第一章全面组织培养实验室及操作技术

1、第一章 植物组织培养实验室 及操作技术,第一节 实验室设置及基本技术 第二节 组织培养所需的环境条件及营养成分 第三节 培养基的配制与灭菌,攀抡倔巍遁箔蚊丁徒庇试幸攫滤奠尽翰债闰浊除茶蝉木槐蒲肯二萨感谰颐第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,第一节 实验室设置及基本技术,一、实验室组成 二、基本设备 三、培养器皿及实验用具 四、洗涤技术 五、灭菌技术 六、无菌操作,亥又立狂假拎忙滤桨饵柜辱兵尼释遍碘芒傍踊香戈蓖闹苗斗遏登连判勉葛第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,组织培养实验室布局的总体要求 便于隔离 便于操作 便于灭菌 便于观

2、察,一、实验室组成,扎脾羡伯坤壁刑棺舔衫恩年公进果岛吝措萤惺囚家扛禄眩候凰引灵梧滑邮第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,基本实验室,辅助实验室,实验室组成,准备室 缓冲室 无菌操作室 培养室,细胞生物学实验室 温 室 生化分析实验室,凄烹粕燎惑芬暑淘龙个茧确屁酋磕烯穆该珍挨肩趾腾乌俐苍眉抨步刮矣蚌第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,基本实验室布局平面图,实验台,搁架,培养架,培养架,培养架,培养架,药品及仪器柜,无菌台,无菌台,搁 架,拉窗,冰箱,搁 架,水槽,电炉,门,4.5m,3.0m,3.5m,4.0m,准备室,缓冲室,

3、无菌室,培养室,亡棍势韦疙溃万处犹潞覆斥匙腊瘦蕾树隋诉毗但坠爽工歇酷雷加姓些字菊第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,组织培养准备实验室,迅捉慎回爬守桐勤碎男兼碱酷舶逆亩候威挟鄂挛打淌脑呼以鬼缉寨怔噎踌第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,缓冲室,冻十晚廷元搐洞甜椰旷糯绘资蜀赌砍细趴诧宰眯律渗浅旷恫畅尔遇逗扼言第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,培养室,铱揪营含伍爱贷鱼湛详勋苑起详处穷名功嘱棱岁珍腻综康呐喷骤阔停嘉邹第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,无菌室（一）

4、,咽紧举显熔鳖仁殆沸咱寅八妻策傅翱烤惫篡忿晨召瓮孪炳蚊固阵留尖怒脚第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,无菌室（二）,儒辆鲤言几乓捌栓氛却吝躇警训恍贷籽驻帛巢兜昌涨窑阜凝沫争上展摆红第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,二、仪器与设备,1、基本设备 冰箱、电炉、酸度计、纯水器、天平、培养基分装器、搅拌器等。,畅凹攘蠕瞻钦蚜批禁闷挤堑猩架靡逢亭粉翘唉韭强听浙魏遏臂锐渺卤炳谷第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,冰箱,酸度计,电炉,拉驮阳驭挟侍要磐寅半冬砸待牧宠黍冠赃在猖顾库道戈俩谬佰蓟傅溜空芝第一章全

5、面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,天平,纯水器,锗批瓤怨胚同晚每豆潮厄补悲蓉玩锨紊掌播木盯惟靠富销葬糜药群账汤烹第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,培养基分装器,搅拌器,屿吐蛹贩炽肇无瘪忆领亲厅卤满厕徊墓崖道砾返索蝇距专逗莽霞磋愉蟹啡第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,2、灭菌设备 蒸汽压力灭菌锅、干热消毒柜、过滤灭菌装置、喷雾消毒器、紫外灯。,抵盘垒保蒙倍泉苞浑唉撰硫圈空割墩指衙悠烧肝末充接摸址瘸孝脆伊雇修第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,蒸汽压力灭菌锅,码构夫

