5-食品快速检测方法简介-20150623.ppt

1、食品快速检测方法简介,广东省食品药品检验所 2015年6月,食品安全与食品检测,食品安全的定义 食物中有毒、有害物质对人体健康影响的公共卫生问题。（WHO）,食品安全与食品检测,食品安全的主要问题 致病性微生物 每年非伤寒沙门氏菌、副溶血性弧菌和志贺氏菌食源性感染人数总计2736万例 。 食品添加剂滥用 超量、超范围使用食品添加剂 添加有害的非食用物质 掺杂使假、假冒伪劣的隐患 化学污染物 农药、兽药残留 持久性有机污染物 重金属 食品本身所含及生产加工产生的有害物 食品容器包装材料等迁移污染,食品安全与食品检测,国务院对食品安全工作提出了“四个最严”的要求：用最严谨的标准、最严格的监管、最严

2、厉的处罚、最严肃的问责来体现食品安全监管的执法力度。 “史上最严”的食品安全法（2015年10月1日实施） 第一百一十二条县级以上人民政府食品药品监督管理部门在食品安全监督管理工作中可以采用国家规定的快速检测方法对食品进行抽查检测。 第八十八条采用国家规定的快速检测方法对食用农产品进行抽查检测，被抽查人对检测结果有异议的，可以自收到检测结果时起四小时内申请复检。复检不得采用快速检测方法。,食品安全与食品检测,食品检验方法与展望 标准检验方法 色谱法（GC、HPLC、TLC） 质谱法（GC-MS、GC-MS/MS、HPLC-MS/MS、ICP-MS） 光谱法（AAS、AFS、UV） 酶联免疫法

3、实验室检验方法，检验周期长，一般不能在现场进行。,食品安全与食品检测,食品检验方法与展望 食品快检技术 理化鉴别技术：显色反应，沉淀反应等 免疫分析技术：胶体金免疫分析、酶联免疫分析、生物芯片等 便携式设备 具有快速、简便、灵敏、可移动等特点，非常适合在监督现场对可疑样品进行快速筛查。 满足食品安全检验的时效性。 已成为国家标准的快检方法很少（如GB/T 5009.199）,食品安全与食品检测,抽检、监测常见不合格项目 微生物：致病菌（金黄色葡萄球菌、沙门氏菌等） 食品添加剂（苯甲酸、山梨酸、亚硝酸盐、糖精钠、甜蜜素、硫酸铝钾(铵)、人工合成着色剂等） 非食用物质（罂粟壳、甲醛、吊白块、非食用

4、色素等） 真菌毒素（黄曲霉毒素B1等） 污染物（镉、铅） 品质指标（食用油：酸价、过氧化值、脂肪酸组成等）,食品安全与食品检测,食品快检技术 理化鉴别技术：显色反应，沉淀反应等 免疫分析技术：胶体金免疫分析、酶联免疫分析、生物芯片等 便携式设备 色谱技术：高效液相色谱，毛细管电泳，气相色谱法，离子迁移色谱等 波谱技术：紫外光谱、荧光分析、红外光谱、近红外光谱、拉曼光谱、质谱、核磁共振波谱、X射线荧光等 电化学技术：化学发光，化学传感器，氧化值等 分子印迹技术（人工抗体、塑料抗体） 感官鉴别技术：又称为外观鉴别,培训内容,铝残留快速检测方法 亚硝酸盐快速检测方法 甲醛快速检测方法 吊白块快速检测

5、方法 酸价快速检测方法 过氧化值快速检测方法,黄曲霉毒素B1快速检测方法 三聚氰胺快速检测方法 孔雀石绿快速检测方法 瘦肉精残留快速检测方法 罂粟壳快速检测方法 农药残留快速检测方法,一、铝残留量快速检测方法简介,主要内容,概述 监督检查重点品种 快筛试剂盒使用方法,（一）概述,食品中的铝主要来源于含铝食品添加剂，如膨松剂硫酸铝钾、硫酸铝铵，曾广泛常用于小麦粉及其制品、膨化食品中，以改善食品的口感和质地。 长期过多摄入铝，会损伤骨骼、大脑及神经系统。可能引起儿童发育迟缓、老年人痴呆等疾病。 由于我国食品中超量、超范围使用含铝膨松剂的情况较为严重，含铝食品添加剂的使用范围作出重要调整。 GB 2

6、762-2005、GB 2760-2011，小麦粉及其制品中铝残留量为100mg/kg。 自2014年7月1日起，膨化食品生产中不得使用含铝食品添加剂，小麦粉及其制品（除油炸面制品、面糊（如用于鱼和禽肉的拖面糊）、裹粉、煎炸粉外）生产中不得使用硫酸铝钾和硫酸铝铵。,GB 2760-2014 不得使用：膨化食品、非油炸小麦粉及其制品,（一）概述,相关检测标准,（一）概述,受传统制作工艺影响，我国面制食品中铝残留量超标的情况仍较常见。 外观蓬松或口感酥脆的面制品为重点抽检对象。,（二）监督检查重点品种,适用范围：适用于面粉、蒸制面制品（如馒头、包子、花卷等）、蒸制类中式糕点（如马拉糕、发糕等）。

