光激化学发光-新一代化学发光.ppt

1、,光激化学发光,ight,nitiated,hemiluminescence,ssay,L,i,C,A,4G,工作原理,性能参数,技术特点,系统平台,LiCA,放免,酶联免疫,化学发光,荧光免疫,60年代,70年代,80年代,90年代,免疫标记技术发展,国产,进口,酶促化学发光,直接化学发光,电化学发光,LiCA（LOCI）,是以纳米级高分子微粒为基础，由光激发的一种均相免洗的化学发光分析技术。具有快速、均相（免洗）、高灵敏度和操作简便等特点的新一代技术。 是化学发光免疫分析技术的又一个新的里程碑,光激化学发光 LiCA Light Initiated Chemiluminescent Ass

2、ay,两种高分子微粒：感光微粒和发光微粒 两种微粒近距离接近。是感光微粒接受 激发光照射释放出单线态氧构成 “氧桥” 传递能量，使发光微粒发出光信号,LiCA技术基础,直径：200nm 包被亲和素 红色激光680nm照射 释放单线态氧,直径：200nm 用于包被抗体/抗原 接受单线态氧 产生610nm光,感光微粒,发光微粒,LiCA原理两种微粒,半衰期：4S 作用距离：200nm,LiCA原理 单线态氧（能量载体）,三线态氧（基态）,单线态氧（激发态）,感光微粒 亲和素,发光微粒- Anti-HBs,HBsAg,生物素- Anti-HBs,发射光 610 nm,200nm,激发光 680 nm

3、,1O2,LiCA原理举例（双抗体夹心法）,不含待测抗原,200nm,能量的近距离转移 转移的介质是单线态氧 两种微粒相互接近200nm,LiCA发光原理,光激化学发光 = 光能化学能光能,工作原理,性能参数,技术特点,系统平台,LiCA,均相反应 反应充分 速度更快,LiCA技术特点均相反应,酶标板，板式,磁微粒，微米级，非均相,LiCA微粒，纳米级，类均相,*,*,*,*,*,*,*,*,*,*,微粒包被,等质量比表面积 A : B = 5,A,B,dA=200nm,dB=1m,等质量微粒（比表面积）,LiCA,磁微粒,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,Y,LiCA Ab,磁微粒Ab,LiC

4、A抗体载量优势,准确,成本,快速,LiCA的技术特点,加样,孵育,15%,80%,检测,5%,随机误差 / 交叉污染,CV 5%,自动化平台,免洗/免分离,类均相反应技术,纳米级别微粒包被,500 Tests/Hour,清洗,废液处理,大量纯化水清洗管路,管路定期更换 （一般半年一换）,进口原装管昂贵,需达到无害环境标准 繁琐,水质要求达标,高额隐性成本,免洗,提升经济和社会效益,采用680nm弱能量红光激发,单线态氧不易受外界环境因素干扰,取样量仅25l，试剂中有表面活性剂,LiCA的抗干扰性,2000-2009年光激化学发光相关文献,生命科学的基础研究,新药的筛选,目标小分子的多样性 蛋白

5、 核酸 糖,LiCA的应用拓展,LiCA的技术特点与优势,工作原理,性能参数,技术特点,系统平台,LiCA,LiCA SP 移液工作站,LiCA HT 均相发光免疫分析仪,LiCA产品平台,样品臂,试剂臂,试管架,试剂仓,枪头架,微孔板,废物盒,LiCA SP 移液工作站,未包被任何抗原/抗体,96个反应空杯,LiCA微孔板,托盘,上盖板,LiCA HT 均相免疫发光分析仪,甲状腺 T3 T4 FT3 FT4 TSH TSH-3 ATPO ATG,性激素 BhCG P T FSH LH E2 E3 Prolactin,肿瘤标志物 AFP CEA CA12-5 CA19-9 CA153 CA50

6、 CA24-2 CY21-1 fPSA PSA NSE SCC pro-GRP PG-/,心肌标志物 cTnI MyO mCKMB BNP NT-proBNP hsCRP,新陈代谢 C-peptide Insulin iPTH DPD,传染性疾病 HBsAg Anti-HBs HBeAg Anti-HBe Anti-HBc Anti-HAV IgM Anti-HBc IgM Anti-HCV Anti-HIV Anti-TP,LiCA项目菜单,工作原理,性能参数,技术特点,系统平台,LiCA,LiCA 系统的多中心临床评估,N=453,上海第一人民医院；参比试剂：雅培I2000,LiCA性能多

7、中心临床评估（乙型肝炎）,LiCA性能多中心临床评估（肿瘤标志物）,N=200，上海市中山医院 参比试剂：罗氏E170,LiCA性能多中心临床评估（肿瘤标志物）,N=500，上海市瑞金医院 参比试剂：雅培I2000,LiCA性能多中心临床评估（甲状腺）,N=300，上海市第六人民医院 参比试剂：西门子Advia centuar,AFP,HBsAg,4.50%,1.79%,4.91%,2.14%,批内,批间,LiCA的精密度,LiCA的TSH功能灵敏度,小结,化学发光是免疫检测新技术 LICA是最新一代的化学发光检测技术 LICA具有液相、免洗、快速、高通量、灵敏、准确的特点 通过多中心的临床评估，基本上验证了LICA在乙肝、肿瘤标志物、甲状腺功能等项目的临床可用性 LICA产品的质量基本已能与进口