需氧和兼性厌氧球菌的鉴定

1、微生物检验，第1、2章，需氧和兼性厌氧球菌的鉴定，返回总目录，第3章，本章内容，第4章，学习目标和要点，学习目标：1。掌握葡萄球菌、链球菌、肠球菌和奈瑟氏球菌的主要生物学特性和微生物学检查，特别是它们的鉴定依据和要点。2.熟悉葡萄球菌、链球菌、肠球菌和奈瑟菌的临床意义。本章的重点是：1 .葡萄球菌、链球菌、肠球菌和奈瑟氏球菌的主要生物学特性和微生物学检验。2.葡萄球菌、链球菌、肠球菌和奈瑟菌的临床意义。5.概述，球菌有很多种，根据革兰氏染色的不同可分为革兰氏阳性。致病性球菌说致病性球菌主要引起化脓性炎症，也可称为化脓性球菌。6.在第一部分，葡萄球菌，葡萄球菌属细菌是一种革兰氏阳性球菌，带有阳性

2、触酶，之所以命名是因为它们经常堆积成葡萄串。广泛分布于自然界，构成人体的正常菌群。它们大多数是非致病性的，少数引起化脓性感染。共有35种17亚种，包括金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌和溶血性葡萄球菌。7.1.生物学特征1。形态和染色这个属的大多数细菌是球形的，直径为0515微米。葡萄球菌没有鞭毛、孢子和荚膜。(1)在液体介质上，它们排列成单链、双链或短链。(2)在固体培养基上，它们排列成葡萄串。(3)在脓液标本中，它们排列成单个分散或很少的葡萄串。第一部分是金黄色葡萄球菌，显微镜下为金黄色葡萄球菌(脓)，纯培养显微镜下为金黄色葡萄球菌。20%的CO2有利于毒素的形成。(1)在液体介质

3、中，它变得均匀混浊。(2)在普通培养皿中，它形成12毫米、圆形、光滑、边缘规则、不透明和有色的菌落。不同的菌株产生不同的脂溶性色素，如：金黄色、白色、柠檬色、金黄色葡萄球菌脂溶性色素9、第一节葡萄球菌、普通琼脂平板上表皮葡萄球菌的白色色素、血平板上表皮葡萄球菌的白色色素2。培养特征，10、第一节葡萄球菌，(3)血平板上的金黄色葡萄球菌和溶血性葡萄球菌，可产生溶血性毒素。其他葡萄球菌没有这种现象。金黄色葡萄球菌菌落在血液板上放置24小时。2.文化特征。11.(4)在高盐甘露醇平板上：大多数葡萄球菌具有很强的耐盐性(在10%氯化钠培养基中生长)。该平板常被用作选择性培养基，细菌能分解甘露醇使指示剂

4、变黄。G-菌在这个平板上不生长，金黄色葡萄球菌在高盐甘露醇平板上是一个淡黄色的菌落。2.培养特征，第一段葡萄球菌，12，第一段葡萄球菌，(5)蛋黄高盐琼脂平板：金黄色葡萄球菌产生卵磷脂酶，其上可在菌落周围形成白色沉淀环。表皮葡萄球菌也能生长，但没有白色沉淀环。2。培养特性，金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌在蛋黄板上的生长，13。第一节葡萄球菌，3。生化反应：葡萄球菌具有很强的生化活性，能分解多种糖、蛋白质和氨基酸，对触酶呈阳性。触酶阳性，阴性对照，发酵葡萄糖，14，第1节葡萄球菌，4。有两种主要类型的细胞壁抗原，15，第1节葡萄球菌，5。分类葡萄球菌可以根据不同的方法进行分类，如基因同源性、色素、

5、生化反应和是否产生凝固酶。6.耐药葡萄球菌是最具耐药性的无芽孢细菌。*根据是否产生凝固酶，凝固酶阳性凝固酶阴性凝固酶，葡萄球菌，16，2，临床意义，第1节葡萄球菌，17，第1节葡萄球菌，18，微生物检验程序，标本，脓液，血液，剩余食物，呕吐物等。直接涂片镜检、革兰氏阳性球菌、分离培养、生长现象等。生化反应：血浆凝固酶、甘露醇、耐热核酸酶、小猫试验、报告、形态学染色：革兰氏阳性球菌、葡萄球菌在1、19、1区。标本：主要是血液、尿液、痰液、脑脊液、穿刺液和浓缩液。3。微生物检验。直接涂片：直接涂片标本或增菌液，革兰氏染色镜检可发现葡萄串排列的革兰氏阳性球菌，并可作出“革兰氏阳性球菌，葡萄串排列，疑

