果蔬农药残留快速检测技术#荟萃知识

1、蔬果农药残留快速检测技术，农业部食品质量监督检测中心(石河子)，1，专业精制，食品安全问题的概要，食品安全问题(1)名词意义1食品安全是指食品中不含有可能损害人体健康的有毒、有害物质和要素。 食品安全是食品卫生的重要组成部分。 2所谓食品安全性，是指食品在按原来的用途生产或吃的时候，不会给消费者带来损害的保证。 3所谓食品安全问题，是指食品按原来的方法吃时有可能损害人体健康的物质和要素。 2、专业精制，(2)农产品安全指标农产品安全指标主要包括以下内容： 1、严重危害人体健康的指标，如致病菌、毒素、贝类毒素； 2、农产品污染指标3，包括农药残留、兽药残留、重金属、细菌总数、大肠菌群群等化学和微

2、生物污染指标，农产品渡渡鸟大头针为假，如甲醛、清洁海绵、漂白剂、防腐剂、着色剂等4，转基因产品的安全性。 3、专业提纯；(3)农产品安全问题、目前研究成果表明，农产品安全主要存在以下问题： 1生物毒素生物毒素主要是指生物自然产生的毒素，主要包括(1)贝类毒素种类：麻痹症贝类毒素(PSP )拉肚子性贝类毒素； (DSP )特征：由于加热不易破坏，其危害性相当大。 4、专业提纯、PSP存在： PSP存在于五洲四海中，并在罗布星空卫视和蟹类中发现了PSP毒素。 临床症状：该毒素可引起神经系统疾病，包括发抖、兴奋、嘴唇皮肉之苦和麻木感，严重时可引起呼吸系统麻木，是领便当，致命毒素。 DSP的存在：在加

3、拿大、亚洲、新吉兰特、欧洲等贝类生物中发现了DSP。 临床症状： PSP毒素可引起轻微的胃肠道疾病，但不是致命毒素。 5、专业提纯；(2)又称真菌毒素、真菌毒素，是某些真菌的代谢产物，目前发现的真菌毒素有十多种，如黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、博来霉素等常见产毒真菌为黄曲霉、青霉、长霉。 (注意：霉菌菌株不一定存在真菌毒素。 真菌毒素不一定表面能观察到发霉现象，两者之间不存在必然的因果关系)、6、专业精制、真菌存在于许多农产品中，真菌毒素直接或间接进入食物链会使动植物食品受到毒素污染。 在许多真菌毒素中，黄曲霉毒素是众所周知的最危险的毒素之一，是强致癌物质。 这是化学结构类似的物质，现已鉴定了B1、

4、B2、G1、G2、M1、M2、P1、q、H1、GM、B2a和毒醇的1.2种类。 其中B1毒性最强。 7、专业纯化，2转基因农产品的安全性，转基因农产品的含义是：农产品中是否含有转基因生物成分，利用转基因植物或动物或微生物生产的农产品，转基因食品对人类无毒无副作用尚未得到证实，转基因产品和非转基因产品“实质上同等目前世界上比较一致的见解是，生物科技产品(转基因产品)对人类健康和生态环境存在潜在的危险。8、专业精制、3化学物质危害、化学物质危害主要包括5个方面：化学肥料我国是世界上化学肥料施用量最大的国家。 氮肥(纯n )年用量在2500万吨以上，单位面积施用量是世界平均水平的3倍。 肥料施用不当

5、，滥用化学肥料生产的蔬菜对人体健康的威胁不亚于蔬菜上残留的农药。 硝酸盐本身对人体无害，但在土壤、人的口腔和胃中转化成亚硝酸盐，会对人体造成危害。9、专业提纯、亚硝酸盐危害主要表现在两个方面： a :大量富集可能引起中毒，长期摄入，可能引起消化系统癌变，如胃肿瘤、大肠癌等B :NO3- NO2-胺类化合物亚硝胺(高致癌原)重金属对镉、汞、 危害铬对人体具有蓄积性，半寿期长，可引起急性或慢性毒性反应，可引起畸形、致癌、突然变异的潜在危害。 危害的高低依次为镉、汞、金属铅、砷、铬。 目前，我国儿童金属铅污染比较严重。1.0、专业提纯、农药残留危害，我国是世界农药施用量最大的国家，年施用量超过130

6、万吨，单位面积施用量是世界平均水平的2倍。 我国与欧美等发达国家相比，农药的生产使用有很大差异。 主要是高毒性农药的使用量多，具体为a :农药的使用以杀虫剂为主，占总使用量的68%的b :杀虫剂中有机磷农药占了70%以上。 我国每年都发生农药中毒事件，蔬菜有机磷农药中毒尤为突出。 水果、蔬菜的有机磷农药被人体吸收，通过血液输送到人体的器官，损害器官。 中毒表现：汗、肌肉颤抖、心率增加、瞳孔缩小等. 1.1、专业精制、添加剂主要在：中添加着色剂、着色剂、脱色剂、防腐剂等，表现苯甲酸、山梨酸、亚硝酸盐、亚硫酸盐等。 也有无知和非法混入。 例如：甲醛、苏丹红、吊床、清洁海绵等。 兽药残馀兽药残馀是指

