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文档简介

1、SNAP-tag蛋白标记技术在生物学领域的应用研究进展，生物物理学报纸2014年六月30卷4号：251-263，背景，蛋白质是细胞的基本组成部分，是生命功能的实施者。研究蛋白质的结构、功能及细胞内运动特性、相互作用、化学微环境等，对理解细胞复杂的生命过程至关重要。1.绿色荧光蛋白(green fluorescent protein，GFP)的发现和应用是开发活细胞蛋白特异性标记方法的里程碑，它不添加任何基质，释放荧光，与荧光成像技术相结合，实现活细胞内蛋白质的视觉监控。缺点：GFP的荧光光谱比较单一，发光具有氧依赖性，响应缓慢，灵敏度不高等。2.SNAP-tag蛋白标记技术克服了这一缺点，提高

2、了特异性、稳定性和配体的多样性，在蛋白质标记等多个领域得到了越来越广泛的应用。SNAP-tag的设计原理，从SNAP-tag蛋白到反应点反立山亲和攻击O6，除去修饰的苄基鸟氨酸的苄基、鸟氨酸结构，形成了反立山和苄基牙齿稳定的硫醚共价键，实现了对靶蛋白的共价键。SNAP-tag的配体和功能，优点，SNAP-tag技术的应用，SNAP-tag在细胞内蛋白质的性质和功能研究中的应用，1 .蛋白质-蛋白质相互作用研究(1)SNAP-tag荧光共振能量传递技术，(2)SNAP-tag参数可选交叉技术，Johnsson利用SNAP和BG之间不可逆转的共价键特性设计了具有两个BG结构的交联剂，具有特异性，稳

3、定的交叉两个SNAP，(3)SNAP-tag蛋白片段互补分析技术，SNAP-tag蛋白由两个域组成，Mie等将其分裂为nSNAP和cSNAP蛋白片段的组装，与可相互作用的两个蛋白质融合，快速恢复与SNAP-tag基质的反应活性。2 .蛋白质位置追踪、运输追踪监测和力学分析，细胞内二氢叶酸还原酶经常融合在线粒体目标序列中，用于研究线粒体输入的力学过程，Krayl等构建了细胞色素2-DHFR-SNAP-tag融合蛋白，分析了线粒体前体蛋白的运输过程。3 .体内蛋白质半衰期监测、展望、SNAP-tag技术的缺陷：1在以后的研究中，以生物学研究为基础，基于功能性配体分子的设计，发挥SNAP-tag技术的独

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