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文档简介
1、2020年8月3日,真菌,第1章,白色念珠菌,2020年8月3日,真菌,2,焦点1。白色念珠菌的生物学特性。白色念珠菌的微生物检验,2020年8月3日,真菌,3。真菌学概述,概念:它是一种典型的细胞核和完善的细胞器,2020年8月3日,真菌,4,真菌的形态特征,(1)单细胞真菌是圆形的,如酵母。(二)多细胞真菌由菌丝和孢子组成,称为丝状真菌或霉菌。菌丝和孢子的形态因细菌而异,这是鉴别真细菌的重要依据。孢子分为许多种类,如叶状体、分生孢子和孢子囊。2020/8/3,真菌,5,单细胞真菌酵母:孢子,无菌丝酵母:出芽孢子,假菌丝多细胞真菌丝状真菌(霉菌):孢子和菌丝及孢子不同于细菌,这是鉴定真菌的重
2、要依据。孢子分为许多类型,如叶状体、分生孢子和子囊孢子。真菌形态特征,2020年8月3日,真菌,6,单细胞真菌形态,真菌,7,酵母样白色念珠菌,孢子,假菌丝,2020年8月3日,真菌,8,多细胞真菌形态,2020年8月8日,2。酵母样菌落,如白色念珠菌,形成假菌丝并延伸到培养基中。霉菌菌落:它是多细胞真菌的菌落。菌落是棉絮,产生不同的色素,如皮肤癣菌。2020/8/3,真菌,10,酵母样菌落,2020/8/3,真菌,11,酵母样菌落,2020/8/3,真菌,12,霉菌样菌落,2020/8/3,真菌,13,培养特性,真菌培养要求适宜的酸碱度为4.0-6.0。菌落是一种鉴定真菌的方法。注意以下几点
3、:菌落性质:酵母或霉菌;菌落大小,致病真菌菌落小,而条件致病真菌菌落大;菌落颜色病原真菌颜色浅,污染真菌颜色深。致病真菌菌落下沉,有时会使培养基破裂;被污染的真菌菌落不会下沉,也很少会导致开裂。真菌依靠孢子和菌丝进行无性或有性繁殖,2020/8/3,真菌14,变异抗性,易改变形状,培养性状和毒性等。对干燥、紫外线和一般消毒剂有较强的抵抗力,对热敏感,菌丝和孢子在601小时内被杀死,对2%石炭酸、0.1%氯化汞、2.5%碘酊或10%甲醛敏感,2020年8月3日,真菌15种,致病性和免疫性,致病性1种。致病真菌感染:浅部真菌:角蛋白酶,机械刺激,代谢产物深部真菌:慢性肉芽肿,组织溃疡2。条件致病真
4、菌:念珠菌属。3.真菌过敏性疾病。真菌中毒。真菌毒素和肿瘤免疫天然免疫获得性免疫:体液免疫2020年8月3日,真菌,16,真菌感染的病原学诊断,临床标本收集类别:1皮肤角质物质:头发、指甲、头皮屑等。各种分泌物和排泄物:生殖道分泌物、耳垢、痰液、粪便、尿液等。血液和体液:体液包括胸腔积液、腹水、脑脊液、淋巴穿刺液等。4脓和渗出物。2020/8/3,真菌,17,标本采集注意事项:1。应采集不同的临床标本,以适应不同的真菌感染。如果怀疑是浅部真菌感染,如体癣,则应刮掉病灶边缘的痂和头皮屑,并从癣处取病。深部真菌感染应采取血液、脑脊液、脓液等。2.服药前收集标本。一般真菌标本必须在服药前采集,已服药