7、动物产品可食部分中含有的兽药母体化合物和/或其代谢产物、兽药相关杂质的残馀。1.2、专业精制、兽药残留类型： 1、原料药； 2 .动物体内药物的代谢产物3 .药物或者其代谢产物和内因性高分子的共价键物质。 药物残留是家畜和鱼的养殖过程中用于防治的抗生素、磺胺类等化学药剂，它们往往使药物残留在食品动物组织中。 剩下的药通过食物进入体内。 1.3、专业提纯、动物性食品中的药物残留对人体健康的影响一直是诸多问题。 一般认为，在先、药物残留会增加人体药剂耐受力和药剂耐受力细菌个体群的增加，增加潜在的安全问题。 但是，最近的研究表明，有效的抗生素是致癌物质，人体吃多了会引起细胞球癌。 使兽药无效：盐酸克

8、罗托洛、利多巴胺。 二农产品的质量安全相对性、1.4、专业提纯、二农产品的相对性、无论是否为人所知，任何农产品中都或多或少存在对人类健康有害的物质，绝对安全的农产品是云同步，农产品中含有的有害物质含量较少，在正常范围内不会对人体健康造成危害一方面人类能做的是认识农产品中的有害物质的研究，另一方面尽量减少或者清除农产品中的有害物质，吃安全的农产品。1.5、专业纯化、三农产品质量安全快速检测方法的特征和分类；(1)农产品质量安全快速检测的特征农产品快速检测，理想的方法是在做好购买试剂的准备后，从试剂的配置，包括样品的处理时间在内，在几分钟或十几分钟内得到检测结果，但这种方法还很少。 我们所说的快速

9、检查是一种相对概念，是一种比普通检查和传统方法缩短1/2或1/3时间得到检查结果的方法，被认为是一种快速的方法。1.6、专业提纯、快速检测主要从3个方面体现： 1实验准备简单，使用试剂少，2样品处理简单后可检测，或者采用先进快速的样品处理方法，提高样品处理效率。 3简单、快速、准确的分析方法可以在短时间内检测出处理后的样本的结果。、1.7、专业提纯、(二)农产品质量安全快速检测方法分类、农产品质量安全快速检测技术从上世纪5.0年代开始，经过5.0年以上的发展，尤其是经过2.0年以上的快速发展，检测技术已涵盖农产品安全各方面，快速检测方法已达到百种以上。 根据不同的指标，这些个的方法可以分为不同

10、的种类。 目前主要有以下分类方法：从现场快速检测实验室快速检测、1.8、专业纯化2定性定量：从定性快速检测(现场多)半定量快速检测(现场多)定量快速检测3检测原理：生物测定法-发光细菌或易感性家蝇分子生物学法生化法有机磷农药快速测定法， 瓦斯气体光谱法、1.9、专业提纯四.农产品质量安全快速检测技术的发展现状(一)农产品质量安全快速检测技术的发展现状(二)中国农产品质量安全快速检测技术的发展现状农产品质量安全快速检测方法的研究受到各国政府的高度重视，成为当前研究的热门课题之一。 成熟水果、蔬菜农药残留检测方法主要有以下几个方面1化学法。 该方法是以气体色谱法为代表的经典分析方法。 特点：灵敏度

11、高、准确、可定量测定大部分农药残留，但测定时间长、成本高、操作复杂，不适于市场抽查监督管理。2.0、专业纯化、2种生物测定法以发光细菌或易感性家蝇为测定材料的分子生物学法采用免疫应答如酶催化剂免疫应答，特异性酶催化剂免疫试剂盒的生物化学测定法利用胆碱酯酶抑制原理，仅限于可抑制胆碱酯酶活性的农药。2.1、专业提纯、目前在我国成型的农药残留快速测定法1农药残留试纸法(农药速测卡法、酶催化剂试剂法或STRIP法) 2酶催化剂片法(农药速测卡法) 3农药残留分光光度法(抑制率法) 4酶催化剂免疫试剂盒法-分子生物学法5有机磷农药速测法、2.2、专业提纯、蔬果农药残留快速测定技术酶催化剂活性是指酶催化剂

