中药血清药理学研究方法应用现状

1、中药饮片血清药理学研究方法应用现状【摘要】近年来，中药饮片血清药理学研究取得可喜成果，随着中药饮片血清药理学存在问题的逐步解决，方法的进一步成熟和完善，其将得到更广泛应用： (1)具有复合药物评价、直接、快速、敏感、准确作用等特点；(2)复合处方药物的反应历程研究； 血清药理学是研究复合处方药物反应历程的主要方法之一，随着化学分析手段的不断完善，复合处方药物中有效成分逐渐被确认，其药理学反应历程也有所暴露；(3)痴呆等慢性病和微生物学、分子生物学、药理学和生理学、免疫学等学科的研究。【牛鼻子词】血清药理学研究方法综述中药饮片血清药理学是研究中药饮片近年来发展中药效的较科学方法。 这是日本学者田

2、代真一于1988年首次提出的，这种方法是将动物给与中药饮片或复合制剂后，在一定时间内采集血液，分离血清进行体外药效实验。 1990年姜廷良教授1将其引入我国，随后国内许多学者和专门人才进行了大量的研究，取得了可喜的成绩，积累了一定的经验，为深入研究中药饮片的作用机制和物质基础奠定了基础。 我国已将其列入国家自然科学基金资助范围2，现就其研究应用现状作一综述。1中药饮片血清药理学方法在中国的应用现状1.1中药饮片解热作用的研究杨奎等？ 4 )研究了含有黄芩、樟脑香、强活胜湿汤和九味强活汤的血清对于单核细胞内DNA合成、Ca2内流的影响，发现了含有黄芩的血清可以明显抑制单核细胞内DNA合成，抑制C

3、a2内流，从而阻止内生热原的合成。 但是，含有轻樟脑香、强活胜湿汤和九味强活汤的血清对于单核细胞的合成的抑制作用顺次增强，含有香薷的血清呈现出明显的量的效果增加性抑制作用，而含有强活胜湿汤和九味强活汤的血清在大量给药时同时呈现出促进作用。 在对单核细胞内流的影响方面，香薷的作用比九味强活汤弱，但均呈量效增加性抑制作用，强活胜湿汤与之相反，由于在大量给药时反转为促进Ca2内流的作用的时效关系，九味羌活丸之内流的抑制作用在给药后90分钟达到顶峰，对DNA合成的抑制作用没有给药本实验采用中药饮片血清药理学方法进行中药饮片时效关系研究，表明其具有较大优势。1.2中药饮片的抗肿瘤作用研究杨振宁5等研究发

4、现，包括髓清丸在内的接触剂量组和高剂量组血清生细胞球百分率均低于对照组，OD值明显低于对照组，中剂量组和高剂量组细胞球毒活性均大于20%，高剂量血清组G1期DNA含量明显低于对照组，中髓清丸具有抑制HEL细胞球增殖、诱导HEL细胞的分化、凋亡的作用。 张建军等6的研究表明，富硒绿茶药物血清能抑制人肝癌细胞球株生长，抑制爱沙尼亚克朗，减少AFP和。 GT的合成和分泌细胞促进ALB的合成，且呈一定的浓度、时间依赖性，对人肝癌细胞球株的恶性显性性状有逆转作用，可以诱导癌细胞向正常方向分化。 王力宏7等采用中药饮片血清药理学方法观察了含苦参、仙鹤的血清及其饮片对肿瘤细胞球体外生长的影响，并发现除含仙鹤

5、的血清外，其佗能明显抑制S180细胞球的生长。 苦参对肿瘤细胞球的体外生长有细胞球毒作用，但含仙鹤草血清及其饮片出现了不同的实验结果，可能与中药饮片粗颗粒制剂的干扰因子或动物体内代谢过程和血清影响有关。1.3关于呼吸系统作用的研究小柴胡汤：小柴胡汤浓缩液添加到细胞球培养化学基后具有有丝分裂作用，但在小柴胡汤血清中却不具有这种作用。 小柴胡汤的有丝分裂作用可能由胃肠道不能吸收的大分子物质引起，也可能由有效成分经消化道或肝脏代谢损伤引起。 小青龙汤：黄坚8等研究表明，小青龙汤饮片的天竺鼠血清，具有明显的抗组织胺作用，对离体天竺鼠气管平滑肌有收缩作用，并且呈良好的量效关系，与饮片直接进行的离体药理实