6、似葡萄球菌”的初步报告。第一节葡萄球菌，20，3。血样的富集培养，培养后24小时，每天观察富集液的变化。如果没有变化，需要培养7天，包括盲传2次。如果没有细菌培养，可以报告“培养7天后血液样本无菌生长”。出现混浊、蛋白胨样凝块等。可以进行进一步的分离培养和革兰氏染色。4.分离培养(1)血液平板：351824小时(2)高盐甘露醇平板或高盐蛋黄平板(*葡萄球菌菌落特征综述)，第1部分，葡萄球菌，21，5。生化反应：(1)酶接触试验：阳性。(2)凝固酶试验：玻片法和试管法。葡萄球菌，22，5。生化反应(3)耐热DNA试验，表皮葡萄球菌耐热DNA试验(-)，金黄色葡萄球菌耐热DNA试验()，第1节，葡

7、萄球菌，23，5。生化反应，阳性反应，但阴性反应，Slidex Jusa Plus可以快速识别金黄色葡萄球菌，(4)乳胶凝集试验，该试验不仅可以检测金黄色葡萄球菌凝固酶，还可以检测葡萄球菌A蛋白(SPA)，第一段葡萄球菌，24，第一段葡萄球菌，25，5。生化反应。(6)肠毒素试验：目前，免疫学方法用于快速检测肠毒素，主要是酶联免疫吸附试验。(7)其他鉴定试验：临床常用的商业鉴定系统，如美国石油学会葡萄球菌鉴定试剂盒。(5)甘露醇发酵试验：金黄色葡萄球菌阳性。第1部分，葡萄球菌，26，5。生化反应(8)其他非培养鉴定或检查方法：1)免疫学方法：采用酶联免疫吸附试验或对流免疫电泳检测金黄色葡萄球菌

8、抗体；2)分子生物学方法：用市售Accu探针鉴定培养物，用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析葡萄球菌的质粒和染色体。第一节葡萄球菌，27，6。药物敏感性试验，(1)药物敏感性鉴定试验-新霉素敏感性试验，金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌r，第1节葡萄球菌，28，6。药敏试验，(2)药敏试验(抗菌药物临床选择按CLSI)，第1节葡萄球菌，29、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和非耐甲氧西林金黄色葡萄球菌，第1部分，葡萄球菌，30，7。根据科、属和种的顺序进行鉴定(1)科、微球菌、链球菌和奈瑟氏球菌之间的鉴定，第1节，葡萄球菌，31，7。按科、属、种的顺序进行鉴定，(2)属间鉴定，葡萄球菌与微球菌的鉴定，

9、第1节，葡萄球菌，引起临床感染的五种最常见葡萄球菌的鉴定要点，第1节，葡萄球菌，33，返回第1章内容，第1节，葡萄球菌，34，第2节，链球菌属细菌是一种革兰氏阳性球菌，具有阴性触酶，广泛分布于自然界、人和动物的肠道及健康人的鼻咽部。光镜下链球菌形态学(革兰氏染色)，电镜下链球菌形态学，35，1短菌株由48种细菌组成，旧菌株可达2030种细菌。(2)在固体培养基或脓液标本中，呈短链、成对或单分散排列。1.生物学特征。甲类链球菌，肺炎链球菌，乙类链球菌，第二季度链球菌，36。当链球菌年轻时，可以看到荚膜。当连续培养后荚膜消失时，肺炎链球菌往往呈双重排列，故又称肺炎球菌。在动物体内，它能形成无鞭毛的

10、厚荚膜链球菌、孢子和肺炎链球菌。第2节链球菌，37，2。它对培养特性要求高，在5%CO2环境中生长较好，(1)液体培养基(血清肉汤):沉淀生长(上清液澄清/微混合)，(2)血平板：小菌落，灰色和白色。有-溶血，-溶血和-溶血(非溶血)，-溶血-溶血，链球菌，第2节，38，3。生化活动活跃：触酶阴性，葡萄糖，菊粉，(1)甲组链球菌：杆菌肽S，甲、乙、丁组链球菌杆菌肽试验，甲组杆菌肽S，第四组链球菌：PYR，七叶皂苷，乙组环磷酸腺苷，丁组链球菌七叶皂苷(一)，甲组链球菌七叶皂苷-(二)，思维：环磷酸腺苷原理？链球菌，第2部分，40，3。生化反应，(4)肺炎链球菌：光钦链球菌，胆汁溶解，菊粉，肺炎链

11、球菌光钦链球菌，胆汁溶解(平板法)，胆汁溶解(试管法)，链球菌，第2节，41，4。分类根据以下传统分类如链球菌的溶血特性和兰斯菲尔德血清学，(1)根据培养基上的溶血特性，第二部分为链球菌，42；(2)从抗原结构来看，银链球菌的结构复杂，含有许多抗原，主要包括：(1)银链球菌群中，90%的致病者属于甲群，乙、丙、丁、氟、庚群常感染化脓性疾病。链球菌，第2、43节，(4)溶血、耐药性和生化反应的综合分类，(3)根据链球菌的需氧量，可分为三类：需氧型、厌氧型和微需氧型链球菌，链球菌，第2、44节，临床意义，链球菌，第2、45节，血毒素O:含-SH基团的耐热蛋白分子量低，对氧稳定，由其引起的血片溶血可

