免疫球蛋白的检测与临床应用.ppt

1、免疫球蛋白检测及临床应用，临床实验室王涛，免疫球蛋白(Ig)是一组由浆细胞合成并分泌的具有抗体活性的蛋白质。它由两条重链和两条由二硫键连接的轻链组成。重链分为IgG、IgA、IgM、igd和IGE。轻链分为两类：()和()。什么是免疫球蛋白？免疫球蛋白结构、血清免疫球蛋白IgG、IgA、IgM的定量测定方法一般包括单向循环免疫扩散法、火箭免疫电泳法、酶联免疫吸附法、免疫比浊法、放射免疫分析法等。但是临床上常用单向循环免疫扩散法和免疫比浊法测定血清免疫球蛋白含量。作为血清中最重要的抗体成分，检测方法约占人血清中总免疫球蛋白含量的75%。这是唯一能穿过胎盘的免疫球蛋白。IgG是血液和细胞外液中的主

2、要抗体，也是免疫应答的主要抗体。大多数抗感染抗体和自身抗体是IgG。16岁以上成人的临床参考范围是6。正常人血清中IgG含量仅次于IgG，占血清免疫球蛋白含量的10.20%。新生儿血清中没有IgA抗体，但分泌性IgA可从母乳中获得。它可分为血清型IgA和分泌型IgA，其中血清型IgA的含量约占总IgA的85%。虽然血清IgA具有IgG和IgM的某些功能，但在血清中并不表现出重要的免疫功能。分泌性IgA存在于分泌物中，如唾液、眼泪、初乳、鼻和支气管分泌物、胃肠液、尿液、汗液等。人体粘膜局部抗感染免疫的主要抗体。因此，它也被称为粘膜局部抗体。16岁以上成人IgA的临床参考范围为0。763.IgA和

3、IgM是最初体液免疫反应中的第一批抗体，它们是抗感染的主要力量。血清中检测到IgM，表明最近发生了感染，可用于感染的早期诊断。分泌型IgM为五聚体，是分子量最高的IgM，其沉降系数为19S，称为巨球蛋白。它通常不能穿过血管壁，主要存在于血液中。16岁以上成人的临床参考范围为0.43.45克/升。慢性活动性肝炎、原发性胆汁性肝硬化和隐匿性肝硬化等慢性肝病患者血清中三种免疫球蛋白水平均升高。慢性细菌感染如慢性支气管炎、肺结核、血液中的IgG可增加，而脐带血或新生儿血清中的IgM含量在宫内感染时可增加。IgG、IgA、IgM均升高，有先天性和获得性，先天性免疫球蛋白低，主要见于体液免疫缺陷病和联合免

4、疫缺陷病。另一种情况是三种免疫球蛋白中有一种或两种缺失。例如，IgA缺乏的病人容易反复呼吸道感染；IgG缺乏的病人容易患化脓性感染。IgM缺乏的患者易患革兰氏阴性细菌败血症。获得性低IGE血症，血清中的IgG往往低于5 g/L，这是由多种原因引起的，如大量蛋白丢失性疾病(剥脱性皮炎、肠道淋巴管扩张症和肾病综合征)、淋巴系统肿瘤(淋巴肉瘤、霍奇金淋巴瘤)、中毒性骨髓疾病、长期使用免疫抑制剂等。正常人血清中IgG、IgA、IgM下降，IgD含量很低，仅占血清总免疫球蛋白的0.2%。IgD可以在个体发育的任何时候生产，半衰期为2.8天。血清IgD的生物学功能尚不清楚。膜结合IgD形成BCR，这是B细

5、胞分化和成熟的标志。未成熟的B细胞只表达mIgM，而成熟的B细胞可以同时表达mIgM和mIgD，称为天然B细胞)；活化的B细胞或记忆B细胞表面的MIgD逐渐消失。IgE是正常人血清中最少的免疫球蛋白，主要由粘膜下淋巴组织中的浆细胞分泌。它的重要特点是含糖量高达12%。IgE是一种对细胞友好的抗体，可引起型超敏反应。此外，IgE可能与抗寄生虫免疫有关。(1)测定方法：放射免疫法、乳胶粒子免疫比浊法和酶联免疫吸附法测定IgD。酶联免疫吸附试验广泛应用于临床实践原发性无丙种球蛋白血症、肺矽肺(矽肺)和细胞毒性药物患者的IgD值下降。1.总IgE的测定方法包括化学发光免疫分析法、放射免疫分析法、乳胶粒

