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文档简介
1、邻二氮菲分光光度法测铁,南华大学预防医学与放射卫生实验教学中心,教学对象:高等医学院校卫生检验专业学生 实验课时:6学时 课程类型:专业基础实验课 课程要求:必修 每组人数:2人,实验目的和意义 掌握分光光度法测定铁的原理和技术 熟悉分光光度法的条件控制和测定方案的拟定方法 了解分光光度计的使用方法,实验原理 在 pH 2-9 的溶液中,邻二氮菲能与 Fe2+ 反应生成稳定的配合物。 邻二氮菲 + Fe2+ 邻二氮菲-Fe2+配合物 (无色) (红色) 用分光光度计测定溶液吸光度,根据Beer 定律 A= K c 采用标准曲线法测定铁的含量。,常用测定方法: 直接进样GC法 溶剂解吸GC法 热
2、解吸GC法 PIDGC法,实验内容 1. 标准溶液的配制 2. 吸收光谱的测定和波长选择 3. 溶液吸光度的测定 4. 标准曲线的绘制 5. 样品含量的测定 6. 分析数据处理和结果计算,仪器 723 型分光光度计, 1 cm 比色杯 50 ml 容量瓶, 10 ml, 5 ml,2 ml 吸量管; 试剂 邻二氮菲溶液,醋酸钠溶液, 盐酸溶液, 氢氧化钠溶液, 盐酸羟胺溶液, 铁标准溶液。 (均为分析纯试剂),问题:化学试剂按纯度可分为哪几类?分析化学应使用哪些?,化学纯 (CP蓝色) , 分析纯 (AR红色) 优级纯(CR深绿色 ) 专门用途高纯试剂,如:光谱纯、色谱 纯、电解纯等,测量条件 参比溶液:蒸馏水 波长扫描范围:400-700nm 比色杯厚度:1cm 测量波长:510nm(参考值) 测量速度:快,50ml容量瓶,实验步骤1 溶液配制,提问:除容量瓶之外还可以用什么?,比色杯,实验步骤2-测定吸光度,提问:比色杯有几种类型和型号?,操作步骤3-标准曲线绘制和样品测定,A,c,Ax,cx,标准曲线绘制,样品测定,计算 A = a + b C A 为吸光度 a 为截距 b 为斜率 C 为浓度,注意事项 分光光度计测量前应预热30min。 仪器操作应在教师指导下进行。 手拿比色杯的粗糙面。 本实验的试剂加入顺序
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