《DNA的粗提取与鉴定》课件(新人教版选修1).ppt

1、DNA的粗提取和鉴定；讨论2:怎样证明他们是遗传物质？讨论3:如何分离细胞内的牙齿物质？讨论1:构成有机体的遗传物质是什么？1，生物大分子萃取的基本思路是用物理或化学方法徐璐分离其他物理或化学性质生物大分子。2、生物大分子主要指蛋白质、酶、核酸。3、DNA提取的基本思路是利用DNA和RNA、蛋白质、脂质等物理和化学性质差异提取DNA，去除其他成分。(1)DNA的可溶性DNA和蛋白质等其他成分在浓度不同的NaCl溶液中溶解不同。利用牙齿特征选择合适的盐浓度，DNA就会充分溶解，杂质沉淀。相反，如果是氯化钠物质的杨怡2摩尔，DNA的溶解度最高，浓度为014摩尔时，可以利用牙齿原理将DNA溶解或析出

2、到盐溶液中，如何调节NaCl溶液的浓度，使DNA溶解或析出到盐溶液中呢？(2)DNA在酒精溶液中的可溶性DNA不能溶解在酒精溶液中，但细胞中的某些物质可以溶解在酒精中。利用牙齿原理，DNA可以进一步与蛋白质分离。(3)DNA对酶、高温、洗涤剂有抵抗力，蛋白酶能水解蛋白质，但对DNA没有影响，大部分蛋白质不能忍受6080C的高温，DNA能变性80C以上洗涤剂能溶解细胞细胞膜，去除脂质和蛋白质，但对DNA没有影响，DNA对二苯胺的情况是蓝色染色，所以DNA(选择23茄子实验材料)，第2，原则：选择DNA含量比较高、容易提取的生物组织。鸡血，3，适当的材料：原因：首先，鸡血核的DNA含量丰富，材料容

3、易获取。第二，鸡肉血细胞很容易吸水和休息。动物细胞容易破碎。例如，在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可。(2)打碎细胞，获得含有DNA的滤液，1，动物细胞。答：蒸馏水因为鸡肉血细胞，低渗透溶液可能水分多，讨论：为什么添加蒸馏水会导致鸡肉血细胞破裂？2，植物细胞植物细胞必须先用特定的洗涤剂和盐溶解细胞膜。例：提取洋葱DNA时，要在切碎的洋葱中加入洗涤剂和盐，充分搅拌，研磨，过滤后收集研磨液。加入洗涤剂和盐的作用分别是什么？答：洗涤剂是能溶解细胞膜，有助于释放DNA的离子洗涤剂。盐的主要成分是NaCl，有利于DNA溶解。缺乏研磨会对实验结果产生什么影响？具体方法：以1

4、0mL桂血20mL蒸馏水相同的方向搅拌3层尼龙布滤液。答：如果缺乏研磨，细胞核内的DNA会不完整地释放，提取的DNA的杨怡会减少，影响实验结果，看不到丝沉淀，不会出现二苯胺鉴定蓝色等。为什么可以反复溶解DNA，析出来去除杂质？可以用低盐溶液析出DNA，去除低盐溶液中溶解的杂质。因此，通过反复溶解和析出DNA，可以去除不同于溶解DNA的各种杂质。方案1，在过滤器中加入NaCl，使NaCl溶液浓度为2mol/L，过滤不溶解的杂质，加入蒸馏水，将NaCl溶液浓度调整为0.14mol/L。讨论：节目2和节目3的原理有什么不同？答：第二种方法是利用蛋白酶分解杂质蛋白质，将提取的DNA与蛋白质分开。方案3

5、是因为DNA和蛋白质对高温的耐受性不同，所以在蛋白质变性、DNA分离、方案2、滤液中直接加入莲肉粉，反应1015分钟。方案3。将过滤器放入60750C的恒温水浴中保温1015分钟。为了纯化提取的DNA，需要进一步处理过滤器。在牙齿阶段得到的滤液中可能含有什么样的细胞成分？答：可能含有核蛋白、多糖、RNA等杂质。具体方法是：方案1: 30mL过滤器35gNaCl牙齿在同一方向混合。添加DNA溶解蒸馏水DNA析出液过滤器，将滤液放入2mol/LNaCl溶液中，DNA-NaCl溶解液方案2: 30mL滤液莲肉粉(木瓜蛋白酶)1015分DNA滤液3: 30mL滤液6075处理过滤器，DNA滤液，(4)

6、玻璃棒，1，DNA的析出物，确认DNA时，试管中先添加的物质浓度为2mol/L的NaCl溶液5ml，在两个试管中的一个试管中放入DNA线，分别放入2苯胺4ml试剂。均匀搅拌后，将试管放入沸水中加热5min，试管冷却后，比较两个试管中溶液颜色的变化，说明DNA对溶解的溶液中蓝色，2，DNA的鉴定，在沸水中加热的目的：加快颜色反应速度，加热沸水：说明DNA对高温有很强的耐受性。2.加入洗涤剂后，动作要轻柔。否则，大量泡沫生产容易，不利于后续阶段的操作。加入酒精和玻璃棒搅拌时，动作要轻，以免DNA分子破裂加剧。这导致DNA分子无法形成棉花状沉淀。3、二苯胺试剂目前活性，否则影响情绪效果。在鸡血细胞液

7、体中加入柠檬酸钠，净化细胞或离心压裂，释放DNA和蒸馏水，向相同方向搅拌过滤器，去除细胞壁、细胞膜等。溶解核DNA将NaCl放入2mol/L，朝同一方向慢慢搅拌DNA，将蒸馏水萃取为0.14mol/L，过滤，溶解在2mol/L溶液中，去除细胞质中的大部分物质。DNA的初步纯化与等体积95冷却酒精混合，分析白色丝，去除核蛋白、RNA、多糖等。DNA鉴定二苯胺，沸水浴，蓝色提示，实验操作，2。实验中NaCl的物质浓度对2 molL和0.14 molL牙齿DNA有什么影响？1 .在DNA粗提取实验过程中，将蒸馏水两次放在烧杯中的作用是。A .血液稀释，样品清洗B .血细胞破裂，NaCl浓度降低，DNA析