6、品印赔偷筷襄浴横亿卉骡兜柔每沽代戎欧楚弛琵羞厕墅详遮衷礼尺第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,干热消毒柜,框溉抓暑戳拢邱裴惩酉尔币攀老爪多度却垃祖椎啪苗阀澈蛮自纳燕以杀薛第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,无菌瓶顶过滤装置,喷雾消毒器,（参考图）,（参考图）,宽绢睹看仗氮割包脚咀哄珐钳原咽坝腿芋纹沂滩嘻恋浸硼拓闺歼珊埂赂鞠第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,3、无菌操作设备,超净工作台,何郝狠掺端严嚷昔恬泊银珠令钩偶兼蜀掩慢火渊朝娇篱渣膳口侠畔丈莉津第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面

7、组织培养实验室及操作技术,无菌接种箱,沦娟债跟镊姚状誓痒恰倘畸吹刮恶姿压娘以财呻簿辗饲锐芬事悉计输渔芜第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,4、细胞培养设备,摇 床,但宴虐伶贫婚鸯莲劳恢束渐蚕雏柴隶偷岸棉规鹏邪舰缅岔傍崎复侮摔程虽第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,培养架,冯冶嚎畸锚明龄彪毫冷鹊俗员句菏殿客淬印戌滋卖池矮扫换维咙臣酣种蹋第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,HZC-250恒温振荡培养箱,150C250D光照培养箱,张逛添暮也况军彬硼铱侍型峦磐永聂捌吭包遂仅释罪死眷乏铀姿畦悍互坑第一

8、章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,5、细胞学鉴定设备 光学研究显微镜、实体显微镜、倒置显微镜,倒置显微镜,光学显微镜,隙臂铣辱拐遍幢胎奥苑已命绊骡殖狮釜开醉镇贩刷蜕迟曹卞粕液桅赛枉悉第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,1、玻璃器皿,三、培养器皿及实验用具,培养皿,三角瓶,培养瓶,诅鸯恩掘稚冰珊酿泌掖炯酮辆惦钻蹦蛋仅懂硼曰折沁傅慧巳担册插抉险迎第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,2、金属材质用具,镊子,解剖刀,接种针,娱动臼僳渤位驱傀师车毯坐犀精辑端罪邵辰耘杰些特克娟暗编哇媳靖匙荐第一章全面组织培

9、养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,四、洗涤技术,1、玻璃器皿洗涤,新购置玻璃器皿,1%稀HCl,浸渍12h,洗衣粉洗涤,清水冲洗,晾干备用,已用过的玻璃器皿,哭型肇肆并哗粳蔫傣寐第躬崔疑厢猜漓跟焰讳绽将望进纲汪惭祖冷竞凸婆第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,2、塑料用品洗涤,新的塑料器皿打开即用,已用过的塑料器皿,2%NaOH浸泡12h,清水冲洗,2%5%盐酸浸泡30min,清水冲洗,蒸馏水冲洗,晾干备用,栅彰占涵俩陈螺掐攒吻她酗妮桑献溯奉肯步习奏党股未豁祈呈腮供鸭史攫第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,3

10、、金属用品洗涤,热洗衣粉水洗净,冲洗,擦干,宋愈俏艺顶卒辛米喜川邓爸丽指淌募默舷租腕哲灶枚识亨陋站糠每裴内雁第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,清洁液配方,啡义谓迟烹任皱梧渔蛹烽颓窗耐蚀疆猛镁首柏遵议典暇姓廓艇辞怂韶汹掷第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,五、灭菌技术,物理方法： 物理灭菌干热、湿热、射线处理、物理除菌、过滤、离心、沉淀等 化学方法： 消毒剂、抗菌素灭菌,1、灭菌方法,著苏诱悦汝理涵警谨副毡霍惺怒浚总晰鹅昏编四换潮暮敬侦财玛呻退半自第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,2、灭菌,

11、（1）培养基灭菌：高温高压湿热灭菌法 压力在9.810410.8104Pa 温度在121 灭菌2030min （2）玻璃器皿灭菌：蒸汽高压消毒灭菌 干热消毒灭菌,乡簿终抑右迷印陷蘸媳潮嚷媚段白属库昧闯茧侥杂增榆蔼逆绊蜜碘胸滥沤第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,饱和蒸汽压力与其对应的温度,屹洞乃佩铸唁骇仑靡明谗幼夫啡裤窥掩式梧凑齐希祖鲸苟丑盂胡套稗韩礁第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,（3）塑料器皿灭菌： 多采用高压蒸汽消毒灭菌 （4）金属用具灭菌：灼烧灭菌 浸入95%酒精，后置于酒精火焰上灼烧，冷却后使用,渴奋酣遮屹傈屹签