7、原理：在弱酸性缓冲介质中，三价铝离子与铬天青S及十六烷基三甲基溴化铵反应生成蓝色的络合物，根据其颜色的深浅反应铝的含量。,（三）铝残留量快筛试剂盒使用方法,筛查操作步骤 【样品前处理】 取剪碎或粉碎后的样品1g于具塞玻璃瓶或者离心管中，加入10mL蒸馏水，2滴铝提取剂，搅拌均匀，超声20 min； 吸取超声处理后的上清液1 mL于1.5 mL离心管中，加入2滴铝调节剂，摇匀，12000 rpm离心10 min。,（三）铝残留量快筛试剂盒使用方法,【样品检测】 另取1个1.5mL离心管，用吸管滴加3滴样品离心后上清液。 滴加1滴铝检测A试剂，1滴铝检测B试剂，混匀。 滴加2滴铝检测C试剂，5滴铝

8、检测D试剂，混匀。 静置反应2min。,C,D,（三）铝残留量快筛试剂盒使用方法,（三）铝残留量快筛试剂盒使用方法,筛查结果判定 观察显色结果，并与提供的色阶卡比较。,试剂盒操作关键点 若不加铝调节剂，则不能正常显色。 应在规定时间范围内观察反应结果，否则，结果的判断可能不准确。,（三）铝快筛试剂盒使用方法,二、亚硝酸盐快速检测方法简介,主要内容,概述 监督检查重点品种 快筛试剂盒使用方法,（一）概述,亚硝酸盐外观及滋味都与食盐相似，常用作肉制品护色剂、防腐剂。 亚硝酸盐是剧毒物质，成人摄入0.2-0.5g即可引起中毒，3g即可致死。 由于亚硝酸盐毒性大，性状与食盐相似，在餐饮服务单位中容易被

9、误用，2012年起，我国已禁止餐饮服务单位使用亚硝酸盐作为食品添加剂。 根据GB 2760和GB 2762，各类食品中亚硝酸盐的残留量均有明确规定。,（一）概述,常见食品中亚硝酸盐的最大使用量和残留限量,相关检测标准,（一）概述,重点抽检对象：肉制品、腌制蔬菜。,（二）监督检查重点品种,适用范围：适用于肉制品（如腊肉、腊肠、卤肉、熏肉、腌肉、肴肉、红肠、肉肠、香肠、火腿、香肚），酱腌菜等食品中亚硝酸盐的快速筛查。 原理：在弱酸性条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料，根据染料颜色的深浅反应亚硝酸盐的含量。,（三）亚硝酸盐快筛试剂盒使用方法,筛查操作步骤 【样

10、品前处理】 固体或半固体样品：称取20 g待测样品，切碎或研碎混合后取2 g 于“样品杯”中，加入20 mL 蒸馏水，浸泡1015 min，其间振荡数次，过滤取清液1 mL加9 mL蒸馏水稀释混匀待测。（稀释倍数为100倍） 液体样品：无色或颜色较浅的液体样品可直接取样。,（三）亚硝酸盐快筛试剂盒使用方法,（三）亚硝酸盐快筛试剂盒使用方法,【样品测试】 对照测试 取一支2 mL空离心管，加入1800 L蒸馏水，加入100 L试剂A，反应5 min 后，加入100 L试剂B，混匀反应10 min后，上机进行对照测试。,（三）亚硝酸盐快筛试剂盒使用方法,样品测试 另取一支2ml空离心管，加入180

11、0 L样品处理液，加入100 L试剂A，反应5min 后，加入100 L试剂B，混匀反应10 min后，上机进行样品测试。,（三）亚硝酸盐快筛试剂盒使用方法,测试结果 1、液体样品结果：CsC0，仪器所测浓度值即为样品中所含亚硝酸盐的含量。如稀释10倍，CsC010（稀释倍数），即为样品中所含亚硝酸盐的含量(mg/kg)。 2、固体样品结果：CsC0100（稀释倍数）,记录仪器所测浓度值C0，再乘以样品的稀释倍数100，即为样品中所含亚硝酸盐的含量(mg/kg)。,试剂盒操作关键点 生活饮用水中常存在亚硝酸盐，不能作为测定用稀释液。 若显色后颜色很深且有沉淀产生或很快退色变成浅黄色，说明样品中

12、亚硝酸盐含量很高，须加大稀释倍数重新测定。,（三）亚硝酸盐快筛试剂盒使用方法,三、甲醛快速检测方法简介,主要内容,概述 监督检查重点品种 快筛试剂盒使用方法,（一）概述,甲醛防腐能力强，一些不法经营者在生产和储藏过程中将水产品浸泡在甲醛溶液中，以达到延长保质期、改善外观和口感的目的。 甲醛为强烈致癌物。食用含有甲醛的食品后会损害人的肝肾功能，甚至导致肾衰竭。 甲醛曾用作食品加工助剂在食品工业中使用。 GB 2760-2011，甲醛从食品加工助剂中删除，意味着甲醛在食品中彻底禁用。,（一）概述,相关检测标准 水发产品本底含有少量甲醛，农业部无公害食品 水发水产品中规定甲醛含量不得大于10mg/k

