高效课堂同步课件：5-1DNA粗提取与鉴定(选修1)

1、课题1DNA的粗提取和鉴定，课程标准本课题在课程中没有明确要求，但这部分与PCR技术及蛋白质提取有关。课程标准解释1。了解DNA分子的理化性质。理解DNA粗提取和识别的原理。掌握DNA粗提取技术。提取1生物大分子的基本想法是使用一定的方法或方法徐璐分离其他生物大分子。2提取DNA的想法：利用DNA和，等性质的差异提取DNA，去除其他成分。提取DNA的方法；物理、化学、物理或化学性质RNA、蛋白质、脂质、物理、化学；3原理(1)DNA和蛋白质等其他成分在浓度不同的溶液中溶解。利用这个特性选择合适的东西，就可以充分溶解DNA，沉淀杂质，反之，达到分离的目的。(2)DNA不能溶解，但细胞中的某些蛋白

2、质能溶解在这个溶液里。(。(3)蛋白质可以水解，但不影响DNA。大部分蛋白质是无法忍受的高温，DNA在胃里变性。洗涤剂可能会瓦解，但对DNA没有影响。NaCl，盐浓度，酒精，蛋白酶，6080，80，细胞膜，4DNA的鉴定条件下，DNA被染色成二苯胺。注意二苯胺试剂。思维激活1曾使用徐璐不同浓度的NaCl溶液提取DNA，质量浓度是从2 mol/L NaCl溶液和0.14 mol/L NaCl溶液中提取滤液，还是需要从过滤固体中提取？表明质量浓度在2 mol/L NaCl溶液中溶解DNA，应采取过滤器，质量浓度在0.14 mol/L NaCl溶液中DNA溶解度很低，容易析出，应采取固体。利用沸水浴

3、、蓝色、现在的活性、1 DNA的溶解特性，将DNA DNA和蛋白质在不同浓度的NaCl溶液中溶解是不同的。DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精。利用这个原理，可以进一步分离DNA和蛋白质。2 .利用酶、高温和洗涤剂的DNA耐受性提取DNA(见下表)。特别是(1)甲基绿可以将DNA染成绿色，不需要加热水箱。二苯胺识别DNA是颜色反应，需要加热5 min才能使DNA变成蓝色。(2)二苯胺试剂目前必须工作。否则，二苯胺会变成浅蓝色，影响识别效果。整合1蛋白酶能水解蛋白质，分离染色质的DNA。以下药物能达到上述目的的是。a蒸馏水BNaCl溶液CNaOH溶液D盐酸分析蛋白酶利用酶的特异性分

4、离DNA和蛋白质，而NaCl溶液利用DNA和蛋白质的溶解性分离。答案B，1实验材料选择用含量较高的生物组织。2细胞破碎，得到含有DNA的滤液(1)动物细胞破碎，以鸡血为例，在鸡血口服液中加入一定量，用玻璃棒混合过滤即可。DNA粗提取实验过程，DNA，蒸馏水，滤液，(2)植物细胞的粉碎，以洋葱为例，将洋葱切碎，加入一定的总和，充分化合，过滤后收集研磨液。3从滤液中去除杂质(1)方案1:以控制浓度去除。(2)情景2:直接添加到过滤器中，能反应10 15毫升，分解添加剂中的蛋白质。(3)方案3:在放过滤器的恒温水浴中，严格控制保温1015毫升，温度范围，使其沉淀，并从蛋白质中分离DNA，防止分子变性

5、。洗涤剂、盐、搅拌、研磨、NaCl溶液、杂质、软肉粉、木瓜蛋白酶、6075、蛋白质、DNA 5DNA的识别，将蚕丝状DNA以5 mL质量浓度溶解在溶液中，然后加入4 mL试剂，加热5 min，观察冷却后溶液的颜色。注意同时安装实验。，酒精溶液，白色丝绸，2mol/L的NaCl，二苯胺，开水，对比，思维激活2用猪的血液和鸡的血液提取DNA，效果更好？出示鸡血。因为鸡血核的DNA含量丰富，材料容易得到，猪的红细胞中没有核的DNA含量少。1选择实验材料在本实验中使用鸡血球作为实验材料有两个原因。一是因为鸡血细胞的核DNA含量丰富，材料容易得到。第二，鸡血球容易吸水，如果将动物间细胞等用作实验材料，往