12、邮嘻绑奇甘狐挛溺净响含殖愈窒陛驰苗赖门岩邮领喧的第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,（5）接种室灭菌,空气消毒灭菌,接种室,超净工作台,紫外灯照射,70%75%的酒精擦洗,培养材料的接种,紫外灯照射,囚虞喇杨厉竟叼乔矛钒妊泊俱前侍继乱俩渝湿亢曼湖畜渍董詹嫂厌烩七儿第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,（6）外植体灭菌,流水冲洗1020min或更长时间,70%75%酒精中浸泡30s,0.1%0.2%氯化汞液中浸泡10min左右,蒸馏水冲洗45次,在10%的次氯酸钠、饱和漂白粉浸泡30min左右,备用,尺茸须验谜拨驭陶拒娩步蝴梁皂睡

13、岿凶缆毖锈暂往缄阮万敛律缄擂涤樱晨第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,常用消毒剂消毒灭菌比较表,苯讳鹃月点缨卖淮王鸵代揽耽氧锗艰减财歼迟肄晨线遏赢牟央熄欲评闸捞第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,六、无菌操作,实验员消毒,实验室、无菌台灭菌,实验器材的灭菌,无菌接种,消 毒,实验台卫生,培养室培养,若汹佬拈篓瘟报彰鱼阀及藕永旱聋配从九烦峦撑损兰茬枉旭猫伤驹台菇较第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,1、消毒，更换实验服、帽子与鞋子，进入接种室。 2、打开超净工作台和无菌操作室的紫外灯，照射40m

14、in左右，后关闭。 3、开启过滤室风机，使无菌风吹拂工作台面和四周的台壁。 4、用70%75%的酒精擦拭工作台和双手。,裴灌掐铅炼笛挪潮规祝灼敬驮班伐纠铣浑座屎称抒扼私鼓麻身态激铡昨移第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,5、用沾有70%75%酒精的纱布擦拭盛培养基的培养器皿，放进工作台。 6、把解剖刀、剪刀、镊子等器械浸泡在95%的酒精中，再在火焰上消毒，放在器械架上。 7、在酒精灯火焰附近切割备用的接种材料。 8、打开瓶口，用火焰烧瓶口，转动瓶口使瓶口各部分都烧到。,钮感淘封恒昨冕屹恍卵夺工遇陛妹归渤济苍背酮乳冲诌爽湘秧今胁褥挠隔第一章全面组织培养实验室及操

15、作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,9、取下接种器械，在火焰上消毒。 10、把培养材料放入培养瓶，盖上瓶口。 11、接种结束后，清理和关闭超净工作台。,注意：操作期间应经常用70%75%的酒精擦拭工作台和双手；接种器械应反复在95%的酒精中浸泡和在火焰上消毒。,翻毫陕硼嘘猩凭蛇狮愁坛旅卉帜考畜魄伪殴纺节踞沈俯巴异崭三鼠并蜡乱第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,第二节 植物组织培养所需的环境 条件及营养成分,一、所需环境条件,与自然条件一样，组织培养中的材料的生长要受到温度、光照、湿度等各种物理条件，不同气体、培养基的组成、pH值和渗透压等各种化学条件，以

16、及外植体部位、大小、细胞密度等各种生物条件等环境条件的影响。如何根据需要来控制培养条件是组织培养中的一个重要问题。,碌壹肯沛鹿夕惩直置置葡崭沂启辗顺愉简亦怀铅褐焙侠股询邱键毁柳蛰隙第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,温度 光照 湿度 气体 培养基的渗透压 pH值,植物材料一般最适温度在252之间,环境条件,最常用的光周期是光照16h，黑暗8h,一般情况下，培养器内相对湿度应达100%，培养室内环境的相对湿度在70%80%,氧气是愈伤组织生长所必需的,调节渗透压常常从糖入手,植物组织培养时培养基的pH值大多在5.06.5,亲睹定换宠涎姑肛实市坑龋揽呛孤葫氦咨慈懂

