉注射及脊椎腔注射的药物制剂，均需 进行热原检查，合格后方能使用。,3.澄明度 注射溶液要在规定条件下检查，不得有肉眼 可见的混浊或异物。鉴于微

29、粒引入人体所造成的危 害，目前对澄明度的要求更严。 4.安全性 注射剂不能引起对组织刺激或发生毒性反应， 特别是非水溶剂及一些附加剂，必须经过必要的动 物实验，确保使用安全。,5.渗透压 注射剂要有一定的渗透压，其渗透压要求与血 浆的渗透压相等或接近。供静脉注射的大剂量注射 剂还应具有等张性。 6.pH 注射剂的pH要求与血液相等或接近，血液 pH7.4，注射剂一般控制在49的范围内。,7. 稳定性 注射剂多系水溶液，而且从制造到使用需要经 过一段时间，所以稳定性问题比其它剂型突出，故 要求注射剂具有必要的物理稳定性和化学稳定性， 确保产品在贮存期内安全有效。 8.降压物质 有些注射液，如复方

30、氨基酸注射液，其降压物 质必须符合规定，以保证用药安全。,六、注射剂的处方组成,注射液用原料 注射用溶剂 注射用附加剂 注射剂的等渗与等张调节,（一）注射用原料,必须符合药典或国家质量药品质量标准。 为防止不同批号间的质量差异，正式生产之前需做小样试制，各项检验合格后可大批生产。,（二）注射用溶剂,包括： 注射用水、 注射用油、 其他注射用非水溶剂。,制药用水包括纯化水、注射用水与灭菌注射用水。 纯化水用原水经蒸馏法、离子交换法、反渗透法或其它适宜的制得的供药用的水，可作为配制普通药物制剂的溶剂或试验用水，不得用于注射剂的配制。 注射用水为纯化水经蒸馏所得的蒸馏水，作为配制注射剂用的溶剂。 灭

31、菌注射用水为灭菌后的注射用水，主要用于注射用灭菌粉末的溶剂或注射液的稀释剂。,1.注射用水,注射用水的质量要求,注射用水的质量要求在药典中有严格规定。 一般蒸馏水的检查项目： 酸碱度、氯化物、硫酸盐、钙盐、铵盐、二氧化 碳、易氧化物、不挥发物及重金属等均应符合规 定。 pH为5.07.0，氨含量 不超过0.00002%. 还必须通过热原检查。 制备后12h内使用。,2.注射用油,注射用油的质量要求药典也有明确规定: 注射用油应无异臭，无酸败味； 色泽不得深于黄色6号标准比色液； 在10时应保持澄明。 碘值为79128； 皂化值为185200； 酸值不大于0.56 。,碘值说明油中不饱和键的多少

32、，碘值高，则不饱和键多，油易氧化酸败 ，不适合注射用。 皂化值表示油中游离脂肪酸和结合成酯的脂肪酸的总量多少，可看出油的种类和纯度。 酸值说明油中游离脂肪酸的多少，酸值高质量差，也可以看出酸败的程度。 考虑到油脂氧化过程中，有生成过氧化物的可能性，故最好对注射用油中的过氧化物加以控制。,植物油是由各种脂肪酸的甘油酯所组成。在贮存时与空气、光线接触，时间较长往往发生复杂的化学变化，产生特异的刺激性臭味，称为酸败， 酸败的油脂产生低分子分解产物如醛类、酮类和脂肪酸。这样的油，就不可能符合上述注射用油的标准。 矿物油和碳氢化合物不能被机体吸收，故不能被注射用。 注射用油应贮于避光密闭洁净容器中，避免

33、日光、空气接触，还可考虑加入没食子酸丙酯、生育酚等抗氧剂。,3.其他注射用溶剂,1）乙醇 本品与水、甘油、挥发油等可任意混合。 毒性：对小白鼠的LD50静脉注射为1.973g/kg，皮下注射为8.285g/kg。 采用乙醇为注射用溶剂时浓度可高达50%，如氢化可的松注射液。 可供肌肉或静脉注射，但浓度超过10%肌内注射就有疼痛感。,2）甘油 本品与水或醇可任意混合。由于粘度，刺激性等原因不能单独作为注射用溶剂，利用它对许多药物具有较大溶解性的特点，常与乙醇、丙二醇、水等混合应用。 毒性：对小白鼠的LD50皮下注射为10ml/kg，肌内注射6ml/kg，大白鼠静脉注射LD50为56g/kg。 常