6、往需要菌长和离心力，对设备的要求高，操作麻烦，需要很长时间。2 DNA提取的具体阶段，(2)核DNA溶解：过滤器的质量浓度为2 mol/L NaCl溶液(3)过滤：去除不溶性杂质，将含有DNA的稠物质析出为滤液(4)。在过滤器中慢慢加入蒸馏水，使用玻璃，停止添加水(本例中，NaCl质量浓度约为0.14 mol/L) (5)过滤：用多层纱布过滤，含有DNA的粘稠物质留在纱布中。(6)DNA的粘性再溶解：溶解在质量浓度为2 mol/L的NaCl溶液(7)中。把含有DNA的滤液(8)过滤到纱布两层，进一步纯化DNA。滤液加上滤液体积等冷却体积分数，达到95%。特别是(1)动植物细胞获得DNA滤液的比

7、较(见下表)，(2)在准备鸡血口服液的时候，取桂血的同时，要添加柠檬酸钠，静置后，上层是血浆，下层是必需的血细胞。整合2下图是与“DNA粗提取和鉴定”实验相关的工作。这些操作的目的正确的是()。据分析，A清洗红细胞，去除血细胞表面的杂质B溶解DNA，去除不溶于酒精的杂质C溶解DNA，去除质量浓度为2 mol/L NaCl溶液的杂质是稀释NaCl溶液，去除不溶于低浓度NaCl溶液的杂质，吸收鸡血细胞释放核物质。析出DNA以去除酒精中溶解的杂质。即稀释NaCl溶液，使浓度接近0.14 mol/L，去除溶解在低浓度NaCl溶液中的杂质。答C，例1 (2011江苏)在利用鸡皮进行“DNA的粗提取和鉴定

8、”实验中，以下相关叙述是正确的。a用蒸馏水调节NaCl溶液的质量浓度为0.14 mol/L，过滤析出物B，调节NaCl溶液的质量浓度，或加入木瓜蛋白酶。通过去除一些杂质C，线可以溶解在质量浓度为2 mol/L NaCl的溶液中，蚕丝DNA溶解在质量浓度为2 mol/L的NaCl溶液中，放入二苯胺沸腾的水浴加热后变成蓝色。用鸡血代替鸡血作为实验材料，实验操作程序不完全相同。处理菜花时，先用洗涤剂处理细胞膜。答B，总结了提高DNA的粗提取原理和目的归纳，例2下图是用于“DNA的粗提取和鉴定”的实验装置。请回答以下相关问题。DNA粗提取实验操作，(1)实验材料使用鸡血液液代替鸡全血。主要原因是鸡血口

9、服液中含量高。_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。(2)图A所示的实验阶段添加蒸馏水的目的是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _32图A添加蒸馏水，混合血细胞和蒸馏水，使血细胞处于低渗透环境，细胞因大量吸收最终破裂，释放胞内物。图B将通过纱布过滤收集血细胞释放的DNA的滤液(过滤出大量凝胶)过滤掉，然后将质量浓度为2 mol/L的NaCl溶液放入滤液中，提高DNA的溶解性。DNA在浓度不同的NaCl溶液中的溶解度不同。例如，在质量浓度为0.14 mol/L的Na

10、Cl溶液中，只有1%的水，在质量浓度为1 mol/L的NaCl溶液中，溶解度只有水的两倍。图C在DNA脓盐溶液中添加蒸馏水(大量)以降低溶液的NaCl浓度。这是因为DNA在低浓度NaCl溶液中的溶解度很低(在质量浓度为0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最小，浓度小的话DNA溶解度会增大)，答案(1)DNA(2)血细胞破裂，将滤液中的DNA溶解在浓NaCl溶液(3)中，DNA(1)实验中加入两次蒸馏水，工作目的不同。第二次添加蒸馏水的目的是稀释氯化钠溶液，将浓度降低到0.14 mol/L，最终释放大量DNA。(2)在DNA粗提取中过滤三次时，DNA的存在部分和使用的纱布层数目不同。(。第一次用蒸