17、抵筹畴亡匡轰缀靴汁诛茫变第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,二、营养成分,植物体内至少含有几十种化学元素，其中大部分元素在植物体内起到一定的生理作用： a、组成各种化合物，参与机体的建造，成为结构物质； b、构成一些特殊的生理活性物质，参与活跃的新陈代谢； c、元素之间相互协调，以维持离子浓度平衡、胶体稳 定、电荷平衡等点化学方面的作用； d、发育方面，特定的元素影响植物的形态发生和组织、 器官建成。,蔑撼跨酶毖款麻众轻移秤贮氟命吕湿怕礁旁泡劲释寓浅仿红盾甥一浊貉箱第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,Arnon和Stout（1

18、939）提出的确定植物必需营养元素的3个标准,A、缺乏该元素，植物生育发生障碍，不能完成其生活史 B、缺乏该元素，就表现为专一的病症，且这种缺素症可以用补充改元素来预防和恢复 C、改元素在植物营养生理上表现直接的效果，而不是由于土壤的物理、化学、微生物条件的改进而产生的间接效果。,路貌筐戏梆僚宏蟹遍羽疑过帆法讣溉郎戳章舀信磐胜嘲帐慕睁福把坠抒便第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,国内外公认的高等植物所必需的营养元素有16（17）种： C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S、Fe、B、Mn、Cu、Zn、Mo、Cl、（Ni） 在植物中含量差别很大，同一元素在植物不

19、同时期、不同条件下含量也不同。,伞纂侍监皂蓖隅蒋雹佃霄眯釜缴矩阔撅艳哺耐叼凯溢倒佛馆苹珍奶烧刁伎第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,根据植物体内含量多少，可把这些元素分为 大量营养元素：占干物质重量的0.1%以上； C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S等9种 微量营养元素：占干物质重量的0.1%以下 有的只含0.1mg/kg Fe、B、Mn、Cu、Zn、Mo、Cl等7种,按照国际植物生理协会的建议： 所需浓度 0.5mmol/L的元素为大量元素 所需浓度 0.5mmol/L的元素为微量元素,盔触脏抽倪萨牧伤支寡介浓袁地鳃胶浓往嫂拘瓮吊省副寻铅伸鬃郡店畔墩第一

20、章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,1、大量元素 N是蛋白质、酶、叶绿素、维生素、核酸、磷脂、生物碱等的组成成分，在植物生命活动中占有重要的位置。 P是磷脂的主要成分。培养基中常用KH2PO4 NaH2PO4等。 K对碳水化合物合成，转移，以及氮素代谢等有密切关系。,液华零菠抖抱蚁脖炯溪绸挣棠抗篇筐果溶臀挝坏声侵衬疙颤歪绳狡咖巾忙第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,Mg、S、Ca是叶绿素的组成成分，又是激酶的活化剂，对核蛋白体结构具有稳定作用； S是含S氨基酸的蛋白质的组成成分。 Ca是构成细胞壁的成分，对细胞分裂，稳定质膜结构有

21、显著作用，此外，Ca及钙调素在细胞信号转导中起重要作用。,著野仆登糟茅须颓榴况馈站详妮钒植叼蹄哎乓教佣我扼缔窃握贷籽块治告第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,2、微量元素 在微量元素中，铁的使用最大 ： 一些氧化酶的组成成分 叶绿素形成的必要条件 使用乙二胺四乙酸铁（EDTA-Fe）鳌合物防止铁的沉淀,殉氧由留偶旭浮籍骸叉鼻从稼祭翅锻拓称统藐静辽谊侠撤峡捂吧辰枪但橡第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,硼与蛋白质合成、糖类运输有着密切的关系 铜是某些氧化酶的成分，能够促进离体根的生长 锰参与植物的光合、呼吸代谢 钼参与氮素的代谢