34、用浓度一般为150%。,3）丙二醇 即1, 2-丙二醇，本品与水、乙醇、甘油相混溶，能溶解多种挥发油。 在注射剂中，本品在一般情况下稳定，但高温下(250以上)可被氧化成丙醛、乳酸、丙酮酸及醋酸，丙二醇已广泛用作注射用溶剂，其特点是溶解范围较广。 可供肌内、静脉等给药。采用丙二醇为溶剂的有安定注射液。 毒性：小鼠腹腔注射的LD50为9.7g/kg，皮下注射LD50为18.5g/kg，静脉注射LD50为58g/kg。 常用浓度为1%50%。,4）二甲基乙酰胺(Dimethylacetamide, DMA) 本品为澄明的中性液体，能与水、乙醇任意混合，如足叶噻吩苷注射液含有二甲基乙酰胺。 毒性：对

35、小白鼠腹腔注射LD50为3.266g/kg，但连续使用时，应注意其慢性毒性。 常用浓度0.01%。,（三）注射剂的附加剂,为了提高注射剂的有效性、安全性与稳定性，注射剂中除主药外还可添加其它物质，这些物质统称为“附加剂”。 附加剂在注射液中的主要作用： （1）增加药物的理化稳定性 （2）增加主药的溶解度 （3）抑制微生物生长，尤其对多剂量注 射剂更要注意 （4）减轻疼痛或对组织的刺激性。,增溶剂、湿润剂或乳化剂： 附加剂浓度范围(%) 聚氧乙烯蓖麻油 165 聚山梨酯20 0.01 聚山梨酯40 0.05 聚山梨酯80(吐温80) 0.044.0 聚维酮 0.21.0 聚乙二醇-40蓖麻油 7

36、.011.5 卵磷脂 0.52.0 脱氧胆酸钠 0.21 普郎尼克F-68 0.2,缓冲剂： 用量 醋酸，醋酸钠 0.22, 0.8 枸橼酸，枸橼酸钠 0.5, 4.0 乳酸 0.1 酒石酸，酒石酸钠 0.65, 1.2 磷酸氢二钠，磷酸二氢钠 1.7, 0.71 碳酸氢钠，碳酸钠 0.005, 0.06,助悬剂： 用量 明胶 2.0 甲基纤维素 0.031.05 羧甲基纤维素钠 0.050.75 果胶 0.2,螯合剂： 用量 EDTA2Na 0.010.05 抗氧剂： 用量 亚硫酸钠 0.10.2 亚硫酸氢钠 0.10.2 焦亚硫酸钠 0.10.2 硫代硫酸钠 0.1,抑菌剂： 用量 苯甲醇

37、 12 对羟基苯甲酸丁酯、甲酯 0.010.015 苯酚 0.250.5 三氯叔丁醇 0.250.5 硫柳汞 0.0010.01,稳定剂： 肌酐 0.50.8 甘氨酸 1.52.25 菸酰胺 1.252.5 辛酸钠 0.4,（四）注射剂的等渗与等张调节,等渗溶液（isoosmotic solution）：与血浆渗透压相等的溶液。 等张溶液（isototlic solution）：渗透压与红细胞膜张力相等的溶液。,调节渗透压的方法,冰点降低数据法 氯化钠等渗当量法,W =,0.52 - a,b,氯化钠等渗当量系指与1g药物呈等渗的氯化钠质量。,七、热原,热原(Pyrogens)是微生物的代谢产物

38、。大多数细菌都能产生，致热能力最强的是革兰氏阴性杆菌所产生的热原。霉菌甚至病毒也能产生热原。 含有热原的输液注入人体，大约半小时以后，就使人体发冷、寒战、体温升高、身痛、出汗、恶心呕吐等不良反应，有时体温可升至40，严重者出现昏迷、虚脱，甚至有生命危险。 热原反应的温度变化曲线，因热原种类不同而有差异。,一般先经过一个短的潜伏期后，温度略微上升，然后又略微下降，接着又很快上升，并出现一个高峰， 根据这种现象而导致一个假设：即细菌性热原本身不引起发热反应。但热原使多型核白细胞(polymorphonucler leucocyte)及其他细胞释放一种内源性热原(endogenous pyrogen