12、帮助诊断链球菌感染后的风湿热、肾小球肾炎等链球菌疾病。秒。链球菌，46，秒。链球菌，47，微生物检验程序，标本，血液，尿液，伤口标本，化脓性分泌物等。直接涂片镜检、分离培养、链球菌分组、鉴定、生长现象、溶血类型、生化反应：触酶、PYR、七叶皂苷、菊粉、胆汁裂解物等。形态学染色：革兰氏阳性球菌，药敏试验，报告，血清学试验，抗“O”试验，兰斯菲尔德分组，第2节链球菌3。微生物检验。直接涂片：将标本或富集液直接涂片，革兰氏染色镜检发现呈链状排列的革兰氏阳性球菌，或革兰氏阳性球菌成对排列，细菌周围有透明环，可制成“革兰氏阳性球菌，链状排列，疑似链球菌”；或初步报告“革兰氏阳性球菌成对发现，怀疑是肺炎链

13、球菌”，第二节链球菌，49，3。微生物学检查，3富集培养：以下生长现象有助于区分不同的链球菌，一般细菌培养持续7天，但如无现象，需盲目通过2次亚急性细菌性心内膜炎血液培养4周，每周移植一次平板。如果有生长，移植到血琼脂平板，第2节链球菌，50，4。隔离培养条件：应添加血清、血液和其他营养物质。37天后进行12天的好氧和厌氧培养。观察菌落特征和溶血情况。注：关键点、培养条件、培养基、溶血试验、第一代分离应置于510的CO2环境中，可使用二氧化碳培养箱或烛缸。血盘羊血盘：有助于识别和进一步鉴定其溶血特性。a组链球菌主要产生溶血毒素“s”，但一般来说，链球菌只产生溶血毒素“o”。第2节链球菌，51，

14、5鉴定实验链球菌的鉴定应根据其菌体形态、菌落形态和溶血特性，结合以下鉴定试验进行。(1)与其他革兰氏阳性球菌的鉴别：在检测溶血毒素“O”时，必须降低氧分压，如厌氧培养、倒平板倒放或穿刺接种，使只产生溶血毒素“O”的链球菌也能出现溶血现象。第二节链球菌，52，5鉴定实验，(2)属内鉴定：1)分类(综述)兰斯菲尔德聚类试剂盒，第二节链球菌，53，兰斯菲尔德血清学凝集试验，第二节链球菌，54，肺炎链球菌和D群链球菌被鉴定，其他统称为绿色链球菌。抗原组(甲、乙、丙、庚)由溶血性链球菌鉴定.类别1:b型溶血性链球菌：a、b、c、d、f、g组，ii类链球菌，55，青霉素6.5%NaCL肉汤，d类链球菌S-

15、肠球菌r，类别3:其他草绿色溶血性链球菌，类别2:胆汁正水解的鸟链escin:q组，其他d类，ii类链球菌，56， (3)其他鉴定试验1)链激酶A组2)牛奶亚甲蓝试验粪便链和牛奶链不受抑制3)马尿酸钠水解试验B组4)肺炎链球菌荚膜肿胀试验，抗“O”试验，原理：中和试验方法：间接凝集结果：效价大于400单位含义：风湿热及其活性的辅助诊断，6。 血清学诊断，链球菌在第二季度，57链球菌侵入人体产生SLO，这刺激身体产生相应的抗体ASO。中和后，加入SLO胶乳试剂。由于患者血清中含有大量的抗动脉粥样硬化抗体，未被中和的抗动脉粥样硬化抗体与乳胶试剂反应，产生清晰的凝集反应，为抗“0”试验阳性；无凝集，

16、阴性。7。药敏试验(1)药敏鉴定试验(2)药敏试验，抗“O”试验原理，回章，第2节链球菌，58，第3节肠球菌，肠球菌原属D群链球菌(血清学分类)，1984年从链球菌中分离出来，成为独立的细菌，广泛分布于自然界和人类。过去认为肠球菌对人类无致病作用，但近年来， 研究证实，肠球菌是需氧和兼性厌氧球菌中最重要的医院感染病原体，在尿路感染、腹部感染和菌血症中更常见。 没有孢子，没有胶囊，没有鞭毛。2.培养特性的营养要求高，有些菌株可以在麦康凯板等选择性培养基上生长。它能在高盐(6.5%氯化钠)、碱性(pH9.6)和高胆汁(40%)培养基上生长。可在10和45时生长，培养24小时，肠球菌血片可在物镜下染色。第三节肠球菌，60，1，生物学特性，在血琼脂平板上培养1824小时后，可形成灰白色、圆形、不透明、光滑的菌落，直径为0 . 51.0毫米，不溶血或不溶血，少数出现溶血，但不同于第三节肠球菌，61，3。生化反应涉及