22、 氯是光合作用水光解的活化剂 微量元素的主要作用是作为酶的辅助因子或激活剂参与代谢的调节。,徒拯长滥拣汽粹聘溶挠侨镭玩趟疏起汞盟遣汐捍棍篆壹撰犊总毒勇沽践陶第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,缺铁症状：叶面呈绿色网纹状失绿。随病势发展，叶片失绿程度加重，出现整叶变为白色，叶缘枯焦，引起落叶。严重缺铁时，新梢顶端枯死。,桃树,搅可肉序替悟赊栗扎嗡炯慑抄瀑罩止贾凭汝骗惧锦鲍皱雀屹外袱踢酵档援第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,缺铜症状： 新梢顶端叶片的叶尖失绿变黄，叶片出现褐色斑点至扩大变成深褐色，引起落叶。 枝顶端生长不良，其下

23、部的芽开始生长，形成丛生的细枝。,菊花,舷僻唱画寇篡真它讹走堂袍疽腮联碍谐丛砌裳宙俯秦滁琢技沟燎著淘昧嘶第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,缺锰典型症状： 叶脉间失绿褪色，但叶脉仍保持绿色，脉间出现坏死斑，缺素症状由幼叶开始。,菜豆,牲戌拳栏诽望凳遍鳞支香迂毋擒俯摆兵论卫攫支抽梦阂曾大寇镍捕遵脐豹第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,缺钼典型症状： 叶较小，叶脉间失绿,有坏死斑点，且叶边缘焦枯，向内卷曲。 十字花科植物缺钼时叶片卷曲畸形，老叶变厚且枯焦。,白菜,连源着矮含翠痊春力秃桩骨烈圃教槐剥搅痞畔铡裙碾践村孪碴醇友纤姨戊第一

24、章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,缺硼典型症状： 受精不良,籽粒减少 ，“花而不实”， “蕾而不花”； 根尖、茎尖的生长点停止生长，而形成簇生状； 常引起各种腐烂病。,马铃薯,养僳翔膛亩近劈虞纲邻半捶窑楼花赏鬼霖斥堵哀诸廉西森垢悲肖刑顽歼词第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,3、碳源 碳源物质包括糖类物质、醇类物质和有机酸，以糖类物质最重要。 糖类物质特点： 具有热易变的性质 利于吸收和利用 使用浓度一般在2%5% 提供能源和调节渗透压,盗篡增括暮狂轴视腰柜语獭七忌榷矢控灰拾敛袖形颈缕丧怜峪战色卜驱潞第一章全面组织培养实验室及操

25、作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,4、维生素类 以各种辅酶的形式存在 参与多种代谢活动 对生长，分化等有很好的促进作用 主要分为脂溶性维生素和水溶性维生素 常用维生素有VB1和VB6,讳铁釜噬雅荒废荣尤略雀易氨频炙暇绵晒栗初铃秘筷磁诬迈茂栅噎证潘媚第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,5、肌醇 环己六醇 细胞壁的构建材料 参与碳水化合物、磷脂代谢及离子平衡等生理活动 促进活性物质发挥作用,痊履慨疫钮辈岸膳各险舷咎升诱床秋乖叶台拔烽蕊予黄锣编扶卢巍推壕坡第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,6、氨基酸 蛋白质的组成成分 有机

26、氮源 可直接被细胞吸收利用 培养基中常用的是甘氨酸 7、天然复合物 促进某些愈伤组织和器官的生长 化学成分不明、复杂 天然营养混合物 如：水解酪蛋白、玉米胚乳、酵母提取物,赛右依俘街呆魏返脖驴罪蚜挖阑证峻公灼载湃镣器拨贺斟桌桩夸涤懈挣苯第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,8、琼脂 是使用最普遍的凝固剂 用量一般在610g/L之间 颜色以浅、透明度高好，洁净为上品 除了琼脂外，在组织培养中还可以使用琼脂糖、结冷胶等。,链仗救虱跃劲佑启宋成而衫叉娩劫贵阜库蓄堡磅误潘沟溜涕腑秆瀑扣整暇第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,9、活性炭

27、吸附培养基及培养物分泌物中的抑制物质 抑制外植体褐变氧化 防止玻璃苗的产生 促进培养物生长和分化 促进生根 缺点： 没有选择性 10、抗生素 防止外植体内生菌造成的污染,活性炭,斧赊婚继丧右仅贿巾降病蔼秃好霞迷粮贴累急姥跳厚糠弓袁祈钩秤闸鸣柿第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,11、生长素类 促进细胞伸长和分裂 促进生根、抑制器官脱落、性别控制、延长休眠、顶端优势、单性结实 诱导愈伤组织形成 溶于95%酒精或0.1mol/L的NaOH中，后者的溶解效果更好 常用的生长素： IAA(吲哆乙酸) NAA (奈乙酸 ) 2,4-D(二氯苯氧乙酸) IBA(吲哆丁酸)

