人教版 高中生物 选修一 专题五 课题3 血红蛋白的提取和分离 学案

1、【使用时间】 第 9 周 第 2 课时【编辑】李玲珍 【审核】刘萍萍【编号】【主题】专题五 课题3 血红蛋白的提取和分离 2012.04.26【情景创设】 蛋白质是生命活动不可缺少的物质。对蛋白质的研究和应用，首先需要获得纯度较高的蛋白质。因此，从复杂的细胞混合物中提取、分离高纯度的蛋白质是生物科学研究中经常要做的工作。 血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，负责血液中O2和CO2的运输。在本课题中，我们将以血红蛋白为实验材料，学习蛋白质提取和分离的一些基本技术。【问题设计】1、 什么是凝胶色谱法？用这种方法分离蛋白质的原理是什么？2、 缓冲溶液的作用体现在哪里？如何配制缓冲溶液及控

2、制缓冲范围？3、 什么叫电泳？用电泳法分离一些生物大分子的原理是什么？常用的电泳方法有哪些？4、 简单说说哺乳动物的血液组成及血红蛋白的相关知识，如何对血样进行处理及对血红蛋白进行粗分离？处理后的血样发生了哪些变化？5、 简述凝胶色谱柱的制作及装填操作步骤，如何判断色谱柱的装填是否成功？回答P70旁栏思考。6、 如何加样及洗脱？此过程中需注意什么，可观察到什么现象？常用的对蛋白质进行纯度鉴定的方法是什么？7、 完成课后作业5 。【达标检测】（必做）1. 用凝胶色谱法分离蛋白质的过程中，下列叙述正确的是（ ）A、 相对分子质量较小的蛋白质行程大于相对分子质量较大的蛋白质B、 相对分子质量较小的蛋

3、白质行程小于相对分子质量较大的蛋白质C、 相对分子质量较小的蛋白质行程等于相对分子质量较大的蛋白质D、 二者根本无法比较2. 使用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳过程中，不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于（ ）A、 电荷的多少 B、分子的大小C、肽链的多少 D、分子形状的差异3. 一分子的血红蛋白最多可携带的O2分子数和CO2分子数分别是（ ）A、 4、2 B、4、4 C、2、1 D、1、14. 样品处理中血红蛋白溶液离心后的分层顺序自上而下是：无色透明的甲苯层- - -红细胞破碎物的暗红色沉淀。5.在蛋白质的提取和分离中，对于样品的处理过程的分析正确的是（ ）A、洗涤时离心速度过高，时间过长，白细胞

4、等也会沉淀，达不到分离的效果B、洗涤红细胞的目的是除去血浆中的葡萄糖、无机盐C、洗涤过程中用0.1%的生理盐水D、透析的目的是去除样品中相对分子质量较大的杂质（选做）红细胞含有大量血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成，血红蛋白的主要功能是携带O2和CO2，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白。请回答下列有关问题：（1）血红蛋白的提取和分离一般可分为四步： 、粗分离、纯化和 。（2）实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液。加入柠檬酸钠的目的是 。以上所述的过程既是样品处理，它包括红细胞的洗涤、 。（3）收集的血红蛋白溶液要进行粗分离，其方法是 。（4）然后通过 将样品进一步纯化，最后经 进行纯度鉴定。样品纯化的目的是 。（5）电泳