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文档简介

1、,微生物学实验,本学期农业微生物学实验课共开设6个实验项目。 培养基的配制及灭菌法; 微生物测数技术; 微生物菌落形态观察、纯种分离及接种技术; 细菌的染色技术及基本形态、特殊构造观察; 放线菌、霉菌形态观察; 化学药剂对微生物的作用及拮抗微生物的筛选。,实验课课程安排,一个连续的大实验“环境微生物分离、纯化、观察及功能检测”,实验课考核办法,实验成绩 (占课程总成绩30%),平时成绩,技能考核:操作考试,实验报告:按时交。,操作:,实验室规则和要求,实验一 培养基的配制和灭菌法,培养基:按照微生物生长发育的需求,将不同组合的营养物质调制成的营养基质。,一、实验原理,营养成分,水分 碳源 氮源

2、 无机盐 生长因子,不同微生物的生长对于培养基有不同的要求 (细菌、放线菌:pH值中性至偏碱性;真菌喜好酸性),天然培养基: 用生物的组织、器官以及提取物配制成的培养基。通常其化学成分难以确切知道。,合成培养基:用成分和数量已知的化学试剂配制而成。成分明确,重复性好。,半合成培养基: 部分天然材料和部分纯化学试剂配制而成。,培养基的种类,1. 按照培养基成分不同分为:,培养基的种类,2. 按照培养基形态的不同分为:,液体培养基:将配方中的成分溶解而成,不含凝固剂。 固体培养基:加入琼脂凝固剂1%-2%. 半固体培养基:加入琼脂凝固剂0.2%-0.5%。,培养基凝固剂,琼脂:常用;海藻多糖,不易

3、被分解利用;透明度 好;凝固点:45 ,溶解点:96 ;,明胶; 易被分解,融化温度低,不耐高温灭菌,硅胶:,基础培养基:,选择培养基: 加富培养基 鉴别培养基,培养基的种类,3. 按照培养基用途不同分为:,培养基配制流程,原料称量,加热溶解、搅拌,定容,调节pH值,过滤澄清,分装,塞棉塞和包扎、注明培养基名称、班级、组,高压蒸汽灭菌,冷藏、待用,牛肉膏蛋白胨培养基,高氏1号培养基,马丁氏培养基,马丁氏培养基,培养基配方,二、实验内容,1,以小组为单位,分别配制牛肉膏蛋白胨培养基(第一组、第四组)、高氏一号培养基(第二组)、马丁氏培养基(第三组)各400mL。,2,3,4,每组制备无菌水:1个90mL 三角瓶无菌水、6只9mL试管无菌水。,每人包1mL移液管一支。,学习灭菌、消毒方法;操作高压蒸汽灭菌。,灭菌和消毒技术(P16),灭菌:用物理或化学的方法杀死物体上全部微生物的过程。 消毒:用物理或化学的方法杀死物体上大部分微生物(特别是 病原微生物),尚存少数无害微生物

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