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文档简介

1、关键语句时时记,1.基因工程的基本工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶和载体。 2. 基因工程的基本步骤：目的基因的获取；基因表达载体的构建；将目的基因导入受体细胞；目的基因的检测与鉴定。 3.目的基因获取的方法：从基因文库中获取、PCR技术扩增目的基因、人工合成目的基因。 4.基因表达载体包含：目的基因、标记基因、启动子、终止子等。,课件53 基因工程的过程,目的基因的检测和鉴定,目的基因的获取,基因表达载体构建,将目的基因导入 受体细胞,基因工程的操作过程,01:07,1.目的基因的获取,方法1.从基因文库中获取 方法2. PCR技术扩增 方法3. 化学方法合成,基因工程的操作过

2、程,01:07,PCR技术扩增目的基因,基因工程的操作过程,01:07,2.基因表达载体的构建,基因工程的操作过程,01:07,3.将目的基因导入受体细胞,植物：农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法 动物：显微注射法 微生物：感受态细胞法,基因工程的操作过程,01:07,4.目的基因的检测和鉴定,利用DNA分子杂交技术检测目的基因的有无； 利用分子杂交技术检测目的基因是否转录； 利用抗原-抗体杂交技术检测目的基因是否翻译； 利用个体生物学水平的鉴定检测重组基因是否表达,01:07,【例1 】(2012福建理综，32)肺细胞中的let7基因 表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。 研究人员

3、利用基因工程技术将let7基因导入肺癌 细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。 该基因工程技术基本流程如图1。 请回答下列问题。 (1)进行过程时，需用_酶切开载体以 插入let7基因。载体应有RNA聚合酶识别和结合 的部位，以驱动let7基因转录，该部位称为_。 (2)进行过程时，需用_酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。,考查基因工程的基本过程,图1,图2,基因工程的操作过程,01:07,【例1 】(2012福建理综，32)肺细胞中的let7基因 表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。 研究人员利用基因工程技术将let7基因导入肺癌 细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。 该基因工程技术基本流程如图1。 请回答下列问题。 (3)研究发现，let7基因能影响癌基因RAS的表 达，其影响机理如图2。据图分析，可从细胞 中提取_进行分子杂交，以直接检测let7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中_(RAS mRNA/RAS蛋白)含量减少引起的。,考查基因工程的基本过程,图1,图2

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