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文档简介

1、2020/9/12,一、液相色谱仪器 high performance liquid chromatograph,2020/9/12,液相色谱仪（2）,2020/9/12,液相色谱仪（3）,2020/9/12,液相色谱仪（4）,2020/9/12,二、高效液相色谱法的特点 feature of HPLC,特点：高压、高效、高速 高沸点、热不稳定有机及生化试样的高效分离分析方法。,2020/9/12,三、流程及主要部件 process and main assembly of HPLC,1.流程,2020/9/12,2.主要部件,(1) 高压输液泵 主要部件之一，压力：150350105 Pa。

2、 为了获得高柱效而使用粒度很小的固定相（10m），液体的流动相高速通过时，将产生很高的压力，因此高压、高速是高效液相色谱的特点之一。 应具有压力平稳、脉冲小、流量稳定可调、耐腐蚀等特性,（动画）,2020/9/12,(2)梯度淋洗装置,外梯度: 利用两台高压输液泵，将两种不同极性的溶剂按一定的比例送入梯度混合室，混合后进入色谱柱。,内梯度: 一台高压泵, 通过比例调节阀,将两种或多种不同极性的溶剂按一定的比例抽入高压泵中混合。,2020/9/12,(3) 进样装置,流路中为高压力工作状态， 通常使用耐高压的六通阀进样装置， 其结构如图所示：,2020/9/12,(4) 高效分离柱,柱体为直型不

3、锈钢管，内径16 mm，柱长540 cm。发展趋势是减小填料粒度和柱径以提高柱效。,2020/9/12,(5) 液相色谱检测器,a. 紫外检测器 应用最广，对大部分有机化合物有响应。 特点： 灵敏度高； 线形范围高； 流通池可做的很小（1mm 10mm ，容积 8L）； 对流动相的流速和温度变化不敏感； 波长可选，易于操作； 可用于梯度洗脱。,2020/9/12,b. 光电二极管阵列检测器,紫外检测器的重要进展； 光电二极管阵列检测器：1024个二极管阵列，各检测特定波长，计算机快速处理，三维立体谱图，如图所示。,2020/9/12,2020/9/12,光电二极管阵列检测器,2020/9/12,c. 示差折光检测器（differential refractive index detector）,除紫外检测器之外应用最多的检测器； 可连续检测参比池和样品池中流动相之间的折光指数差值。差值与浓度呈正比；,通用型检测器（每种物质具有不同的折光指数）； 灵敏度低、对温度敏感、不能用于梯度洗脱； 偏转式、反射式和干涉型三种；,2020/9/12,示差折光检测器,2020/9/12,d. 荧光检测器（fluorescence detect

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