(三)网织红细胞计数.ppt

1、实验性网织红细胞计数：第一，实验原理网织红细胞胞浆中有嗜碱性核糖核酸物质。活体用亮焦油蓝或亚甲蓝染色后，核糖核酸中的负电荷基团与带正电荷的有色基团结合，颗粒凝聚成淡蓝色或蓝黑色的点状、丝状或网状结构，可在显微镜下识别。对1000个红细胞中的所有网织红细胞进行计数，并直接报告它们的百分比，或者报告它们作为红细胞计数结果的绝对值。网织红细胞(Ret)是从去核晚期红细胞到成熟红细胞的过渡细胞，成熟红细胞尚未完全成熟，嗜碱性核糖核酸保留在细胞质中。嗜碱性物质和染料凝结成蓝色粒子，这些粒子连接成线，线连接成网，因此得名。分类：丝球型、网型、破网型和颗粒型。(，)，网织红细胞，计数方法，1。普通光学显微镜

2、：活体染色后的上推显微镜。网织红细胞计数方法：荧光染色后用流式细胞仪计数。试剂和设备。试剂10g/L亮焦油蓝醇(水)溶液2。毛细血管采血设备、小试管、载玻片、载玻片、显微镜、香焦油、二甲苯和擦镜纸、直径约为20毫米(略小于目镜内径)的密勒窥视盘或圆形纸板(在中心开一个边长为3毫米的菱形或方形孔，放在目镜光阑处，通过缩小视野法进行计数)1。染色：在载玻片的一端加入1滴亮焦油蓝酒精溶液，自然干燥备用，取一滴外周血或抗凝剂，与干燥的染料混合，然后覆盖在两张载玻片上(玻片法)；取染料溶液2，用试管法滴入试管中，加入2滴血液，混合均匀，密封，等待15分钟以上。2.推膜：取1滴混合溶液在载玻片的一端，将其

3、推成一层薄而均匀的血膜。3.用低倍镜浏览，选择红细胞分布均匀、网织红细胞染色良好的部位(身体和尾巴交界处)。将香焦油滴转移到油镜上，计数米勒窥视盘下的小方块和大方块的红细胞数、A、3、1、B，将米勒窥视盘放入显微镜目镜中，根据窥视盘中的大方块和小方块的9比1的比例计算红细胞数和Ret数。4。计算，1。米勒方法：利钠百分比(%)=(大方块中的利钠总数)/(小方块中的红细胞总数9)100% 2。直接计数法：利钠百分比(%)=多字段利钠总数/多字段红细胞总数100%，5 2。染色时间必须足够。混合后，不能立即推动载玻片。当室温较低时，染色时间应适当延长，并应涂上另一张载玻片以防止蒸发。3.染液与血液

4、的比例应为1: 1，贫血时应适当添加血液。4.涂片厚度均匀且合适，呈拱形移动，并计算多个区域。5.试剂应定期重新配制，以避免变质和沉淀。6.从变性的珠蛋白小体中区分出来；6.参考值：成人0.005-0.015(0.5%-1.5%)，新生儿0.02-0.06(2%-6%)，成人0.005-0.075(0.5%-7.5%)，绝对值低于5109/升可作为急性再生障碍性贫血的辅助诊断指标。失血和溶血性贫血患者的网织红细胞明显高于正常人。治疗前，营养不良性贫血的网织红细胞可保持正常，略有增加或减少。(2)疗效评价网织红细胞反应：缺铁性贫血或巨幼细胞性贫血用铁、维生素B12或叶酸治疗23天后，网织红细胞计数开始上升，710天达到最高值(约10%)；两周后，它逐渐下降到正常水平，红细胞和血红蛋白开始增加。骨髓移植和促红细胞生成素治疗后：如果骨髓开始恢复造血功能，马绍尔群岛和网织红细胞计数增加。(3)放、化疗监测在接受放、化疗后，如果出现骨髓抑制，早期HFR和MFR下降，然后检测到网织红细胞减少。停止放化疗并恢复骨髓功能后，上述指标依次升高。它可以指导临床医生及时调整治疗方案，避免严重的骨髓抑制。RPI=患者网织红细胞(%)/2 *患者HCT/正常人HCT(男0.45，女0.40)临床应用：3。提示溶血性贫血或急性出血性贫血；网织红细胞生成指