NG-MAST在淋球菌耐药监测工作中的应用 - 中国疾病预防控制中心 ....ppt

1、淋球菌耐药机制的初步研究以及多抗原测序分型（NG-MAST）在耐药监测工作中的应用,-中国CDC性病控制中心 参比实验室 陈绍椿,研究背景 耐药机制的初步研究 NG-MAST在淋球菌耐药监测工作中的应用研究,概 要,高发病率，且在不断增长 诊断、报病的不足导致发病率的低估 严重危害健康：不孕不育，异位妊娠，增加HIV感染几率 抗生素耐药！,淋病全球性公共卫生问题,World Health Organization (WHO). Global incidence and prevalence of selected curable sexually transmitted infections2

2、008. Geneva, Switzerland; 2012.,Penicillins Tetracyclines Quinolones (Ciprofloxacin) Macrolides (Azithromycin) Spectinomycin Cephalosporins (Ceftriaxone,cefixime),淋病的治疗药物,头孢菌素敏感性下降和临床治疗失败病例的出现,World Health Organization (WHO). Antimicrobial resistance global report on surveillance. Geneva, Switzerlan

3、d; 2014.,口服类Cefixime治疗失败病例： Japan,1 Norway,2 United Kingdom,3 Austria,4 France,5 Canada,6 and South Africa.7 头孢曲松治疗淋菌性咽炎失败病例：Japan,8,9 Australia,10-12 Sweden,13 and Slovenia14,治疗失败案例汇总,1. Yokoi S et al. Emerg Infect Dis 2007; 13: 1275-1277. 2. Unemo M et al. Euro Surveill 2010; 15. 3. Ison CA et al.

4、 Euro Surveill 2011; 16. 4. Unemo M et al. Euro Surveill 2011; 16: pii= 19998. 5. Unemo M et al. Antimicrobial Agents Chemother 2012; 56: 1273-1280. 6. Allen VG et al. JAMA 2013; 309: 163-170. 7. Lewis DA et al. J Antimicrob Chemother 2013; 68: 1267-1270. 8. Ohnishi M et al. Emerg Infect Dis 2011; 1

5、7: 148-149.,9. Ohnishi M et al. Antimicrob Agents Chemother 2011; 55: 3538-3545. 10. Tapsall J et al. J Med Microbiol 2009; 58: 683-687. 11. Chen MY et al. J Antimicrob Chemother 2013; 68: 1445-1447. 12. Read PJ et al. Sex Health 2013; 10: 460-462. 13. Unemo M et al. July 2010. Euro Surveill 2011; 1

6、6. 14. Unemo M et al. Euro Surveill 2012; 17. 15. Camara J et al. J Antimicrob Chemother 2012; 67: 1858-1860.,超级淋球菌的出现,第一株高度耐头孢曲松的“超级淋球菌”H041： XDR, MLST7363, NG-MAST ST4220 咽部感染，1g头孢曲松治疗失败,MIC 1-2 mg/L 在法国和西班牙也发现了对头孢菌素高度耐药的淋球菌MLST1901 NG-MAST ST1407,URGENT!,应对策略,1.深入了解耐药机制 2.加强淋球菌耐药监测： （1）加强已有淋球菌耐药监

7、测网络 （2）分子流行病学方法应用于淋球菌耐药监测 （3）淋球菌临床治疗失败病例的筛查,中国的应对策略,耐药机制的初步研究,Unemo M, Nicholas RA. Emergence of multidrug-resistant, extensively drug-resistant and untreatable gonorrhea. Future Microbiol 2012; 7: 1401-1422.,淋球菌耐药的可能机制,头孢低敏耐药菌株（MIC0.25g/ml）的特征,表1. MIC0.25 g/ml 菌株相关基因特征,头孢低敏或耐药相关基因突变筛查,CROS, isolate

8、s with susceptibility to ceftriaxone; CROI/R, isolates with decreased susceptibility or resistance to ceftriaxone; A, alanine; WT, wild-type; T, threonine; V, valine; G, glycine; S, serine; P, proline; L, leucine; D, aspartic acid; I, isoleucine; H, histidine; Y, tyrosine; K, lysine; N, asparagine;

9、*P0.05 for t-test (comparison between two groups) , ANOVA (comparison among three or more groups) or chi-square test.,表2. 所有菌株根据不同基因突变分组后MIC均值比较及低敏耐药与特定基因相关性研究,NG-MAST在淋球菌耐药监测工作中的应用,1、追踪特定菌株的传播（如耐药菌株） 2、追踪特定人群中菌株的传播（如MSM人群) 3、监测菌株的爆发流行 4、确定治疗失败病例和重复感染病例,NG-MAST分型的意义,一、分型表现： 1、区分度 2、结果可比性 二、操作的可行性： 1

10、、耗时 2、费用 3、操作难易程度：硬件+软件,NG-MAST分型的优点,NG-MAST分型过程,临床分离株,DNA提取,porB基因PCR,porB基因测序,根据标准序列选取490bp,NG-MAST网站获取等位基因号,tbpB基因PCR,tbpB基因测序,根据标准序列选取390bp,NG-MAST网站获取等位基因号,获取ST型别,MIC值与NG-MAST型别的对应关系,19,表3. 某监测点不同MIC值菌株的NG-MAST型别分布,全国不同监测点2012年度NG-MAST型别分布,表4. 全国不同监测点NG-MAST优势型别分布,porB-908, tbpB-110: ST1407 同一监测点两例，都为男性 涂片阳性，培养阳性 具有Mosaic penA结构，penA A501-WT, G542-WT 头孢曲松MIC-0.016, MIC-0.060，PPNG，环丙沙星耐药，大观霉素敏感,ST1407菌株的发现,总 结,1. 淋球菌头孢低敏耐药菌株出现，需要进行跟踪监测。 2.头孢低敏耐药与以下氨基酸替换有关：A102D