安全柜04.8.18.ppt

1、生物安全柜 中国疾病预防控制中心 王秋娣,为什么使用生物安全柜,1. 生物安全柜主要用于各种微生物, 特别是有害微生物的操作和基因 工程操作。 2. 根本目的是保护工作人员健康和柜 外环境安全。 3. 根据保护对象和程度的不同，生物 安全柜分为I、II和III级,生物安全柜的分级,1. I级生物安全柜：保护工作人员 和环境 2. II级生物安全柜：保护工作人员 、环境和试样（产品） 3. III级生物安全柜：采用手套箱更 严格地保护工作人员、环境和试 样（产品）,安全设备和个体防护,生物安全柜是最重要的安全设备， 形成最主要的防护屏障,生物安全柜,减少在进行(14)级生物安全水平危险 因子的工

2、作中所固有的危害 对操作人员、产品和环境提供保护的安全设备,生物安全柜,生物安全柜的等级和种类 生物安全柜的操作及应用 如何安全有效地使用生物安全柜,生物安全柜的定义,主要的保护屏障，防止生物有害气溶胶逃逸. 保护操作人员 可以保护样品,Class II 生物安全柜,生物安全柜分类,1) 气体流速和类型 2) 排风系统 3) 构造,Class I,Class II,Class III,生物安全柜的选择,生物安全柜 可以用于操作I 4级生物安全水平的生物因子 值得注意的是 根据相应的工作选择生物安全柜 在4级生物安全室 须配备正压防护服时才能使用级和级生物安全柜,生物安全柜的分级,I级生物安全柜

3、 保护工作人员和环境 II级生物安全柜 保护工作人员、环境和试样（产品） III级生物安全柜 采用手套箱更严格地保护工作人员、环境 和试样（产品）,Class I 生物安全柜,可开启前窗在负压下操作 表面风速在75-100 fpm 排出的气体经HEPA 过滤 保护操作人员和环境 适用于要求生物安全等级 1、2、3的工作 适用于样品不需保护的 实验工作,Class II 生物安全柜,可开启前窗 从前开口向内的气流用于保护人员 经HEPA过滤后向下送的层流，以保护样品 排出的气体采用HEPA过滤器过滤则用于保护环境 表面风速在75-100 fpm 适用于要求生物安全等级为（-）的 工作,Class

4、 II 生物安全柜的分类,B1,Type B,B2,Class II,Type A,A1,A2,A类和B类的区别,Class II,Type A,Type B,废气经烟罩排入实验室或室外,必须经排风系统将废气 排至室外，带报警装置,Class II 生物安全柜的分类,II级A1型生物安全柜 70%柜内循环，30%空气排出，工作窗口流速75fpm II级A2型生物安全柜 70%柜内循环，30%空气排至室外，工作窗口流速100fpm II级B1型生物安全柜 30%柜内循环，70%空气排出,工作窗口流速100fpm II级B2型生物安全柜 100%空气排出,工作窗口流速100fpm,II级生物安全柜

5、,1.美国对II级生物安全柜有新的分类 方法 2.欧洲产品无B2型II级生物安全柜,安全柜的选择,选A类还是B类生物安全柜的关键： 不是生物因素，而是操作人员是否会用到 挥发性的有害物质或放射性物质,Type B,Type A,级A1型生物安全柜,从操作口向内气流的最小平均速度应保持75 ft/min（0.38 m/s）； 经HEPA过滤器过滤的下送气流，是来自于同一个压力排风系统的下送气流和操作口向内气流的混合气体的一部分; 经HEPA过滤器过滤后的空气可以排回实验室或通过排风罩排入环境.,Class II 生物安全柜,Type A1 不带排风管路,最小流速 75 fpm,满足生物安全等级

6、1、2、3的要求,不涉及放射性物质,不涉及挥发性有害化学品,建议不应有明火,A1型生物安全柜不适于操作挥发性有毒化学物质 和挥发性放射性核素,Class II 生物安全柜,Type A1 带排风管路,最小表面风速 75 fpm,建议不应有明火,不涉及放射性物质,不涉及挥发性有害化学品,满足生物安全等级1、2、3的要求,级A2型生物安全柜 （称为B3型）,从操作口向内气流的最小平均速度应保持100 ft/min（0.5 m/s）； 经HEPA过滤器过滤的下送气流，是来自于同一个压力排风系统的下送气流和操作口向内气流的混合气体的一部分； 经HEPA过滤器过滤后的空气可以排回实验室或通过排风罩排入环