39、)， 虽然有人提出内源性热原可能是蛋白质或脂蛋白(lipoprotein)组成，但其确切组成尚未肯完，它作用于视丘下部体温调节中枢，可能引起5-羟色胺的升高而导致发热，热原的致热量因菌种而异，由于注射途径不同，引起发热反应的程度也有差异。,（一）热原的组成,热原是微生物的一种内毒素，它存在于细菌的细胞膜和固体膜之间。 内毒素是由磷脂、脂多糖和蛋白质所组成的复合物，其中脂多糖(lipopolysaccharide)是内毒素的主要成分，具有特别强的热原活性，因而大致可以认为内毒素=热原=脂多糖。 脂多糖的化学组成因菌种不同而异，从大肠杆菌分出来的脂多糖中有68%69%的糖(葡萄糖、半乳糖、庚糖、氨

40、基葡萄糖、鼠李糖等)，1213%的类脂化合物，7%的有机磷和其它一些成分。 热原的分子量一般为10105左右。,（二） 热原的性质,1.耐热性 一般说来，热原在60加热1小时不受影 响，100也不会发生热解，在18034小 时，2503045分钟或6501分钟可使热 原彻底破坏。 虽然已经发现某些热原具有热不稳定 性，但在通常注射剂灭菌的条件下，往往不 足以使热原破坏，这点必须引起注意。,2. 滤过性 热原体积小，约在15nm之间，故一 般滤器均可通过。即使微孔滤膜，也不能截留。 3.水溶性 热原能溶于水。 4.不挥发性 热原本身不挥发，但在蒸馏时，往往 可随水蒸汽雾滴带入蒸馏水，故应设法防止

41、。 5.其它 热原能被强酸、强碱破坏，也能被强氧化 剂如高锰酸钾或过氧化氢所钝化，超声波也能破坏 热原。,（四） 热原的除去方法,1.高温法 对于注射用的针筒或其他玻璃器皿，在洗涤干 燥后，于250加热30分钟以上，可以破坏热原； 2.酸碱法 玻璃容器、用具还可用重铬酸钾硫酸清洁液或 稀氢氧化钠处理，可将热原破坏； 3.吸附法 活性炭对热原有较强的吸附作用，同时有助滤 脱色作用，所以在注射剂中使用较广。常用量为 0.1%0.5%。也可用活性炭与白陶土合用除去热 原；,4.离子交换法 国内有用#301弱碱性阴离子交换树脂10%与 #122弱酸性阳离子交换树脂8%成功地除去丙种胎 盘球蛋白注射液中

42、的热原； 5.凝胶滤过法 用二乙氨基乙基葡聚糖凝胶（分子筛）制备无 热原去离子水； 6.反渗透法 通过三醋酸纤维膜除去热原是近几年发展起来 有实用价值的新方法。超滤法也能除去热原。,（五）污染热原的途径,1.从溶剂中带入 这是注射剂出现热原的主要原因。蒸馏器结构 不合理，操作不当，注射用水贮藏时间过长都会污 染热原。故应使用新鲜注射用水，最好随蒸随用； 2.从原料中带入 容易滋长微生物的药物，如葡萄糖因贮存年久 包装损坏常致污染热原。用生物方法制造的药品如 右旋糖酐、水解蛋白或抗生素等常因致热物质未除 尽而引起发热反应；,3. 从容器、用具、管道和装置等带入 在生产中对所用容器用具等物要认真处

43、理，合 格后方能使用； 4.制备过程中的污染 制备过程中，由于室内卫生条件差，操作时间 长，装置不密闭，均增加污染细菌的机会，而可能 产生热原； 5.从输液器带入 有时输液本身不含热原，但仍发现热原反应。 这往往是由于输液器具如输液吊瓶、胶皮管等污染 所致。,第三节 注射剂的制备,一、注射剂车间的设计与生产管理,注射剂生产车间按生产工艺及产品质量要求可分一般生 产区、控制区、洁净区。 一般生产区指无空气洁净度要求的生产或辅助房间。 控制区指对空气洁净度或菌落数有一定要求的生产或辅 助房间，一般定为10万级或10万级。 洁净区指有较高洁净度或菌落数要求的生产房间。一般 规定为1万级或100级。