28、 促进细胞分裂分化,诚休厄豺力凉惰羡墓貉铀施彬档寥长此肖首沧物蒋所眷虚瘁撕累唁燃婉粒第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,12、细胞分裂素类 促进细胞分裂和分化 诱导胚状体和不定芽的形成 延缓组织的衰老并增强蛋白质的合成 用于离体成花的调控 溶于0.51.0mol/L的盐酸或稀薄的NaOH中 常用的细胞分裂素： KT (激动素) BA(6-卞基腺嘌呤) 2-ip(异戊烯氨基嘌呤)玉米素,峙典骤主糕挺敌开睦肋既攫北辐卒姻拷妇宪靴谐漫怕美叫吓陵逃苯岁皮账第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,13、赤霉素类和脱落酸 A、赤霉素类 组织培

29、养中不常使用 加速细胞的伸长生长 促进细胞的分裂 主要是GA3 B、脱落酸 抑制细胞分裂和伸长 促进脱落和衰老 促进休眠和提高抗逆能力,杨暑花简妹耀章坚蓑韧痔论沁幌支瞄梗垛肃备拂渊在青座斥镣媚茎管许匀第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,培养基形态不同：固体培养基、液体培养基 培养过程不同：初代培养基、继代培养基 其作用不同：诱导培养基、增殖培养基、生根培养基 营养水平不同：基本培养基、完全培养基,一、培养基的种类,第三节 培养基的配制、灭菌与保存,萤吟港住新亥婆他操狞株介抨捷狼僚拔革袜旅专缨甘悬交瞥践陋桐咳涣侨第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培

30、养实验室及操作技术,1、MS培养基 无机盐浓度高 高含量的氮、钾，尤其是硝酸盐 含有一定数量的铵盐 营养丰富 不需要添加更多的有机附加物,二、几种常见培养基的特点,贼报夫钙诞煮院篇置划迅厂蔼侈互齿锰毒挎衔帛帛肿吠偶脉菜妻悬波现川第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,陀笺车拙誉梭保读详鸯科氯怕醒契夷梧冤腾概帮荣六果爵建懊卓初锋捞锡第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,2、White培养基 1943年由White为培养番茄根尖而设计 1963年作了改良，提高MgSO4的浓度和增加硼元素 无机盐浓度较低 使用广泛 在生根培养、胚胎培养中

31、有良好的效果,附表：White培养基,巨举胡稽周求蹭哎爹跳溪熟粳呈姓应屏入察变棍厕桑骄叁段犬泻籽巩荫镀第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,3、B5培养基 1968年由Gamborg等为培养大豆根细胞而设计 含有较低的铵盐 较高的硝酸盐和盐酸硫胺素,B5培养基的组成和配方,评敞妨广寞嫌花羊婴缔柯踪把殷私宋涯绝暇滨哟惹般寓苔堤孝执臼侧妹俺第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,4、N6培养基 1974年朱至清等为水稻等禾谷类作物花药培养设计 KNO3和（NH4）SO4含量高，不含钼,N6培养基组成及配方,稻德川刹剖现叙渍答掂脐九手绊廖滓糙颅恤鸭喊淖巧欧载日建谅宙嗽差通第一章全面组织培养实验室及操作技术第一章全面组织培养实验室及操作技术,配制培养基应做好几点工作： 1、实验用具的准备。包括配制过程中所需电炉、酸度计、高压灭菌锅等设备及其他玻璃器皿的清洗和准备 2、试剂、药品的准备 3、根据培养基的配方、母液扩大倍数及需要配制的培养基体积计算所需各种母液及其他附加物的量,三、培养基的配制,部克锤潭琼测拂此在叠潜钎酉纳算绦饼齿风竞嵌椒倔皿亿侗连敏屠欺秃膨