12、常态，适合物质合成和分解的条件PH8温度3738， 存在2.3、丙精制、2乙酰胆碱酯酶酶促反应促进、酶催化剂基质(硫代胆碱能系统)硫胆碱冰乙酸乙酰胆碱酯酶拟除虫菊酯类等农药酶活性受到抑制的酶显色剂基质分解产物黄色溶液、24、丙精制3有机磷或氨基甲酸酯系农药的酶反应， 能够抑制乙酰胆碱酯酶有机磷或氨基甲酸酯系农药酶活力，显色剂酶催化剂无分解物无色溶液基质显色剂(硫胆碱能系统)少量分解物鹅黄色溶液活性得到抑制， 含有有机磷或氨基甲酸酯类农药基质的丁基胆碱酯酶样品活性不正常含有有机磷或氨基甲酸酯类农药，2.5，专门提纯4 .在某些条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率

13、与农药浓度呈正相关， 正常情况下，酶催化剂催化神经传导代谢产物(胆碱能系统)的水解作用，其水解作用产物与显色剂反应产生黄色物质，用分光光度计在412nm处测定吸光率的时间变化值，根据算出抑制率的抑制率，可以判断样品中是否含有高用量的有机磷和氨基甲酸类农药。 2.6，专业精制，二检验范围和灵敏度，一检验对象蔬菜：叶菜、蔬菜、豆菜、瓜菜等(胡萝卜、韭菜、葱、大蒜、茯苓白、蘑菇等除外)水果：苹果、梨、桃、草莓等。、2.7、专业提纯、2农药范围、农药：A :有机磷类甲胺磷、硫磷、氧化乐果、甲氧苄啶、久效磷、敌恐怖、甲氧苄啶等(灵敏度0.5-5mg/kg的甲硫磷、磺胺硫磷、甲基硫磷、毒死蜱、乐果等b :

14、氨基甲酸酯类：克百威、阿尔及尔、减多威、丙硫氯韦、丁硫氯韦(0.2-2.5mg/kg )。2.8、专业精制、三种试剂的配制和保存、1 .专用酶催化剂(乙酰胆碱酯酶)的配制：酶催化剂时，请用缓冲液溶解。酶液的活性请保存在A00.3以上。 粉状的酶催化剂(密封)在储藏于冷冻室时用提取液溶解，溶解的酶液分为24个瓶，暂时储藏于冷冻室，使用时解冻，使用后的酶液储藏于冷藏室(05)，4天以内用完，酶液最多不能重复解冻2次。 不这样做会影响酶催化剂，2.9，专业精制，2 .基质(硫胆碱能系统)的制备：取出基质25mg，加入蒸馏水3.0mL溶解，摇匀保存到冰箱中。 储存期间在两周以下。 保存：固体(密封)和

15、溶解的基质必须保存在冷冻库的冷冻室中。 溶解后，长时间不使用时，储存在冷冻库的冷冻室中，使用时解冻。 分别取160mg显色剂和15.6mg碳酸水素纳金属钍，用缓冲液20mL溶解。 保存：固体和溶解的显色剂请保存在冷冻库的冷藏室(3-5)中。 思考问题：为什么用缓冲液配置显色剂？ 3.1、专业纯化、4 .萃取剂(PH8.0缓冲液)的制备：分别提取磷酸氢二钾元素11.9g和磷酸二氢二钾元素3.2g，用蒸馏水1000溶解。 保存：固体和溶解后的提取试剂可在常温下保存。 思考问题：为什么用缓冲液作为萃取剂？3.2、专业纯化、四取样要求、叶菜：用进样器随机采集不同株叶。 果菜和水果类：采用进样器沿果菜表

16、面取约1厘米厚的样品。选择3.3、专业精制、五检验工艺、1、代表性样品，将表面泥浆洗掉，切成1cm见方的东鳞西爪，取1g样品，装入萃取瓶中，5mL缓冲液，振动12min，倒入提取液，静置35min，待机. 2，对照溶液试验：为试管进一步加入酶液0.1mL、显色剂0.1mL振荡后，放置3.7成分以上(样品的每批的控制时间必须一致)。 加入0.1mL基质开始振荡后，测定液立即发生显色反应，记录3min内的吸光率变化A0. 3，样品溶液测定：在试管之前加入样品提取液2.5mL，其他操作与对照相同，反应3min的吸光率变化值At .不记录3.4 6检验结果计算式、Ao- At抑制率() 100% Ao

17、 Ao:为基质反应3分钟后和3分钟前的吸光值之差At :试样基质反应3分钟后和3分钟前的吸光值之差、3.5、专业精制、7检验结果判定，1 .检验结果判定结果为酶催化剂被抑制的程度(抑制率)，蔬菜试样提取液对酶催化剂的抑制率阳性结果的样品需要反复检查2次以上。 对于阳性结果的样品，可以通过其他方法进一步确定具体的农药品种和含量。 3.6、专业精制、2检定结果表明，检定结果中有时抑制率为负。 抑制率为负的抑制率超过100，只要抑制率在-10%和110之间，都是正常的情况下，根据测定结果的要求进行判定。 抑制率超过这个范围的话，表示操作错误，需要再次检查。、3.7、专业提纯、八、酶催化剂抑制率法对农药某些检测