44、控制区要求温度1828，相对湿度50%65%。 洁净区要求温度1824，相对湿度45%65%。亮 度不应低于300Lx，噪声不得超过80分贝。,室内墙壁要平直，无缝隙，无死角，无颗粒性物质脱落，内墙饰面材料可用环氧树脂漆，天棚呈弧形，易清洗，易消毒。 室内电气线路，抽气管道应全部嵌人夹墙内，墙壁与天棚及地板连接处，亦应砌成弧形，便于刷洗。 地板可用水磨石或环氧树脂涂面，光滑、平整、耐腐蚀。 100级洁净室不宜设置地漏。要求较高的洁净室采用空调，不设计窗户。 门要求光滑，关闭严密。 开启方向朝洁净度高的房间，门框应无门槛。,二、注射剂的容器和处理方法,(一) 注射剂容器种类和式样 注射剂的容器是

45、由硬质中性玻璃制成的安瓿或其它式 样的容器如青霉素广口小瓶、输液瓶等。 安瓿的式样目前采用有颈安瓿与粉末安瓿两种。其容积 通常为1、2、5、10、20ml等几种规格。 粉末安瓿系供分装注射用粉末或结晶性药物之用。故瓶的口颈粗或带喇叭口，便于将药物装入，这种瓶的瓶身与颈同粗，在颈与身的连接处吹有沟槽，以便临用时锯开，灌入溶剂溶解后注射。 目前国内规定用易折安瓿，即在安瓿上有一环或刻痕，此种安瓿又叫刻痕色点曲颈易折安瓿。,（二）安瓿的质量要求与注射剂稳定性的关系,若玻璃容器含有过多的游离碱将增高注射的pH值，。 玻璃容器若不耐水腐蚀，则在盛装注射用水有时产生“脱片”现象。 不耐碱或不耐侵蚀的容器，

46、在装入磺胺嘧啶钠等碱性较大的或枸椽酸钠、碳酸氢钠、乳酸钠、氯化钙等钙钠盐类的注射液时往往灭菌后或长期贮存时发生“小白点”、“脱片”甚至产生混浊现象。,如耐热性能差则在熔封或加热灭菌后往往发生爆 裂、漏气等现象。 玻璃安瓿的清洁度不良，特别是粘着于瓶壁的麻 点或玻屑等不易洗净，而在灌封及热压灭菌后往 往脱落而成废品。 外形规格差别大的安瓿，不利于机械自动化生 产，如颈丝粗细相差过大，在灌封机上灌封时就 会产生玻屑或封口不严产生毛细孔或出现爆头现 象。,（三）对安瓿玻璃容器的要求,1.安瓿玻璃应无色透明，以便于检查澄明度、杂质以及变质情况； 2.应具有低的膨胀系数，以耐受洗涤和灭菌过程中所产生的热

47、冲击，使在生产过程中不易冷爆破裂； 3.要有足够的物理强度以耐受当热压灭菌时所产生较高的压力差，并避免在生产、装运和保存过程中所造成的破损； 4.应具有高度的化学稳定性，不改变溶液的pH， 不易被注射液所侵蚀； 5.熔点较低，易于熔封； 6.不得有气泡、麻点及砂粒。,目前制造安瓿根据它们的组成可分：中性玻璃、含钡 玻璃与含锆玻璃三种。 中性玻璃是低硼硅酸盐玻璃，化学稳定性较好，作为 pH接近中性或弱酸性注射剂的容器，如各种输液、葡 萄糖注射液、注射用水等可以中性玻璃安瓿。 含钡玻璃的耐碱性能好，可作碱性较强注射剂的容器， 如磺胺嘧啶钠注射液（pH1010.5）。 含锆玻璃系含少量氧化锆的中性玻

48、璃，具有更高的化学 稳定性，耐酸、耐碱性均好，不易受药液侵蚀，此种玻璃 安瓿可用于盛装如乳酸钠、碘化钠、磺胺嘧啶钠、酒石酸 锑钾等注射液。除玻璃组成外，安瓿的制法、贮藏、退火 等技术条件，也在一定程度上影响安瓿的质量。,（四）安瓿的检查,物理检查： 主要检查安瓿外观、尺寸、应力、清洁度、热 稳定性等，具体要求及检查方法，可参照中华人民 共和国国家标准（安瓿）。 化学检查： 玻璃容器的耐酸性、耐碱性检查和中性检查， 可按有关规定的方法进行。 装药试验： 必要时特别当安瓿材料变更时，理化性能检查 虽合格，尚需作装药试验，证明无影响方能应用。,（五)）安瓿的切割与圆口,手工切割适于小量生产，采用安瓿