6、验相似。1.4对心血管系统的作用研究邱幸生等9实验表明，益气通络低、中、高剂量含药血清处理组心肌细胞球bcl。 2阳性表达比例均明显高于单纯氧亏损再氧给药组(H-R组)，是否提示bcl？ 2有保护心肌细胞球的作用。 隋10等观察了灌胃给药红花提取物家兔含药血清对天竺鼠离体心脏的作用，灌胃给药红花提取物5、10、20g-1后，含药血清均使天竺鼠离体心脏冠脉产水量增加、心率增加、心率降低。 灌胃60分钟后采集的血清指纹图谱出现新峰。 陈长勋等人采用中药饮片血清药理学方法观察附子对离体天竺鼠左心房收缩力的影响，结果表明：口服附子粗颗粒制剂的动物血清与未服用的动物血清相比，具有明显增强心肌收缩力、加快

7、心肌收缩速度的作用，服用后2h血清作用达到高峰，附子强心有效成分张群豪12等研究表明，血府逐瘀饮片浓缩液和含药血清对实验性动脉粥样硬化家兔主动脉平滑肌细胞(SMC )增殖具有抑制作用，呈药物依赖性，饮片浓缩液作用比含药血清强，空白血清无此作用，本实验为血府逐瘀临床应用提供科学依据。1.5对免疫功能影响作用的研究梁春敏13等研究表明，玉屏风散试验血清在灌胃后30 min至2h内增殖到小鼠脾淋巴细胞，小鼠IL？ 2产生均有明显的促进作用，其中1h作用最强，1h对小鼠免疫功能有显着的增强作用。 曾南14等观察了给予雪莲虫草精大鼠的抗凝血血对NK细胞活力的影响。 结果表明，给药抗凝血能明显增强NK细胞

8、活力，动物血清1.25g/kg接触剂量组增强il2活性，而7.5g/kg接触剂量组作用不明显，3.75g/kg接触剂量组表现出抑制作用，这可能与血清稀释度和内含物有关。1.6中药饮片抑菌作用研究杨奎15等人应用中药饮片血清药理学方法对中药饮片进行了体外抑菌实验，发现轻樟香正气液和含黄芪血清各有明显的抑菌作用，抑菌率在70%以上。 本研究表明，在含有中药饮片的血清中也有促进细菌繁殖作用的云同步中，中药饮片复方、单味中药饮片均可出现多个抗菌峰，中药饮片抗菌成分复杂，其吸收峰时间不一致，有利于抑制细菌繁殖。 这说明中药饮片血清药理学能够用于检测或反映中药饮片副作用。1.7中药饮片的抗炎作用研究研究了

9、中药饮片赤芍、黄连、牡丹皮、生姜、黄精、黄芩对花生四烯酸油脂生物转化的影响，发现含有黄连、赤芍的血清可抑制花生四烯酸油脂的生物转化，其饮片没有此作用。 与此相对，生姜、牡丹皮、黄芩、黄精饮片具有抑制作用，含有该药的血清无效。1.8关于骨骼系统作用的研究韩立民16等人用淫羊藿给大鼠连续灌胃和肌肉注射7天，最后灌90分钟后，股动脉无菌采血进行灭活，并进行了成骨细胞(OB )培养。 研究表明，黄鼠狼服用后大鼠血清碱磷酸酯酶活性增高，细胞球内蛋白质含量增高，成骨细胞数量增多，培养基中钙元素含量明显降低，剂量与作用呈正相关，是抗骨质疏松症的理想药物之一。 任光友17等人采用血清药理学方法，将不同浓度的老

10、年大鼠羊青合剂(YLM )血清加入新生大鼠颅骨成骨细胞球培养液中，来发现其中含高剂量组羊青合剂(YLM )的血清对成骨细胞球的增殖率、成骨细胞球ALP活性、成骨细胞球边界网关协议分泌细胞1.9关于神经中枢作用的研究李翠屏等18用Daniel法建立了神经元细胞缺氧凋亡模型，加益气通络方药物血清，碘丙嗪采染色法用流式细胞仪测定神经元细胞的凋亡率，分光光度法测定MDA、NO浓度，免疫组织化法测定bcl2表达，研究表明， 益气通络法抑制缺氧导致神经元细胞凋亡，减少神经元细胞的聂伟19等采用血清药理学方法观察了含有六味地黄汤(LW )及其活性成分(CA4，CA4-3 )的药物血清对原代培养胚胎大鼠海马组