13、g。,（二）监督检查重点品种,甲醛主要非法添加在水发食品（及其发泡水）、水产及水产制品中。,（三）甲醛快筛试剂盒使用方法,适用范围：适用于水发食品（及其发泡水）、水产及水产制品中甲醛的快速筛查。 原理：在碱性条件下，甲醛与乙酰丙酮发生反应，生成黄色物质，根据其颜色的深浅反应甲醛的含量。,（三）甲醛快筛试剂盒使用方法,筛查操作步骤 【试剂配制】 检测试剂在第一次使用前需进行试剂配制 取400 L显色剂加入到缓冲液瓶中。 混匀，放置4小时后使用。试剂配制后应在30天内使用，过期无效。,（三）甲醛快筛试剂盒使用方法,筛查操作步骤 【样品前处理】 固体样品：称取20 g 待测样品，切碎或研碎混合后取1

14、.5 g 于“三角瓶”中。取出后趁热加入1 mL甲醛提取液A和1 mL甲醛提取液B，摇匀。冷却后过滤，过滤后的清液为样品待测液，待测。（稀释倍数为20倍） 液体样品：直接取样品的浸泡液或渗出液待用。,（三）甲醛快筛试剂盒使用方法,【样品测试】 对照测试 取一支15 mL离心管，加入5 mL蒸馏水； 加入1 mL经处理后的缓冲液； 盖好离心管的盖子，放入到100 的沸水中加热3分钟； 冷却后上机进行对照测试。,（三）甲醛快筛试剂盒使用方法,样品测试 取一支15 mL离心管，加入5 mL样品待测液，混匀； 加入1 mL经处理后的缓冲液； 盖好离心管的盖子，放入到100 的沸水中加热3分钟； 冷却后

15、上机进行对照测试。,（三）甲醛快筛试剂盒使用方法,测试结果 1、液体样品结果：CsC0，仪器所测浓度值即为样品中所含甲醛的含量。如稀释10倍，CsC010（稀释倍数），即为样品中所含甲醛的含量(mg/kg)。 2、固体样品结果：CsC020（稀释倍数）,记录仪器所测浓度值C0，再乘以样品的稀释倍数20，即为样品中所含甲醛的含量(mg/kg)。,试剂盒操作关键点 样品提取时应充分震摇。 应在规定时间范围内反应结果，否则，结果的判断可能不准确。,（三）甲醛快筛试剂盒使用方法,四、吊白块快速检测方法简介,主要内容,概述 监督检查重点品种 快筛试剂盒使用方法,（一）概述,吊白块（甲醛次硫酸氢钠）具有极

16、强的还原性，具有漂白、防腐、增强韧性的功效。 吊白块是一种强致癌物质，进入人体后，可能作用于某些酶系统，并可能引起机体细胞变异，从而损害肺、肝、肾，以致引发癌症。人经口服甲醛次硫酸氢钠的致死量为10g。 吊白块作为非食用物质， 2008年被列入我国第一批“食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂品种名单”。,相关检测标准,（一）概述,重点抽检对象：白糖、米制品、面制品、豆制品。,（二）监督检查重点品种,适用范围：适用于腐竹、馒头、米、面、豆制品、白糖和榨菜等食品的快速检测。 原理：吊白块本身不稳定，在食品中以甲醛和次硫酸根形式存在。本方法对样品中的甲醛进行检测，在碱性条件下，甲醛与乙

17、酰丙酮发生反应，生成黄色物质，根据其颜色的深浅反应甲醛的含量。,（三）吊白块快筛试剂盒使用方法,（三）吊白块快筛试剂盒使用方法,筛查操作步骤 【样品前处理】 液体样品：无色或颜色较浅的液体样品可直接取样待测。 固体样品：取2g剪碎样品于样品杯中，加纯净水或蒸馏水至20mL，浸泡10min，期间搅拌数次，待测。,（三）吊白块快筛试剂盒使用方法,【样品检测】 取待测液1mL于离心管中，依次加入3滴检测液A、3滴检测液B，盖上盖子后摇匀，反应5min后加入1滴检测液C，盖上盖子后摇匀，反应5min。,C,（三）吊白块快筛试剂盒使用方法,筛查结果判定 观察显色结果，对照标准比色板进行半定量判定。 本试

18、剂盒仅对甲醛进行检测。结果判定会存在一定的偏差。 当测试结果甲醛10ppm时，判定此样品中不含吊白块。 当测试结果甲醛10ppm时，应用所配的二氧化硫检测管对样品进行复检，得出其二氧化硫含量。若二氧化硫未检出或10ppm时，判定样品中不含吊白块，但可能含有甲醛。若二氧化硫10ppm时，且甲醛与二氧化硫比例大约为1：2时，判定样品中含有吊白块，且吊白块含量约甲醛含量5.12。,（三）吊白块快筛试剂盒使用方法,试剂盒操作关键点 样品提取时应充分震摇。 应在规定时间范围内观察反应结果，否则，结果的判断可能不准确。,五、酸价快速检测方法简介,主要内容,概述 监督检查重点品种 快筛试纸条使用方法,（一）