7、境.,Class II 生物安全柜,Type A2 不带排风管路,最小表面风速 100 fpm,满足生物安全等级 1、2、3的要求,不涉及放射性物质,不涉及挥发性有害化学品,建议不应有明火,Class II 生物安全柜,Type A2 带排风管路,最小表面风速 100 fpm,满足生物安全等级 1、2、3的要求,适用于含痕量放射性物质的工作*,适用于含少量挥发性有害化学品的工作*,建议不应有明火,级B1型生物安全柜,从操作口向内气流的最小平均速度应保持100 ft/min（0.5 m/s）； 经HEPA过滤器过滤的下送气流大部分是未被污染的循环吸入气流； 污染的下送气流经HEPA过滤器过滤后，

8、大多数经过专门的排风管排入大气.,Class II 生物安全柜,满足生物安全等级 1、2、3的要求,工作区域的后部可使用少量的放射性物质,工作区域的后部可使用少量的挥发性有害化学品,Type B1,最小表面风速 100 fpm,建议不应有明火,适用于： 含有微量挥发性有毒化学物质或痕量放射性核素的微生物学研究,级B2型生物安全柜（称为“全排型”）,从操作口向内气流的最小平均速度应保持100 ft/min（0.5 m/s）； 经HEPA过滤器过滤的下送气流来自于实验室或室外的空气（亦即安全柜中排出的气体不再循环用作下送气流）； 操作口向内气流和下送气流经HEPA过滤器过滤后全部排入大气，不再循环

9、送入安全柜或送回实验室； 所有污染的风道和压力排风系统均保持负压，或由直接排出的（不再循环经过工作区）负压风道和压力排风系统包围。,Class II生物安全柜,满足生物安全等级,适用于放射性物质 *,适用于挥发性有害 化学品*,建议不应有明火,Type B2 全排风,适于于： 进行含有挥发性有毒化学物质和放射性核素的微生物学研究工作,箱体完全封闭，将微生物与人完全隔离。 通过手套箱操作。 2. 保护工作人员、产品和环境。 3. 一般无定型产品，需特殊定货。 4. 可将若干III级生物安全柜连在一起使用 全部生物流程的操作均在柜内完成，以 确保安全。,Class III 生物安全柜,III级生物

10、安全柜,III级生物安全柜,生物安全柜的操作理论,颗粒经HEPA过滤去除 气流为层流 气流有方向,所有的生物安全柜均应符合下列要求:,HEPA滤膜 马达/风扇强制气体流动 马达转速的控制部分 气体的吸入、平衡控制及管路系统,生物安全柜的主要部件包括:,操作理论 层流,层流气流向下扫过工作区域，捕获气溶胶，经安全柜的内层至HEPA滤膜 为实现真正的层流，各点的气流速率必须在平均流速的+/- 20%以内,操作理论 有方向的气流,空气从操作人员的前面和周围吸入，使工作区域的气溶胶更难逃逸。 这个气流通常以向内吸入的体积或平均流速计算、表示。,操作理论-烟气分束,在工作区域的一个垂直平面内烟气被分束，

11、向前方和后方的气孔移动. 为最有效的防止烟气逃逸，物品应放在烟气分束以后的区域，操作也应在此进行.,生物安全柜的使用,1. 正确安装，确保安全柜与外部 排风系统压力平衡，保证安全 柜处于正常工作状态。 2.定期维护和检测，确保安全性,在生物安全柜上工作,在开始工作前彻底理解操作步骤和所需设备。 尽量减少扰动，如减少房间内的走动。 准备好消毒剂和处理遗撒事件的物品。,定制计划,在生物安全柜上工作,关掉紫外灯，前窗开至适当高度，打开安全柜的灯和风扇. 检查出风口是否有障碍物，等待5min。 用消毒液彻底洗净手和手臂；穿长袖工作服和手套；带防护眼镜.,开始,在生物安全柜上工作,用70%的乙醇溶液或适

12、当的消毒剂擦拭工作区域的内壁,清洁,在生物安全柜上工作,只放入所需的物品。不要让生物安全柜超载。出风口不要有障碍物。大物体间要保持一定距离 把前窗降至适当高度。等2-3min以吹扫污染物,上样,在生物安全柜上工作,所有物品离前窗至少2英寸，所有污染性的操作 尽量远离工作区域的后部 干净和被污染的物品分开放置；被污染的物品尽量不要进入干净区域，应放置在工作区域的后部 操作时物品和手臂不要穿过前窗,技巧,在生物安全柜上工作,干净的物品,理想的工作台摆放,被污染的区域,废弃物托盘,垃圾袋,在生物安全柜上工作,避免使用明火（可用酒精灯），用适当的灭菌措施 避免使用干扰安全柜内层流的实验手段 如使用中有