11、织神经元的保护作用。 结果表明，含LW及CA4、CA4-3药物的血清均可在一定程度上提高海马组织神经元的成活率，且与稳定线粒体膜电位及其神经保护作用密切相关。 其作用机制需要进一步深入研究。 阿尔茨海默病患者中枢能量缺乏、神经元数减少及其腺粒体功能故障密切相关，提示该方法可用于阿尔茨海默病的研究。1.10消化系统系统作用的研究刘成海20等研究表明，含有扶正化郁方的血清能明显抑制肝贮脂细胞球增殖，与药物接触剂量和血清浓度呈正相关，并且对贮脂细胞球内外胶原也有一定的抑制作用。 曹宜等人观察CC14、d吗？ GaIN LPS和BCG LPS可诱导小鼠肝损伤青蒿汤醇提物的三氯甲烷、冰乙酸乙基提取部位及

12、剩馀的佝乙醇提取物降低ALT活性，发现青蒿汤醇提物三氯甲烷再提取部位小鼠血清对d。 GaIN诱导大鼠的初代肝细胞ALT活性水平显示出稳定的降低作用。 李平22等研究表明，软肝冲剂药物血清对传代HSC增殖有显着抑制作用，可以显着抑制HSC分泌细胞TGF1，其作用与秋水仙碱相似，可以抑制细胞球DNA合成和有丝分裂，或者抑制PDF1的产生和接纳体表达，阻断其细胞信号，TDF11.11生殖系统作用研究夏名誉薇23等人以50例不孕不育患者为受试者(中药饮片组40例和西药组10例)，采用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM )模型评价女贞育汤的血管生成活性和促进血管生成作用，结果发现中药饮片组和西药组治疗前后卵期、排卵

13、前、经前期血清的比较的研究表明，用傅氏生化汤的水提取浓缩液、水提取醇沉淀物、挥发油、醇提取浓缩液分别灌胃小鼠，在一定时间内取其血清灭活后，用各给药组灭活的胃内给药血清给药试验液，结果水提取醇沉淀物促进子宫收缩2中药饮片血清药理学研究方法的优势及存在的问题2.1中药饮片血清药理学研究方法的优势中药饮片血清药理学是在传统体外实验的基础上改进的，即用含药物血清代替中药饮片粗提物进行实验，其最大优点是条件可控性强、药效作用机理深、重现性好、使用材料少、药物在体内环境中产生药效的实际过程等。 其主要优势具体如下： (1)用含药血清培养细胞球可以直接观察中药饮片药物学效果，方便应用细胞学和分子生物学手段，

14、从基因、基因产物、药物接纳体和酶活力等方面阐述了药理机制。 (2)使现代科学技术和传统医学具有可行性，应用现代生命学的技术手段和理论揭示中药饮片复合配伍的本质，有助于推动中药压电石英药的科学技术进步。 (3)便于观察和跟踪药物吸收和代谢过程，消除体外实验各种干扰因素的影响，为更清楚地认识复合处方药物中主要药物的有效成分和活性部位提供药物研发依据。2.2血清药理学研究方法存在的问题中药饮片的血清药理学本身是一种方法学，自其引入我国至今仅有十个三年五载，有不少需要进一步改进： (1)血清学本身是一种方法学，其自身成分的复杂性迄今尚未完全阐明，血清其复杂成分可影响体外实验的结果， 中药饮片的复合成分

15、也是一个体系，两个体系的叠加使原来的复杂体系更加复杂的当前技术手段，不能分析复方血清中的所有单一成分，即不能详细比较分析各单一元素体在复方中所发挥的作用，而在这种无形中中药饮片血清药理学的中药饮片复合处理(2)药物血清制备中，规范动物给药方案和采血时间，建立药物时效关系和量效关系是中药饮片药理研究的热点。 而且实验动物的属种差异或属种的同龄性别差异会引起实验动物对药物的敏感性差异及复合处方药物中不同成分的吸收、转化、作用靶点的差异，因此实验动物的属种和年龄性别选择需要规范。 (3)在体外培养体系中，添加100%浓度的血清是不可能的，并非所有的中药饮片都通过血液起作用，有的直接作用于消化道，有的作用于局部，在血清药理学上难以解决。 (4)辨证论治是中医压电石英诊断疾病的方法和特点，实验医学已有实验与证型相结合的人，而实验学多忽略中医压电石英的内涵，如何结合辨证论治与辨证论治是血清药理学需要解决的问题。3中药饮片血清药理学展望在中药饮片血清药理学的应用、方