19、概述,酸价（或称中和值、酸值、酸度）表示中和1g化学物质所需的氢氧化钾（KOH）的毫克数，是对化合物（例如脂肪酸）或混合物中游离羧酸基团数量的一个计量标准。 油脂酸价的大小与制取油脂的原料、油脂制取与加工的工艺、油脂的贮运方法与贮运条件等有关。 酸价可作为油脂变质程度的指标。,（一）概述,常见食用油中酸价的限量值,相关检测标准,（一）概述,重点抽检对象 散装食用植物油 煎炸过程中的食用植物油 生产、运输、储存不当的食用植物油,（二）监督检查重点品种,适用范围：适用于常温下为液态的食用油中酸价进行快速检测。 原理：利用食用植物油酸败所产生的游离脂肪酸与试纸中的药剂发生显色反应，以此反应出油脂酸败

20、的程度。,（三）酸价快筛试纸条使用方法,筛查操作步骤 【样品前处理】 用清洁、干燥容器量取少量的食用油样品，将使用有样品的温度调整到255，待测。,（三）酸价快筛试纸条使用方法,【样品检测】 从试纸筒中取出试纸条。 将试纸浸入油样中约5s，取出后静置5min，用吸水纸吸去多余的油样。 筛查结果判定 将反应膜所显示的颜色与比色卡进行对比，得出油样中的酸价值（以KOH计）。,（三）酸价快筛试纸条使用方法,试纸条操作关键点 开封前若发现铝箔袋已经破损、密封不好或反应膜已经变色，则不能使用。 开封后必须立即使用。 应在规定时间范围内观察反应结果，否则，结果的判断可能不准确。,（三）酸价快筛试纸条使用方

21、法,六、过氧化值快速检测方法简介,主要内容,概述 监督检查重点品种 快筛试纸条使用方法,（一）概述,过氧化值是指1kg样品中的活性氧含量，以过氧化物的毫摩尔数表示，是油脂和脂肪酸等被氧化程度的一种指标，用于说明样品是否因已被氧化而变质，判断其质量和变质程度。 过氧化物可以破坏细胞膜结构，引发胃癌、肝癌、动脉硬化、心肌梗塞和脱发。长期食用过氧化值过高的食物对心血管病、肿瘤等慢性病有促进作用。 油脂氧化后生成过氧化物、醛、酮等氧化能力较强的物质，能将碘化钾氧化成游离碘。可用硫代硫酸钠来滴定。,（一）概述,常见食用油中过氧化值的限量值,相关检测标准,（一）概述,重点抽检对象 散装食用植物油 煎炸过程

22、中的食用植物油 生产、运输、储存不当的食用植物油,（二）监督检查重点品种,适用范围：适用于常温下为液态的食用油中过氧化值进行快速检测。 原理：利用食用植物油氧化所产生的过氧化物与试纸中的药剂发生显色反应，以此反应出油脂被氧化的程度。,（三）过氧化值快筛试纸条使用方法,筛查操作步骤 【样品前处理】 用清洁、干燥容器量取少量的食用油样品，将使用有样品的温度调整到255，待测。,（三）过氧化值快筛试纸条使用方法,【样品检测】 从试纸筒中取出试纸条。 将试纸浸入油样中约5s，取出后静置10min，用吸水纸吸去多余的油样。 筛查结果判定 将反应膜所显示的颜色与比色卡进行对比，得出油样中的过氧化值。,（三

23、）过氧化值快筛试纸条使用方法,试纸条操作关键点 开封前若发现铝箔袋已经破损、密封不好或反应膜已经变色，则不能使用。 开封后必须立即使用。 应在规定时间范围内观察反应结果，否则，结果的判断可能不准确。,（三）过氧化值快筛试纸条使用方法,七、黄曲霉毒素B1快速检测方法简介,主要内容,概述 监督检查重点品种 快筛试剂盒使用方法,（一）概述,黄曲霉毒素是由生长在食物及饲料中的黄曲霉菌、曲霉菌等代谢产生的一组化学结构类似的真菌毒素。目前已分离鉴定出17种，主要是黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2，以及由B1和B2在体内经过羟化而衍生成的代谢产物M1和M2等。 在天然污染的食品中以黄曲霉毒素B1 最多见，毒