49、切割板，按规定长度调好砂石和档板之间的距离，采用半拉半揿动作折断瓶颈。 圆口系利用强烈火焰喷烘颈口截面，使熔融光滑。 圆口完毕后拍出安瓿内的玻屑，贮存时不得重压。,（六）安瓿的洗涤,安瓿可先灌瓶蒸煮，进行热处理。一般使用离 子交换水，质量较差的安瓿须用0.5%的醋酸水溶 液，灌满后，以10030分钟热处理。此项操作在 灭菌器内或热处理连动机内进行。蒸瓶的目的是使 瓶内灰尘和附着的砂粒等杂质经加热浸泡后落入水 中，容易洗涤干净，同时也是一种化学处理，让玻 璃表面的硅酸盐水解，微量的游离碱和金属离子溶 解，使安瓿的化学稳定性提高。 安瓿的洗涤方法一般有甩水洗涤法和加压喷射 气水洗涤法两种。,（七）

50、安瓿的干燥或灭菌,安瓿洗涤后，一般要在烘箱内用120140温 度干燥。盛装无菌操作或低温灭菌的安瓿则须用 180干热灭菌一个半小时。大量生产，现多采用 隧道式烘箱，采用适当的辐射原件组成的远红外干 燥装置，温度可达250350，一般350经5分 钟，能达到安瓿灭菌的目的。经过350的高温， 很快就完成了干热灭菌，而且安瓿极为洁净。灭菌 好的空安瓿存放柜应有净化空气保护，安瓿存放时 间不应超过24小时。,三、注射液的配制与滤过 （一）注射液的配制 1. 原辅料的质量要求与投料计算 供注射用的原料药，必须符合中国药典 2000年版所规定的各项杂质检查与含量限度。 医疗上确实需要，必须将普通药用原料

51、进行精 制，使之符合注射原料标准，并经有关部门批准后 方可使用。 活性炭要使用针剂用炭。,在配制前，应先将原料按处方规定计算 其用量，如果注射剂在灭菌后含量有下降 时，应酌情增加投料量。 在称量计算时，如原料含有结晶水应注 意换算，在计算处方时应将附加剂的用量一 起算出，然后分别准确称量。称量时应两人 核对。,2. 配制用具的选择与处理,大量生产用夹层配液锅，同时应装配轻便式搅拌器，夹层锅可以通蒸汽加热也可通冷水冷却。 可用不锈钢配液缸，搪瓷桶等容器。 调配器具使用前，要用洗涤剂或硫酸清洁液处理洗净。 临用前用新鲜注射用水荡洗或灭菌后备用。每次配液后，一定要立即刷洗干净，玻璃容器可加入少量硫酸

52、清洁液或75%乙醇放置，以免长菌，用时再依法洗净。,3. 配制方法,配液方式有两种，一种是将原料加入所需的溶 剂中一次配成所需的浓度即所谓稀配法，原料质量 好的可用此法。 另外还有全部原料药物加入部分溶剂中配成浓 溶液，加热过滤，必要时也可冷藏后再滤过，然后 稀释至所需浓度，此法叫浓配法，溶解度小的杂质 在浓配时可以滤过除去。 配制所用注射用水其贮存时间不得超过12小 时。,对于不易滤清的药液可加0.1%0.3%的活性炭或通过铺有炭层的布氏漏斗； 但使用活性炭时要注意其对药物的吸附作用，特别对小剂量药物如生物碱盐等的吸附，要通过加炭前后药物含量的变化，确定能否使用； 活性炭在酸性溶液中吸附作用

53、较强，在碱性溶液中有时出现“胶溶”或脱吸附作用，反使溶液中的杂质增加，故活性炭最好用酸处理并活化后使用。,配制油性注射液一般先将注射用油在15016012小时灭菌，冷却后进行配制。,（二） 滤器的种类与选择,1.垂熔玻璃滤器 这种滤器系用硬质中性玻璃细粉烧结而成。 通常有垂熔玻璃漏斗，垂熔玻璃滤球和垂熔玻璃滤棒三种。根据滤板孔径大小制成16号。 垂熔玻璃滤器在注射剂生产中常作精滤或膜滤器前的预滤。 型号的选择：3号多用于常压滤过，4号可用于减压或加压滤过，6号作无菌滤过。,2.微孔滤膜,常用醋酸纤维膜、硝酸纤维膜、醋酸纤维与硝 酸纤维混合酯膜、聚碳酸酯膜等。 1）微孔滤膜的性能测定：通常主要测

