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文档简介
1、第35讲基因工程限时标准特殊培训首先,选择题1.以下关于基因工程技术的叙述是正确的()A.切割质粒的限制性内切酶特异性识别6个核苷酸序列B.聚合酶链反应中温度的周期性变化是针对不同的聚合酶催化的反应C.载体质粒通常使用抗生素合成基因作为筛选标记基因D.抗虫基因即使成功地插入到植物细胞的染色体中,也可能不能正常表达答案D切割质粒的限制性内切酶能特异性识别4、5、6或8个核苷酸序列,A是错的;聚合酶链反应技术使用不同的温度进行变性、复性和延伸,乙错了;载体质粒通常含有抗生素抗性基因作为标记基因,便于筛选重组质粒,c错了;即使抗虫基因成功插入受体细胞的染色体,也可能无法表达,因此需要进一步检测和鉴定
2、,D是正确的。2.基因工程技术也称为基因重组技术,其实施必须满足四个必要条件()A.靶基因限制酶载体受体细胞B.重组脱氧核糖核酸聚合酶限制酶连接酶C.工具酶靶基因载体受体细胞D.模板基因质粒受体细胞答案三分析靶基因、限制性酶、载体和受体细胞是基因工程的必要条件,除了脱氧核糖核酸连接酶之外,一个是错误的;重组DNA是由靶基因和质粒重组而成的,RNA聚合酶是转录所需的酶,而基因工程技术不需要这种酶,b错了;限制性内切酶和脱氧核糖核酸连接酶是工具酶。此外,载体、靶基因和受体细胞是基因工程的必要条件,C是正确的;MRNA是基因转录的产物,这在基因工程中是不需要的。质粒是载体之一,除了质粒外,还有动植物
3、病毒和噬菌体衍生物,因此质粒在基因工程中是不必要的,D是错误的。3.下图显示了转基因动植物的成功培育过程,错误的描述是()A.在将靶基因导入受体细胞a之前,受体细胞应该用Ca2+处理,使其处于感受态B.工艺中使用的生物技术包括动物细胞培养和胚胎移植C.过程中应采用植物组织培养技术D.受体细胞A和B可以通过标记基因进行筛选回答一据分析,受体细胞A一般为动物受精卵,不需要用氯化钙进行显微注射处理。当受体细胞是微生物细胞时,需要用氯化钙处理以增加细胞膜的渗透性。答错了;由于受体细胞A一般为动物受精卵,需要动物细胞培养、胚胎移植等技术来培育转基因羊,B是正确的;过程2需要将植物细胞培养成植物,所以应该
4、使用植物组织培养技术,C是正确的;标记基因的功能是鉴定受体细胞是否含有目的基因,从而筛选出含有目的基因的细胞。因此,当通过标记基因进行筛选时,受体细胞A和B的D是正确的。4.以下关于人胰岛素基因表达载体的说法是正确的()A.表达载体中的胰岛素基因可以通过人肝细胞mRNA的逆转录获得B.表达载体的复制和胰岛素基因的表达都始于复制起点C.可以通过抗生素抗性基因筛选出含有胰岛素基因的受体细胞D.启动子和终止密码子都在胰岛素基因的转录中起作用答案三据分析,胰岛素基因在人肝细胞中不表达,因此不存在胰岛素基因,A是错误的;复制的起点是基因表达载体的复制起点,而胰岛素基因表达的起点是启动子,B是错的;借助抗
5、生素抗性基因,可以筛选出含有胰岛素基因的受体细胞,c是正确的;起始密码子和终止密码子在翻译中起作用,启动子和终止子在转录中起作用。d是错的。5.2017无锡质检以下关于蛋白质工程的说法不正确()A.收集大量关于蛋白质分子结构的信息,以分析结构和功能之间的关系c .根据特定的生物学功能设计蛋白质的氨基酸序列和空间结构d、根据人们的需要,直接重新设计氨基酸的分子结构答案D分析蛋白质工程是按照以下思路进行的:确定蛋白质的功能蛋白质的高级结构蛋白质的折叠状态氨基酸序列碱基序列创造自然界不存在的蛋白质,所以A、B、C是正确的;蛋白质工程是通过转化基因来转化蛋白质,而不是直接重新设计氨基酸的分子结构。d是
6、错的。第二,非选择题6.下图显示了通过基因工程培育抗虫棉的过程。请根据图片回答以下问题。(1)如果限制性酶的识别序列和切点为-gatc-而限制性酶的识别序列和切点为-g gatcc-则在过程中, 限制酶_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _该过程在_ _ _ _ _ _ _ _ _ _(填写“体内”或“体外”)中进行。(2)将通过方法(2)获得的大肠杆菌包被在含有_ _ _ _ _ _ _ _ _的培养基上。如果大肠杆菌能够生长,就意味着普
7、通质粒或重组质粒已经被引入,否则就意味着它还没有被引入。(3)将重组质粒导入大肠杆菌的目的是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。(4)该工艺所采用的技术称为_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _答案(1) (和)体外(2)四环素(3)大量靶基因(抗