24、性最强，已被WHO划定为一类致癌物。 黄曲霉的分布很广，特别容易污染花生、玉米、稻米、大豆、小麦等粮油产品，对世界范围内的绝大多数食品原料和制成品均有不同程度的危害。在湿热地区食品和饲料中出现黄曲霉毒素的机率最高。,（一）概述,GB 2761-2011,常用检测标准,（一）概述,重点抽检对象 霉变的花生、核桃、大米、玉米、小麦等粮食作物 散装食用植物油,（二）监督检查重点品种,适用范围：适用于粮食作物（玉米、大米、豆类、花生等）及其制品（酱油、食醋、食用油、米酒等）产品中黄曲霉毒素B1 的定性筛查检测。 检出限：5.0g/kg 原理：应用竞争抑制免疫层析的原理，样本中的黄曲霉毒素B1在层析的过

25、程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体结合，抑制了抗体和包被膜检测线（T线）上的黄曲霉毒素B1偶联物，从而导致检测线颜色的变化。当样本中没有黄曲霉毒素B1或者低于其检测限时，T线有明显的显色；当样本中的黄曲霉毒素B1残留高于检测线时，T线不会显色；无论样本中是否含有黄曲霉毒素B1 ，C线均会显色。,（三）黄曲霉毒素B1快筛试剂盒使用方法,（三）黄曲霉毒素B1快筛试剂盒使用方法,胶体金技术简介 胶体金免疫技术是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术。通常有双抗体夹心法和竞争法两种。对于小分子物质，一般只能用竞争法检测。 样品液滴加到样品垫后，受毛细作用向金标垫层析，随后胶体金标

26、记物复溶于溶液中并随溶液一起向T线移动。 若样品中没有被分析物，则胶体金标记物与T线上蛋白特异性结合形成线条，即阴性。 若样品中有被分析物，在抗体金标型中，小分子物质与T线上的抗原竞争胶体金上的抗体；在抗原金标中，小分子物质与胶体金上的抗原竞争结合T线上的抗体，两种情况都使得金标记物不能和T线上物质结合，从而不能产生线条，即阳性。,（三）黄曲霉毒素B1快筛试剂盒使用方法,胶体金试纸条组成结构,【样品前处理】 谷物和饲料 取5g以上有代表性的样品粉碎，称取2.0g均匀粉碎样加入到15 mL离心管中。 向离心管中准确加入2mL纯净水和8mL乙酸乙酯，将瓶塞盖紧密封，充分震荡5min，然后静置1mi

27、n（注意：如上清不足3mL，以4000rpm离心1min）。 取3mL上清液到小玻璃杯中，用电吹风（不要过高温度）或60氮(空)气吹干。 溶剂吹干后，滴加4滴（约200L）样品稀释液溶解残留物，震荡使其混匀，待检。,（三）黄曲霉毒素B1快筛试剂盒使用方法,【样品前处理】 食用油 准确称取2.0g油样于15mL离心管中。 准确加入8mL的正己烷及4mL纯净水，盖紧离心管盖，充分震荡3min，小心吸去上层液体。 再加入4mL乙酸乙酯，盖紧离心管盖，充分震荡5min，静置或4000 rpm离心1min。 转移3mL上清液到一个干净的小玻璃杯或其它小容器中，用电吹风（不要过高温度）吹干或60氮(空)气

28、吹干。 溶剂吹干后，滴加4滴（约200L）样品稀释液溶解残留物，震荡使其混匀，待检。,（三）黄曲霉毒素B1快筛试剂盒使用方法,【样品前处理】 酱油、醋 准确量取2mL样品于15mL离心管中。 准确加入4mL乙酸乙酯，盖紧离心管盖，充分震荡5min，静置12min，让待测液分层。 将上清液用吸管全部转移到另一个15mL离心管中。 加入2mL 50mM Na2CO3溶液（若是米醋，用NaOH溶液调节pH值到6.0-8.0之间），充分震荡3min。 转移3mL上清液到一个干净小玻璃杯或小容器中，用电吹风（不要过高温度）吹干或60氮(空)气吹干。 溶剂吹干后，滴加4滴（约200L）样品稀释液溶解残留物

29、，震荡使其混匀，待检。,（三）黄曲霉毒素B1快筛试剂盒使用方法,【样品前处理】 发酵酒 准确量取2mL样品于15mL离心管中。 准确加入4mL乙酸乙酯，盖紧离心管盖，充分震荡5min，静置12min，让待测液分层。 转移3mL上清液到一个干净的小玻璃杯或其它小容器中，用电吹风（不要过高温度）吹干或60氮(空)气吹干。 溶剂吹干后，滴加4滴（约200L）样品稀释液溶解残留物，震荡使其混匀，待检。,（三）黄曲霉毒素B1快筛试剂盒使用方法,（三）黄曲霉毒素B1快筛试剂盒使用方法,【样品检测】 使用前将检测卡和待检样本溶液恢复至室温。 从包装袋中取出检测卡，将检测卡平放。 用移液枪移取100L待测液于

30、微孔中，反复吹打35 次，混合均匀，静置5min，用一次性吸管转移液体至加样孔中。 加样后开始计时，58min即可观察结果，10min后判读无效。,（三）黄曲霉毒素B1快筛试剂盒使用方法,筛查结果判定 阴性（）：若质控线（C线）和检测线（T线）均显色，表示待测样品中不含黄曲霉毒素B1 或者低于检测下限。 阳性（）：若仅质控线（C线）显色，检测线（T线）不显色，表示待测样品中可能含黄曲霉毒素B1 。 无效：若质控线（C 线）不显色，表示存在不正确的操作过程或检测卡已变质失效。,试剂盒操作关键点 检测卡从铝膜袋中取出后，应于1h内进行实验，置于空气中时间过长，检测卡会受潮失效。 实验环境应保持一定