5、者在采集标本前应停止服药一段时间。3.采集的标本数量应为5毫升血液和脑脊液、20毫升胸膜液、两个头皮屑标本和两个活组织(一个病理检查、一个显微镜检查和培养)。4严格无菌操作和消毒处理,特别是采集血液和脊髓液样本,避免杂菌污染。5.收集标本并立即送去检查。深部真菌标本的最长时间不得超过2h。2020/8/3,真菌,18,检验程序P354,检验方法,直接检验,非染色和显微镜检查,2020/8/3,真菌,19,培养基的选择:直接法,试管法,大规模培养,小规模培养,真菌的鉴定生化反应用于主要的深部感染真菌如念珠菌属。和隐球菌属。1.糖(酒精)发酵试验37孵育,观察糖发酵。2.碳源同化实验。将含有细菌的
6、生理盐水与熔化的固体同化碳源培养基(45)混合,然后分别向培养基中加入糖,并在25下进行培养。如果24小时后没有变化,可以重复添加糖。如果它周围有一个增长圈,就不会有增长。3.同化氮源的试验与同化碳源的试验相同,但应使用无氮源的培养基,并添加硝酸钾代替糖。4.明胶液化试验,尿素分解试验,淀粉样化合物的测定。牛奶分解试验,2020年8月3日,真菌,20。乳胶凝集试验、酶联免疫吸附试验和半定量放射免疫测定法常用于抗原检测。应该设置控件来防止假阳性和假阴性。动物实验的目的是分离致病真菌,确定真菌菌株的致病性,并研究药物对真菌的作用。例如,当念珠菌属。接种于家兔或小鼠后,肾脏明显肿胀,肾皮质出现白色脓
7、肿。核酸检测包括核酸碱基序列分析、限制性片段长度多态性(RFLP)、Southern印迹分析、脉冲场凝胶电泳、聚合酶链反应指纹图谱、随机扩增多态基因(RAPD)和特殊片段测序。2020/8/3,真菌,21,主要病原真菌,可分为表面感染真菌,表面感染真菌,皮肤癣菌属真菌,皮下组织真菌,深部感染真菌,新生隐球菌,条件病原真菌,念珠菌,2020/8/3,真菌,22,深部感染真菌,其侵入皮下组织和内脏。大多数能引起慢性肉芽肿性炎症、溃疡和坏死的深部感染真菌可分为两类:1。病原真菌:这些真菌不存在于正常人体内,一旦侵入人体,就会引起疾病,如组织胞浆菌病、球虫病、芽生菌病等。这在中国是外源性的和罕见的;2
8、.条件致病真菌:它们是人体正常菌群的成员,只有当人体抵抗力下降时才会生病,如新生隐球菌、白色念珠菌、曲霉菌和毛霉。2020/8/3,真菌,23,念珠菌,俗称念珠菌,有81种,其中有11种对人体有致病性:白色念珠菌是最常见的致病菌。此外,热带假丝酵母、克柔假丝酵母和光滑假丝酵母也引起更多的疾病。白色念珠菌,又称白色念珠菌,广泛存在于自然界,也存在于正常人的口腔、上呼吸道、肠道和阴道。一般来说,正常生物体内白色念珠菌的数量很少,不会引起疾病。它是一种条件致病菌。2020年8月3日,真菌,24,1微生物特征:白色念珠菌为圆形或椭圆形,直径为2-4m。革兰氏阳性。在组织中可以看到芽孢子和假菌丝,孢子可
9、以延伸到芽管中,如果不与母细胞分离,就会形成假菌丝。2020年8月3日,25岁的真菌在普通琼脂、血琼脂和沙培养基上生长,营养需求低。有氧,在室温或37甚至42下生长良好。菌落呈酵母样,大量营养假菌丝向下生长,表面光滑,呈灰白色或奶油色,有酵母味。如果时间长了,菌落就会长成蜂窝状。厚膜孢子可以在吐温-80培养基中生长。沙氏坡,普通板,血板,2020/8/3,真菌,26,2致病性和免疫性。这种细菌能侵入人体的许多部位,人体也能产生免疫力。过敏,2020/8/3,真菌,27,3微生物检验1。标本采集:不同的疾病导致不同的标本。2.检查程序P3543。检查方法及鉴别,1)直接镜检:取脓液、痰液及局部炎