8、虫基因)被复制(4)通过植物组织培养,所有遗传物质都发育成完整的个体分析(1)从图中靶基因片段两端的碱基序列可以看出,限制性酶可以切割靶基因的两端,限制性酶可以切割右端,因此靶基因可以通过用酶(和)切割获得。质粒上的两个限制性位点分别被酶切割,两个抗性基因被完全破坏,而一个四环素抗性基因被酶切割。(2)根据重组质粒和普通质粒上抗性基因的类型,如果质粒导入成功,大肠杆菌可以在含有四环素的培养基上生长,否则,应在选择性培养基中加入四环素。(4) (5)是将携带抗虫基因的根细胞培养到植物中的过程,即植物组织培养,细胞全能性是该技术的理论基础。7.2017威海模拟人类在预防和治疗传染病的过程中经常使用
9、疫苗和抗体。众所周知,传染病的病原体是核糖核酸病毒,病毒表面的蛋白A是主要抗原。疫苗生产和抗体制备的部分过程如下:(1)过程代表_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。(2)过程当构建基因重组载体时,必须使用限制性内切酶和_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。通过过程构建的基因重组载体除了目标基因外,还必须有启动子、复制起点等。(3)过程(4)为了检测A基因是否进入受体细胞,常用的方法是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _;_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
10、_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _(4)工艺中使用的生物技术是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。答案(1)逆转录(2)脱氧核糖核酸连接酶终止子和标记基因(3)脱氧核糖核酸分子杂交抗原抗体杂交(4)细胞融合技术分析(1)流程图显示是一个反转录过程。(2)构建基因重组载体时,需要用限制性内切酶切割外源基因分子和含有基因的载体,然后用连接酶连接基因和载体,形成基因重组载体。重组载体的结构包括靶基因、启动子、终止子、标记基因、复制起点等。(3
11、)为了检测目标基因是否进入受体细胞,通常使用脱氧核糖核酸分子杂交,并且可以使用抗原-抗体杂交来检测目标基因是否表达。(4)是动物细胞融合的过程8.2017湖北高中模拟将苏云金芽孢杆菌的Bt毒素蛋白基因导入棉花叶肉细胞,培育出我国具有自主知识产权的抗虫棉。回答以下问题:(1)在这种基因工程中, Bt毒素蛋白基因属于_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
12、 _ _ _ _ Bt毒素蛋白基因可从基因组文库或cDNA文库中获得,基因中含有启动子的文库为_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。(2)需要将获得的Bt毒素蛋白基因与载体结合构建基因表达载体。基因工程中使用的载体包括质粒、噬菌体的衍生物、_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _等。质粒的化学成分是_ _ _ _ _ _。(3)科学家首次对抗虫棉进行实验时,虽然发现棉株含有抗虫基因,但当棉铃虫取食棉叶时,它们并未被杀死,这表明Bt毒素蛋白基因_ _ _ _ _ _ _ _ _。因此,科学家修改了棉花中的Bt毒素蛋白基因。结果,吃棉花叶子的棉铃虫死于中毒。从变异类型分析,
13、这种对Bt毒素蛋白基因的修饰属于_ _ _ _ _ _。(4)转基因植物存在一定的安全性问题。为了避免Bt毒素蛋白基因通过花粉传播到其他植物中,一般将Bt毒素蛋白基因转移到棉花细胞的_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _(填入“细胞核”或“叶绿体”)中。答案是(1)靶基因受体细胞的基因组(2)动植物病毒的DNA)基因突变未成功表达(4)叶绿体分析(1)在本基因工程中,Bt毒素蛋白基因属于目的基因,棉花离体叶肉细胞属于受体细胞。Bt毒素蛋白基因可以从基因组文库或cDNA文库中获得,基因中含有启动子的文库为基因组文库。(2)基因工程中使用的载体包括质粒、噬菌体衍生物、动植物病毒等。