31、湿度、避风，避免在过高温度下进行实验。,（三）黄曲霉毒素B1快筛试剂盒使用方法,八、三聚氰胺快速检测方法简介,主要内容,概述 监督检查重点品种 快筛试剂盒使用方法,（一）概述,三聚氰胺是一种三嗪类含氮杂环有机化合物。由于其含氮量高达66%，部分违法分子为了掩盖产品蛋白质不足的缺陷，非法添加三聚氰胺，虚高产品蛋白质含量，造成蛋白质含量的“假达标”。 长期摄入三聚氰胺会造成生殖、泌尿系统的损害，膀胱、肾部结石，并可进一步诱发膀胱癌。 三聚氰胺作为非食用物质，2008年被列入我国第一批“食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂品种名单”。,（一）概述,食品中三聚氰胺的最大残留限量 关于三聚

32、氰胺在食品中的限量值的公告(2011年第10号),相关检测标准,（一）概述,重点抽检对象 乳制品及含乳制品 植物蛋白饮料 乳饮料 其他具有蛋白质限量要求的食品,（二）监督检查重点品种,适用范围：适用于液态奶、奶粉中三聚氰胺残留的快速筛查。 原理：应用竞争抑制免疫层析的原理，样本中的三聚氰胺在层析的过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体结合，抑制了抗体和包被膜检测线（T线）上的三聚氰胺偶联物，从而导致检测线颜色的变化。当样本中没有三聚氰胺或者低于三聚氰胺检测限时，T线有明显的显色；当样本中的三聚氰胺残留高于检测线时，T线不会显色；无论样本中是否含有三聚氰胺，C线均会显色。,（三）三聚氰胺快筛试剂盒

33、使用方法,筛查操作步骤 【试剂配制】 将样品稀释液（10）用去离子水或蒸馏水按（1:9）体积进行稀释。 【样品前处理】 液体奶：吸取1mL牛乳至样品杯中，加入1mL 样品稀释液，混匀即为待测液。 奶粉：称取1g奶粉至样品杯中，加入9mL 样品稀释液，混匀即为待测液。,（三）三聚氰胺快筛试剂盒使用方法,（三）三聚氰胺快筛试剂盒使用方法,【样品检测】 使用前将检测条和待检样本溶液恢复至室温（1037）。 从包装袋中取出检测卡，将检测卡平放，用滴管滴加3 滴待测样品溶液于加样孔中。 加样后开始计时，58 min即可观察结果，10min 后判读无效。,（三）三聚氰胺快筛试剂盒使用方法,筛查结果判定 阴

34、性（）：二条红色反应线：检测区（T）及对照区（C）各出现一条红色反应线，表示样品中不含三聚氰胺或者低于检测下限。 阳性（）：一条红色反应线：仅在对照区（C）出现一条红色反应线。表示样品中可能含有三聚氰胺。 无效：对照区（C）无红色反应线出现，表示测试错误或无效。在此情况下，应再次仔细阅读说明书，并用新的检测卡重新测试。,试剂盒操作关键点 检测条从铝膜袋中取出后，应于1h内进行实验，置于空气中时间过长，检测卡会受潮失效。 实验环境应保持一定湿度、避风，避免在过高温度下进行实验。 检测卡在常温下保存，谨防受潮，低温下保存的检测卡应平衡至室温方可使用。,（三）三聚氰胺快筛试剂盒使用方法,九、孔雀石绿

35、快速检测方法简介,主要内容,概述 监督检查重点品种 快筛试剂盒使用方法,（一）概述,孔雀石绿是杀菌和杀寄生虫的化学制剂，可用作治理鱼类或鱼卵的寄生虫、真菌或细菌感染，对鱼体水霉病和鱼卵的水霉病有特效，对其他一些细菌性疾病都有很好的效果。 孔雀石绿进入水生动物体内后，会快速代谢成脂溶性的无色孔雀石绿。孔雀石绿具有潜在的致癌、致畸、致突变的作用。 我国农业部已将孔雀石绿列为水产上的禁药，但由于没有低廉有效的替代品，孔雀石绿在水产养殖中的使用屡禁不止。,相关检测标准,（一）概述,重点抽检对象 表面发绿，严重的呈现青草绿色，鱼鳍条显现白色，通体色泽发亮的水产品 养殖过程、运输过程、暂养存放过程中的养殖