54、定孔径大小 及分布、流速等。 孔径大小测定一般用气泡法，每种滤膜都有特定的气泡点，它是滤膜孔隙度额定值的函数，是推动空气通过被液体饱和的膜滤器所需的压力。 在未达此压力以前，滤孔仍滞留着液体，当压力不断增加达到克服滤膜上较大孔中液体的表面张力时，则滤液就从孔中排出，使气泡出来，这个压力值就是气泡点。通过实验测定气泡点，可以算出薄膜孔径的大小。,测试方法：将微孔滤膜湿润后装在过滤器中，并在滤膜上覆盖一层水，从滤过器下端通入氮气。当压力升高至一定值，滤膜上面水层中开始有连续气泡逸出时，此压力值即为该滤膜气泡点。 流速的测定；常在一定压力下，以一定面积的滤膜滤过一定体积的水求得。 此外对于用于除菌滤

55、过的滤膜，还应测定其截留细菌的能力。,2）微孔滤膜的物理化学性质 纤维素混合酯滤膜(商品名叫MF-Millipore)在干热125以下在空气中是稳定的，在125以上就逐渐分解，故在121热压灭菌，滤膜不受影响。 聚四氟乙烯膜在260的高温，也不受影响。 纤维素酯滤膜适用于药物的水溶液、稀酸和稀碱、脂肪族和芳香族碳氢化合物或非极性液体。它不适用于酮类、酯类、乙醚-乙醇混合溶液，也不适用于强酸和强碱。 聚四氟乙烯滤膜，强酸强碱及各种有机溶剂对它均无影响。,（三）滤过装置,高位静压滤过装置,加压滤过装置：,减压滤过装置,减压滤过装置,加压滤过装置,四、注射液的灌封,（一）手工灌封,（二）机械灌封,移

56、动齿档送安瓿； 灌注针头下降； 灌注药液入安瓿； 灌注针头上升后安瓿离开同时灌注器吸入药液。 四个动作顺序进行，而且必须协调，这主要通过主轴上的侧凸轮和灌注凸轮来实现的。,（三）通气问题,常用的有氮气和二氧化碳。高纯度的氮可不经 处理，纯度差的氮气可先通过缓冲瓶，然后经硫 酸、碱性焦性没食子酸、1%的高锰酸钾溶液处 理。 二氧化碳可用装有浓硫酸、硫酸铜溶液、1% 的高锰酸钾溶液与50%甘油溶液的洗气瓶处理。通 气时安瓿先通气，再灌注药液，,纯度差的氮气,缓冲瓶,硫酸,碱性焦性没食子酸,1%的高锰酸钾,安瓿,二氧化碳,浓硫酸,硫酸铜溶液,1%的高锰酸钾溶液,50%甘油溶液,安瓿,五、注射剂的灭菌

57、和检漏,（一） 注射剂的灭菌 对热不稳定的产品，在避菌条件较好的情况下生产的注射剂，一般15ml安瓿可用流通蒸气灭菌10030分钟，1020ml安瓿使用10045分钟。 灭菌时间还可根据情况延长或缩短。要求按灭菌效果F0值大于8进行验证。 注射剂从配制到灭菌，必须在规定时间内完成(一般12小时)。 凡能耐热的产品，宜采用11530分钟灭菌。,（二）检漏 检漏一般应用一种灭菌检漏两用灭菌器。灭菌完毕后，稍开锅 门，从进水管，放进冷水淋洗安瓿使温度降低，然后关紧锅门并抽 气，灭菌器内压力逐渐降低。如有漏气安瓿，则安瓿内空气也被抽 出。当真空度达到85.390.6kPa(640680mmHg)后，停止抽气 将颜料溶液吸入灭菌锅中至盖过安瓿后，然后关闭色水阀，放 开气阀，再将色水抽回贮器中，开启锅门，将注射剂车架推 出，淋洗后检查，剔去带色的漏气安瓿。也可在灭菌后，趁热 立即于灭菌锅内放入颜色水，安瓿遇冷内部压力收缩，颜色水 即从漏气的毛细孔进入而被检出。,六、注射剂的质量检查,（一）澄明度检查 取供试品，在黑色背景、20W照明荧光灯光源 下，用目检视，应符合关于澄明度检查判断标准 的规定。 国内生产的BY-1型澄明