14、质粒是小的环状脱氧核糖核酸。(3)科学家首次对抗虫棉进行实验时,虽然发现棉株含有抗虫基因,但当棉铃虫取食棉叶时,棉铃虫并未被杀死,这表明Bt毒素蛋白基因并未成功表达。言下之意,基因表达的缺乏可能是由于缺乏启动子,所以基因修饰就是给基因添加一个启动子,也就是给基因添加一个碱基序列。因此,从变异的角度来看,基因修饰使基因表达,属于基因突变。(4)由于植物的花粉含有细胞核,几乎没有细胞质,为了防止Bt毒素蛋白基因通过花粉传播到其他植物中,Bt毒素蛋白基因一般被转移到棉花细胞的叶绿体中。9.2017郑州模拟我们每天吃的米饭中铁含量极低。通过基因工程和其他技术,研究人员培育出铁含量比普通水稻高60%的转
15、基因水稻,提高了水稻的营养品质。下图是培育转基因水稻的过程示意图,请分析并回答:(1)铁结合蛋白基因来源于芸豆,可通过_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _技术扩增。如果该基因的脱氧核苷酸序列已知且相对较小,它也可以由_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _直接人工合成。(2)铁结合蛋白基因应插入_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。(3)当含有重组钛质粒的根癌农杆菌与水稻愈伤组织共培养时,可通过在培养基2中筛选培养物获得_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
16、;介质3和介质2的区别是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。有必要检测_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。(4)将从T0代植株收获的种子种植到T1代系中,并检测每株植株的潮霉素抗性。如果几个T1代品系的所有植物都对潮霉素敏感,但在它们的体内可以检测到铁结合蛋白基因,这一结果最可能的原因是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。回答(1)聚合酶链反应化
17、学(2)启动子和终止子(3)含有重组质粒的愈伤组织中生长素和细胞分裂素的浓度比(植物激素比)不同分析(1)获得目的基因有三种方法:从基因库获得,用聚合酶链反应技术扩增,人工合成(化学合成)。如果基因的脱氧核苷酸序列是已知的并且相对较小,则可以通过用DNA合成器进行化学合成来获得目标基因,然后通过聚合酶链反应进行扩增。(2)基因表达需要启动子和终止子的调控,因此目标基因应插入启动子和终止子之间。(3)质粒上的标记基因是潮霉素抗性基因,因此含有重组质粒的愈伤组织可以通过在培养基2中筛选培养获得。培养基3中的再分化过程由生长素和细胞分裂素的浓度比调节,因此培养基3和培养基2的区别在于生长素和细胞分裂
18、素的浓度比不同。为了检验培育转基因水稻的目的是否达到,需要检测转基因水稻成熟种子中的铁含量。(4)如果铁结合蛋白基因可以在体内检测到并且对潮霉素敏感,则潮霉素抗性基因很可能没有表达或丢失。10.2017广东肇庆三毛“金生生”是中国少数几个开创性的基因治疗药物之一。其实质是由腺病毒和人P53基因(肿瘤抑制基因)组装而成的重组病毒。人P53蛋白能在癌变前修复DNA损伤,使其恢复正常,或诱导其进入休眠状态或凋亡,防止细胞癌变。“今日重生”载体采用第一代人腺病毒5型,致病性弱,其基因未整合入宿主细胞基因组,无遗传毒性,载体经基因工程改造后,只感染细胞一次,不能复制,不会造成污染。请回答以下问题:(1)
19、为了在“今天重生”的生产中获得更高的安全性能, 科学家们有选择地放弃了_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _的表达产物P53基因可通过_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _技术检测。(2)如果要扩增大量的P53基因,一般采用聚合酶链反应技术,并使用一种特殊的酶_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。与体内DNA复制相比,聚合酶链反应只能在_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _(3)如果要获得胚胎干细胞用于研究,胚胎干细胞可以来自胚泡或胎儿性腺。在培养过程中
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