36、水,（二）监督检查重点品种,适用范围：适用于水产中孔雀石绿的定性快速现场检测。 原理：应用了竞争抑制免疫层析的原理，样本中的孔雀石绿在层析的过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体结合，抑制了抗体和包被膜检测线（T线）上的孔雀石绿偶联物，从而导致检测线颜色的变化。当样本中没有孔雀石绿或者低于孔雀石绿检测限时，T线显色明显强于C线或与C线显色一致；当样本中的孔雀石绿残留高于检测线时，T线不会显色或明显弱于C线；无论样本中是否含有孔雀石绿，C线均会显色。,（三）孔雀石绿快筛试剂盒使用方法,筛查操作步骤 【样品前处理】 用均质器均质组织样本。 称取1.0g均质样品至10mL新聚苯乙烯离心管中，加入1mL

37、去离子水，涡旋2min，加入100L孔雀石绿提取剂1，再加入1瓶孔雀石绿提取剂2，涡旋2min，室温（20-25）离心5min。 取上清液1mL上清液至10mL新聚苯乙烯离心管中，加入50L孔雀石绿氧化剂，涡旋15s，于5060水浴氮气或空气流下吹干。 加入0.3mL样品复溶液涡动溶解3min，取100L用于分析。,（三）孔雀石绿快筛试剂盒使用方法,（三）孔雀石绿快筛试剂盒使用方法,【样品检测】 从原包装中取出试剂桶，打开后取出所需数目的微孔试剂和试纸卡，并做好标记。请在60min内尽快使用。所需微孔试剂取出后，请立即盖好试剂桶盖，防止受潮。 用微量移液器吸取100L待检样本溶液于微孔中，缓慢

38、抽吸且充分与微孔中试剂混匀。 室温（2025）孵育3min 后，吸取混匀液约100L垂直滴于加样孔（S 孔）中。 液体流动时开始计时，反应5min，根据示意图判定结果，其他时间判定无效。,（三）孔雀石绿快筛试剂盒使用方法,筛查结果判定 阴性（）：T线显色强于C线显色或与C线显色无明显差异，表示水产样本中不含有孔雀石绿或其浓度低于检测限。 阳性（）：T 线显色明显弱于C 线显色或T 线不显色，表示水产样本中孔雀石绿浓度等于或高于检测限。 无效：未出现C线，表明不正确的操作过程或试纸卡已失效。在此情况下，应再次仔细阅读说明书，并用新的试纸卡重新测试。,试剂盒操作关键点 实验过程中，用红色标记笔进行

39、标记，黑色标记笔含有结晶紫，会对该实验造成污染。 操作时勿触摸试纸卡显色区。 微孔试剂取出后，请立即盖好试剂桶盖子。如有用不完的微孔，请立即用微孔盖盖住剩余微孔，并放回试剂桶中密封保存，以免受潮。,（三）孔雀石绿快筛试剂盒使用方法,十、瘦肉精快速检测方法简介,主要内容,概述 监督检查重点品种 快筛试剂盒使用方法,（一）概述,瘦肉精是一类药物的统称，常见成分有盐酸克仑特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇。大剂量用于饲料可促进动物生长，减少脂肪含量，提高瘦肉率。 食用含瘦肉精的猪肝0.25kg以上者，会出现恶心、头晕、四肢无力、手颤等中毒症状。含瘦肉精的食品对心脏病、高血压患者、老年人的危害更大。 我国农业

40、部1997年发文禁止瘦肉精在饲料和畜牧生产中使用。2002年，我国全面禁止食用动物使用激动剂类药物作为饲料添加剂（农业部176号、193号公告、1519号条例）。,相关检测标准,（一）概述,重点抽检对象 脂肪层特别薄、肉色异常鲜艳的畜肉 私宰肉 原料来源可疑的肉制品,（二）监督检查重点品种,适用范围：动物尿样、组织（肌肉、肝脏、肾脏等）中克伦特罗、莱克多巴胺及沙丁胺醇残留快速定性筛查。 原理：应用竞争抑制免疫层析的原理，样本中的瘦肉精在层析的过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体结合，抑制了抗体和包被膜检测线（T线）上的瘦肉精偶联物，从而导致检测线颜色的变化。当样本中没有瘦肉精或者低于瘦肉精检测

41、限时，T线有明显的显色；当样本中的瘦肉精残留高于检测线时，T线不会显色；无论样本中是否含有瘦肉精，C线均会显色。,（三）瘦肉精快筛试剂盒使用方法,（三）瘦肉精快筛试剂盒使用方法,筛查操作步骤 【样品前处理】 尿样：直接检测，如有浑浊请先离心取上清液。 组织样： 1、将动物组织样品用肉搅碎机捣碎，或用刀剁碎（浆状）； 2、称取5.0g捣碎的组织样品，装入5mL的冷冻管中，拧紧管盖（不要让水进入管子内）； 3、将装有样品的冷冻管在沸水中煮10分钟后（肉熟透为准）取出冷却至室温备用。,（三）瘦肉精快筛试剂盒使用方法,【样品检测】 使用前将检测条和待检样本溶液恢复至室温。 尿样：加入300L（塑料吸管

