2--量子点标记探针技术的乳腺癌个体化分子预警新方法--陈创.ppt

1、1,量子点标记探针技术的乳腺癌个体化分子预警新方法,武汉大学人民医院乳腺甲状腺外科 陈 创,2,2,汇报提纲,研究背景 研究内容 课题小结 致 谢,3,课题背景与研究现状,4,4,肿瘤学的困境,个体化诊疗,No significant improvement in cancer survival rates No serious attention to individual tumor biology More cancer technicians than oncologists Revolution needed: tradition to transition to transform

2、ation!,5,手术+放疗+化疗生物治疗：免疫、靶向治疗等,临床表现实验室诊断：血清、体液、病理学(分子)影像学诊断,癌症治疗,癌症诊断,个体化诊疗新途径,6,量子点的基本特性及生物学应用,7,8,Whitesides GM. Nat Biotechnol 2003,21:11611165,a 蟑螂 b 头发(人眼的分辨本领) c 花粉粒 d 红细胞（7.2 um） e半壳状钯凝聚物 f 量子点纳米微晶体 (1-10 nm) g 乙酰水杨酸(阿司匹林)分子,9,10,Rhodamine red、DsRed2和量子点的吸收光谱及发射光谱,图a 为传统荧光物质吸收和发射峰很近，不易区分,Bair

3、d GS, et al. Proc Natl Acad Sci. 2000; 97:11984-9,图b为量子点的吸收和发射峰较远，容易区分,11,紫外激发(330-385nm),蓝光激发(450-480nm),橙红(605nm),不同光源激发的发射波长相同的核壳量子点,12,同一光源激发的发射波长不同的核壳量子点,粒径增大,Zrazhevskiy P, Gao X. Nano Today, 2009,4:414-428.,13,自然条件衰减,量子点与传统荧光素的荧光持续时间比较,陈良冬,李雁等.中华实验外科杂志.2006;23(9):1085-1087,14,量子点的优良特性能突破技术障碍，

4、推动医学研究,15,量子点SCI论文数增长情况（Pubmed数据库）,16,Synthesis,Modification & Functionalization,Bio-application,Analysis,“新型生物医学探针技术基础及应用”自然基金创新群体项目,多学科创新研究群体,量子点标记探针的生物医学应用,17,17,Quantum Dots light up pathology,乳腺癌关键预警分子成像应用基础研究,量子点标记探针 分子病理学临床应用基础研究,18,细胞膜(HER2),Cell Nucleus (ER),量子点标记探针 乳腺癌分子病理学,细胞核(ER),细胞浆(CK)

5、,细胞核(P53),19,量子点标记探针技术 对乳腺癌HER2的定量检测,第一部分,20,Ross JS, et al. Oncologist, 2003, 8(4):307-325.,诊断 治疗 监测 预后,乳腺癌,21,免疫酶组织化学,量子点免疫荧光,乳腺癌HER2的检测,FISH,22,乳腺癌HER2检测方法的比较,23,图像分析与处理软件系统,24,荧光值-QD 评分,25,FISH 验证,58例 HER2 IHC+,26,量子点免疫荧光持续时间,D 1,D 75,D 150,复染,27,量子点免疫荧光结果的保存,量子点,免疫组化,28,28,HER2的量子点检测：高灵敏、稳定、定量,

6、量子点标记探针临床应用基础研究技术可行性,IHC,QD-IHC,FISH,Chen C, Pang DW, Li Y. Biomaterials. 2009, 30:2912-8.(IF=6.646),29,乳腺癌HER2量子点免疫荧光检测试剂盒,30,技术可行临床价值,31,第二部分,量子点标记探针技术 对乳腺癌HER2检测的预测价值分析,32,临床样本量扩大,预后随访筛选240例,临床价值-改进措施,组织芯片阵列构建,多光谱定量分析,分析算法新模式,高通量、可比性,准确性、特异性,传统与定量参数,33,乳腺癌5年无复发生存曲线,中位随访: 62月(2-85) 5-DFS: 62.8%(14

7、9/240) 局部复发：8.33%(20/240) 远处转移：29.6%(71/240),34,乳腺癌组织芯片微阵列,35,荧光信号准确获取-光谱技术,36,CRi多光谱成像分析系统,37,37,CISH,5-DFS,38,实验设计流程图,39,39,ROC-基因扩增,ROC-5年无复发生存,负荷量 P=0.003,评分 P0.05,40,40,HER2评分与乳腺癌临床T分期 P0.05,HER2负荷量与乳腺癌临床T分期 P0.0001,肿瘤生物学行为的新认识：HER2总量更准确反映临床实际,41,HER2负荷量鉴别高复发风险,42,传统方法难以鉴别高复发风险,43,HER2总量与5年无病生存

8、关系的多因素分析,44,44,淋巴结阳性亚组：HER2负荷量鉴别高复发风险,Chen C, Pang DW, Sun SR, Li Y*. Biomaterials, 2010, 31:8818-25.(IF=7.365),45,第三部分,量子点标记探针技术 的乳腺癌ER和HER2成像及异质性分析,46,QDs在组织芯片中的应用,47,47,HER2分布：乳腺癌异质性,理论探索肿瘤异质性的动态演变规律,48,49,49,HER2/ER实时、原位同时成像,乳腺癌生物学行为的新认识：肿瘤异质性的动态演变,HER2,HER2/ER,ER,Chen C, Pang DW, Li Y. Nanotech

9、nology, 2010, 21(9):95101. (IF=3.446),50,Nanotechnology 杂志网站文章亮点,51,第四部分,激素受体与HER2量子点 光谱定量分析对乳腺癌分类的价值,52,关键分子预警效能及临床价值分析,乳腺癌病例样本库,组织芯片样本制作,HER2量子点定量检测,ER/PR定量检测,预警效能研究,乳腺癌随访数据库,53,实验设计流程图,54,量子点标记探针技术的乳腺癌关键分子光谱成像,HER2,ER,PR,55,激素受体阳性面积分布图,56,激素受体强阳性-低复发风险亚组,57,Chen C,Sun SR Li Y. Biomaterials, 2011, 32:7592-9 .(IF=7.882),57,个体化分子预警-复发风险五亚