6、子免疫比浊法和酶联免疫吸附法。化学发光免疫分析和酶联免疫吸附分析在临床实践中很常见。2.特异性IgE的检测方法主要有免疫斑点法和酶联免疫吸附法。商业试剂盒提供多种特定过敏原，包括食物、吸入剂和药物过敏原，可用于检测血清中的特定IgE。IgE测定及临床意义，(2)临床意义1。型过敏性疾病如特发性哮喘、特应性皮炎和过敏性鼻炎中的IgE通常升高。2.非过敏性疾病，如IgE骨髓瘤、寄生虫感染等。3.在急性或慢性肝炎、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎和其他疾病中，IgE会增加。4.原发性无丙种球蛋白血症、肿瘤和化疗后IgE下降。IgE测定及临床意义，轻链与重链相连合成免疫球蛋白称为结合轻链，而轻链不与重链

7、结合称为游离轻链。游离轻链的数量最终取决于B细胞合成和分泌与肾脏清除之间的动态平衡。许多疾病可导致血清中游离轻链浓度异常，如免疫抑制、自身免疫、肾清除率降低和浆细胞病。什么是自由光链？游离轻链通过肾小球滤过迅速从血液中去除，然后被近端肾小管重吸收和分解，因此检测游离轻链可以实时评估疾病进展。研究表明，大量的游离轻链可以被肾脏吸收，因此只有极少数的游离轻链逃脱了近端肾小管的重吸收，正常尿液中有极少量的游离轻链。本斯-琼斯蛋白血清蛋白电泳免疫固定电泳免疫比浊法用于检测游离轻链，灵敏度高：可达5-10毫克/升，特异性高，检测率高。定量检测可以同时检测类型和类型轻链的水平及其比值，有利于疾病变化的鉴别

8、诊断和监测。免疫比浊法检测通常表明存在单克隆疾病。型或型游离轻链同时增加，这可能是由感染、肾功能受损或结缔组织疾病引起的。多发性骨髓瘤是一种浆细胞恶性增生性疾病，其特征在于由晚期B细胞分化的肿瘤性浆细胞分泌单克隆免疫球蛋白或重链，伴有溶骨性病变和/或骨质疏松症。大多数多发性骨髓瘤患者的血红蛋白、血红蛋白含量和红细胞计数都会有一定程度的下降。大多数患者表现为阳性细胞色素减退性贫血，少数患者表现为小细胞色素减退性贫血症状，且贫血程度会随着疾病的进展而逐渐加重。白细胞计数正常，但可以增加或减少。血小板计数在早期是正常的或增加的，但随着疾病的发展会减少。外周血涂片中成熟红细胞形态正常，红细胞常呈线形重

9、叠。多发性骨髓瘤常规实验室检查项目，白蛋白/球蛋白比值(A/G)在疾病早期，大多数多发性骨髓瘤患者的球蛋白升高，直接导致总蛋白显著升高，白蛋白水平正常或降低。随着疾病的进展，肝细胞合成功能的下降导致白蛋白的产生减少，多发性骨髓瘤患者蛋白质损失的增加和摄入量的减少也将导致白蛋白的减少和A/G的倒置。多发性骨髓瘤患者的肾脏损害是由多种因素引起的，其中骨髓瘤细胞分泌的单克隆免疫球蛋白轻链在肾脏的沉积是多发性骨髓瘤肾病的主要原因。实验室检查的特点是血尿素氮和肌酐水平升高，肌酐清除率降低，甚至晚期尿毒症。在多发性骨髓瘤的常规实验室检查中，64%的IgG型多发性骨髓瘤患者的IgG含量升高，但IgA和IgM含量降低，而只有58%的IgA型多发性骨髓瘤患者的IgA含量升高，75.0%的IgG和IgM含量降低。100%的IgM型多发性骨髓瘤患者的IgM含量增加，而另外两种免疫球蛋白的含量下降了61u%。在71.0%的轻链型多发性骨髓瘤患者中，IgA、IgG和IgM含量部分下降。在多发性骨髓瘤免疫球蛋白含量的检测中，IgG型和IgM型的阳性率最高，其次是IgA型，而轻链型的阳性率并不高，原因是免疫球蛋白含量的增加不明显。免疫球蛋白的定量检测不能提示单克隆免疫球蛋白的存在，但当某些类型的免疫球蛋白含量极度增加时，