42、12滴）到1.5mL离心管中，待测。组织样：加入100L稀释液（塑料吸管4滴）到1.5mL离心管中，再加入200L待测样品（塑料吸管8滴），混匀待测。 从包装筒中取出检测条，用手捏住检测条上端的蓝色手柄端，将试纸条标“MAX”一端浸入到待测液中，8min后取出观察结果，10min后判读无效。,（三）瘦肉精快筛试剂盒使用方法,筛查结果判定 阴性（）：二条红色反应线：检测区（T）及对照区（C）各出现一条红色反应线，表示样品中不含瘦肉精或者低于检测下限。 阳性（）：一条红色反应线：仅在对照区（C）出现一条红色反应线。表示样品中可能含有瘦肉精。 无效：对照区（C）无红色反应线出现，表示测试错误或无效。

43、在此情况下，应再次仔细阅读说明书，并用新的检测卡重新测试。,试剂盒操作关键点 检测条从铝膜袋中取出后，应于1h内进行实验，置于空气中时间过长，检测卡会受潮失效。 实验环境应保持一定湿度、避风，避免在过高温度下进行实验。 检测卡在常温下保存，谨防受潮，低温下保存的检测卡应平衡至室温方可使用。,（三）瘦肉精快筛试剂盒使用方法,十一、罂粟壳快速检测方法简介,主要内容,概述 监督检查重点品种 快筛试剂盒使用方法,（一）概述,罂粟壳为罂粟科植物罂粟的干燥果壳，在我国属于国家管制药品。不法商家为了牟取暴利，在食品中添加罂粟壳及其水浸物，使食物味道鲜美，也容易让人上瘾。 罂粟壳含有吗啡、可待因、罂粟碱、那可

44、汀、蒂巴因等生物碱，易使人体产生依赖性而上瘾，对人体肝脏、心脏有一定的毒害作用。长期食用含有罂粟壳的食物，会出现发冷、出虚汗、乏力、面黄肌瘦、犯困等症状，严重时可能对神经系统、消化系统造成损害。 2008年，卫生部发布食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂品种名单（第一批），罂粟壳被列为非食用物质。,相关检测标准,（一）概述,重点抽检对象 火锅、火锅底料、火锅调料 麻辣烫 烧烤食品 卤水汁、调味酱料、酱汁 风味小吃（面皮、洋杂汤等）,（二）监督检查重点品种,适用范围：适用于火锅、火锅底料、火锅调料、卤水汁、各种汤料、烧烤汁等食品中添加罂粟壳的快速现场检测。 原理：应用竞争抑制免疫层

45、析的原理，样本中的罂粟壳在层析的过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体结合，抑制了抗体和包被膜检测线（T线）上的罂粟壳偶联物，从而导致检测线颜色的变化。当样本中没有罂粟壳或者低于罂粟壳检测限时，T线有明显的显色；当样本中的罂粟壳残留高于检测线时，T线不会显色；无论样本中是否含有罂粟壳，C线均会显色。,（三）罂粟壳快筛试剂盒使用方法,筛查操作步骤 【样品前处理】 液体样品（清汤或含油脂较少的清汤、面汤等） 直接取火锅汤料静置，除去上层油脂层，用一次性注射器吸取吸取下层清液，配用孔径为0.45m的微孔滤膜过滤。 若样品溶液太浓或太稠，无法上样，可加等体积水（1份火锅汤料+1份水）稀释后，静置，除去上

46、层油脂层，吸取下层清液待测。,（三）罂粟壳快筛试剂盒使用方法,筛查操作步骤 【样品前处理】 固体样品或半固体样品（油脂较多且浑浊的火锅底料等） 取火锅底料约5g于样品瓶中，加水10mL，振摇1min后静置； 除去上层油脂层，用一次性注射器吸取下层液体，配用孔径为0.45m的微孔滤膜过滤。 如果处理后的溶液太浓或太稠，无法上样，可再加入等体积水稀释后，静置，除去上层油脂层，吸取下层清液待测。,（三）罂粟壳快筛试剂盒使用方法,（三）罂粟壳快筛试剂盒使用方法,【样品检测】 使用前将检测卡和待检样本溶液恢复至室温。 从包装袋中取出检测卡，将检测卡平放。 用一次性滴管吸取23 滴处理好的火锅底料样本到检

47、测卡的加样孔中。 加样后开始计时，58min即可观察结果，8min 后判读无效。,（三）罂粟壳快筛试剂盒使用方法,筛查结果判定 阴性（）：若质控线（C线）和检测线（T线）均显色，表示待测样品中不含罂粟壳（吗啡）。 阳性（）：若仅质控线（C线）显色，检测线（T线）不显色，表示待测样品中含罂粟壳（吗啡）。 无效：若质控线（C 线）不显色，表示存在不正确的操作过程或检测卡已变质失效。,试剂盒操作关键点 检测卡从铝膜袋中取出后，应于1h内进行实验，置于空气中时间过长，检测卡会受潮失效。 实验环境应保持一定湿度、避风，避免在过高温度下进行实验。,（三）罂粟壳快筛试剂盒使用方法,十二、农药残留快速检测方法简介,主要内容,概述 监督检查重点品