10、症分泌物直接涂片。有些标本需要先用氢氧化钾消化,然后在革兰氏染色后在显微镜下检查。革兰氏阳性(染色不均匀),显微镜下可见圆形或椭圆形菌体或孢子和假菌丝,厚膜孢子少见。2020年8月3日,真菌,28,2)培养检查:将标本接种在沙氏培养基上,在25或37培养12天后,可出现乳白色酵母样菌落。显微镜下观察到假菌丝和出芽孢子。2020年8月3日,真菌,29,3)鉴定试验芽管形成试验:念珠菌属。接种在0 . 20 . 5毫升血清中,并在37孵育1.5小时。白色念珠菌可以形成芽管,而其他念珠菌不形成芽管。芽管,芽管,2020/8/3,真菌,30,厚膜孢子形成试验:将白色念珠菌接种于玉米粉培养基25中,孵育
11、1-2天后,白色念珠菌在菌丝的顶部、侧边或中部形成厚膜孢子。厚膜孢子,2020/8/3,真菌,31,糖同化和糖发酵试验:所有发酵糖都能同化糖,因此只需要进行那些无酵糖同化试验。念珠菌属。接种到糖发酵管中,培养25天,观察23天,但是对于非发酵或弱发酵管,可以延长到10天或24周。观察酵母是否生长或液体培养基是否变混浊。目前,商用显色培养基可以快速鉴定白色念珠菌和其他念珠菌。2020年8月3日,真菌,32,TZC试验:将白色念珠菌接种在含有0.005苯并三唑氯化物的萨宝培养基中,培养2225和2448小时。白色念珠菌不变色或仅呈红色,而其它白色念珠菌或酵母菌呈红色或深红色(还原为红色三苯基甲基)
12、。血清学试验:取患者血清进行酶联免疫吸附试验、免疫印迹等检测白色念珠菌抗原。核酸检测:用聚合酶链反应扩增白色念珠菌的核酸分子,然后用分子探针进行检测,具有良好的灵敏度和特异性。动物试验:2020/8/3,真菌,33,新生隐球菌,也称为组织分解酵母,是土壤、鸽子、牛奶和水果中的腐生细菌,也可存在于人的口腔中。它能侵袭人类和动物,通常是外源性感染,但也可能是内源性感染。对人类来说,它通常是一种条件致病菌。2020/8/3,真菌,34,大球形,直径高达520um,厚囊,强折光力,由于难以用普通染料染色而难以找到。它被称为隐球菌。用墨汁阴性显影法进行显微镜检查,可以看到透明的胶囊包裹着细菌细胞,细菌细
13、胞经常发芽但不产生假菌丝。生物学特性,2020年8月3日,真菌,35,在25和37时可以在安息日琼脂和血液琼脂培养基上生长,而非致病性隐球菌在37时不能繁殖。酵母菌落,白色。这种细菌能分解尿素,以区别于酵母和念珠菌。2020/8/3,真菌,36,致病性。大部分细菌从呼吸道转移,导致肺部轻度炎症或隐性感染。中枢神经系统侵犯、脑膜炎、脑炎、脑肉芽肿等。此外,它可以侵入骨骼、肌肉、淋巴结、皮肤和粘膜,导致慢性炎症和脓肿。2020/8/3,真菌,37,微生物检验,1直接显微镜检查:普通墨汁涂片法。2.分离培养:典型的酵母菌落可以在室温下在保沙培养基上生长3723天。有胶囊的菌落很粘。2020/8/3,真菌,38,3糖同化和发酵实验:该菌株不发酵各种糖,但能同化葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、半乳糖、肌醇和分化乳糖。4.酚氧化酶试验:在含有含多巴的柠檬酸铁和咖啡酸的培养基中培养数日后,新生隐球菌出现棕黑色菌落。脲酶试验:新生隐球菌产生脲
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