13、遗洒，所有物品被拿走前必须经去污染处理 须安全柜处于操作状态时，彻底消毒内壁,技巧-续篇,在生物安全柜上操作,工作结束后，安全柜继续开机2-3min吹扫工作区的污染物,最后的吹扫,在生物安全柜上工作,与污染物接触过的物品从生物安全柜中取出之前必须经表面去污处理. 所有的托盘或容器从安全柜中取出前必须盖上,下样,在生物安全柜上工作,用消毒剂清洁所有内壁，待其干燥 定期抬起工作面清洁下面的区域；洗净抹布 扔掉橡胶手套；适当洗涤工作服，用杀菌液彻底清洁 手和手臂,清洁,在生物安全柜上工作,关闭灯、风机、关闭前窗，打开紫外灯,关机,调整椅子的高度，让肩膀放松双肘自然放于两侧。,人体工程学方面的考虑,肘

14、和肩膀,常见说法和错误认识,喷灯的火焰会严重影响在工作中的安全柜内的层流，可能会 实质性增加工作区域气溶胶的扩散,如果喷灯的火苗很大，过量的热可能融化HEPA滤膜的黏结剂或在 滤膜上烧出洞。无人看守的喷灯可能熄灭。在A类或A/B3类安全柜 内，泄露的气体可能达到爆炸极限,“我必须在安全柜中使用喷灯.,用替代方法，如电热套或可抛的加热环。不要烤容器瓶口。 生物安全柜的工作区域应为无菌环境，如果正确使用的话,常见说法和错误认识,排风柜用来把有害有毒的烟和气溶胶抽走，应该用对多种化学 试剂惰性的材料构成.,生物安全柜的主要目的是保护操作人员、环境和样品免受生物 有害物质的侵害。生物安全柜及其HEPA

15、滤膜使用对在生物研究 中常用化学品表现惰性的材料，但可能会被排风柜中常用的更 腐蚀性的化学品破坏,“我可以把生物安全柜当排风柜使用.,不要把生物安全柜当排风柜使用,常见说法和错误认识,错! 生物安全柜只在正确使用的情况下保护操作 人员和样品。在生物安全柜上工作什么时候 都得灭菌.,如果我在生物安全柜上工作， 就不必对我的操作很小心,常见说法和错误认识,错! 紫外灯只是个附件，减少安全柜不用时工作区域 的污染。紫外线实质上没有穿透力，不会杀灭被 灰尘或有机物保护的微生物。避免污染的最好方 法是在每一段工作开始前和结束后对工作面定期 清洁.,如果我用紫外灯，就不必清洁工作区域,常见说法和错误认识,

16、错! I级安全柜适用于一级，二级和三级安全实验室， II级和III级安全柜则适用于所有级别安全实验室。,I级安全柜只适用于一级安全实验室， I级安全柜只适用于二级安全实验室， III级安全柜只适用于三级安全实验室，.,常见说法和错误认识,不能。 工作区域放置大物体会妨碍气流，降低安全柜的效率。 离心机、搅拌机等电器通常有冷却风扇，这会破坏安 全柜内的气流。离心机内最好使用密封的安全杯，在 安全柜内装样和下样。,”我能把离心机放在生物安全柜内使用吗?,常见说法和错误认识,不一定。对于远离挥发性有害化学品的侵害， 对于远离生物有害气溶胶的侵害，则不是 应根据实际工作的要求和研究内容来- 确定使用B

17、类或A类的生物安全柜,“B类安全柜和A类相比能提供更好的保护.”,常见说法和错误认识,某些应用如研究生物毒素药物的工作，为防止有害 物质逃逸.建议连续使用安全柜。 大多数应用连续使用安全柜会降低HEPA滤膜的寿命.,”所有的生物安全柜应连续工作.”,常见说法和错误认识,假设房间密闭，没有通风系统，没有什么活动，循环 式的A类安全柜可能会把空气净度降至100等级。不幸 的是，一旦使用人员进入，房间将再次被污染。 这样做将降低HEPA滤膜的寿命.,”如果我让安全柜连续工作，室内空气净度将达到100等级.”,常见说法和错误认识,不一定。 HEPA滤膜应在压力差过大时更换（滤膜沾满了颗粒） 决定滤膜寿命的两大因素是房间内空气污染的程度 以及安全柜工作的时间按时间表更换滤膜而不考虑 滤膜被污染的程度可能造成不必要的浪费,”我听说应每年更换HEPA滤膜.”,生物安全柜的选用,1.凡进行有害微生物和转基因操作， 均应使用生物安全柜，不可用净化 工作台代替。 2.根据工作性质和防护要求，选用 适当级别和型号