3-烟草中农残检测技术LC-MSMS

1、烟草及烟草制品 多种农药残留量的测定 LC-MS/MS,国家烟草质量监督检验中心,(一）、LC-MS/MS简介 （二）、方法原理 (三）、适用农药 （四）、检测流程 （五）、检测中常见问题,主要内容,LC-MS/MS简介,以液相色谱作为分离系统，质谱为检测系统。样品在液相色谱部分分离，经质谱离子化，质量分析器将离子碎片按质量数分开，经检测器得到质谱图。 色谱和质谱优势结合，应用广泛。,适用于高沸点、大分子、强极性和热稳定性差的化合物的分析。 适于复杂基质样品,特别是农产品，生物样品中的农兽药残留的定性定量分析。 利于多组分分析。,LC-MS/MS简介,实验原理,粉碎后的干燥样品在调节含水量之后

2、使用乙腈振荡提取，然后用无水硫酸镁和氯化钠振荡促使其分层；采用PSA（primary secondary amine）吸附剂去除提取液色素、脂肪酸等实现净化，用高效液相色谱-串接质谱仪实现检测，内标法定量。,适用农药,A、有机磷类 安硫磷、毒虫畏、毒死蜱、二嗪磷、乐果、灭线磷、苯线磷、氧乐果、倍硫磷、马拉硫磷、久效磷、甲拌磷、伏杀硫磷、辛硫磷、甲基嘧啶磷、杀虫畏、敌百虫、蚜灭磷、磷胺 B、氨基甲酸酯类 涕灭威、甲萘威、克百威、丁硫克百威、甲硫威、灭多威、 杀线威、抗蚜威、残杀威、硫双威,C、杀菌剂 腈菌唑、霜霉威、氟吗啉、霜脲氰、咪鲜胺和咪鲜胺锰盐、阿拉酸式苯-S-甲酸、苯霜灵、多菌灵、甲基硫

3、菌灵、噁霉灵、稻瘟灵、苯菌灵、噁唑菌酮、烯酰吗啉、戊菌唑、恶霜灵、三唑醇、三唑酮 D、除草剂 异噁草松、双苯酰草胺、吡氟禾草灵、喹禾灵、克草敌、敌草胺、甲草胺、异丙甲草胺 E、其它杀虫剂 啶虫脒、除虫脲、吡虫啉、吡蚜酮、噻虫嗪,常见检出的农药,杀菌剂：腈菌唑、霜霉威、甲霜灵、苯霜灵、多菌灵、甲基硫菌灵、稻瘟灵、烯酰吗啉、恶霜灵、三唑醇、三唑酮、异菌脲 除草剂：甲草胺、二甲戊灵、异噁草松 其它杀虫剂：啶虫脒、吡虫啉,测定条件,液相色谱条件 色谱柱： C18液相色谱分析柱 (柱长 150 mm ，内径 2.1 mm ， 固定相粒径3 m) 或相当者； 柱温：25 ； 进样量：10 L；,推荐：At

4、lantisdC18 3m,质谱条件 扫描方式：正离子扫描/负离子扫描； 监测方式：多反应监测； 电喷雾电压：5500 V； 雾化气压力：0.414 MPa； 离子源温度：500 ；,测定条件,检测流程,前处理过程,Rp以干基计的农药残留量，单位为毫克每千克（mg/kg） cr从基质混合标准工作曲线上得到的被测组分在试样萃 取液中的浓度，单位为微克每毫升（g/mL）； V提取步骤提取剂乙腈的使用体积，单位为毫升（mL）； m样品质量，单位为克（g）； w样品的水分含量，%（质量分数）。,计算公式,不同稀释倍数基质标准曲线响应强度变化,基质混合标准工作曲线的制作,标准工作溶液 分别移取混合标准储

5、备液 1000L、 500 L、250 L、100 L 及50 L到5个10 mL容量瓶中，加入100 L内标工作液，用乙腈定容。,相对等浓度标准溶液的响应强度（1ppb）,不同基质对信号的影响,需要注意的问题,样品含水率对于萃取乃至回收率影响很大 调整样品含水率，2g样品添加10mL水 基质效应基本上引起响应信号的下降 不同基质的影响趋势一致，但幅度有差别 相同基质对不同目标物的影响差别很大 基质标准曲线的应用，结合内标 稀释有助于减小基质效应，但效果有限 适当稀释,需要注意的问题,灵敏度低检查步骤 若FIA正常，则再继续接上色谱柱采样，判断是色谱柱问题还是流动相问题。 样品本身的问题，如样

6、品没有完全溶解，浓度不够，所用溶剂与流动相不匹 配等。 样品存贮时间过长，保存条件不好，分解或吸附了。 放在自动进样器中的样品小瓶内套管底部有气泡，没取到样品，或针头位置 太高，而样品液面太低。 前处理步骤中，标准品、内标样品是否加进，提取过程中有无遗洒。 离子对质量数输入准确否，有无错误？ 管路漏液:样品没有完全进到离子源里。 管路部分堵塞:喷雾时断时续,小流量信号好,大流量信号差。 先调出安装仪器时的PPG等方法，用注射泵SYRINGE PUMP，进PPG看看，质量校准点漂移否,若质量校准不对，造成质量数无法选准，要重新校准仪器。 若注射泵采集PPG强度和质量校准正常，则再看标准品样品，C

7、OMPOUND等参数是否正确，质量数是否准确。,仪器设备因素,重复性差检查步骤 气帘气(Curtain Gas)太低，会有周期性降低现象。 采样时间(Dwell Time)太长，每个色谱峰采样点太少，至少十几点，采样时间 太短则噪声太高，信噪比不好。 新色谱柱没有充分平衡，旧色谱柱老化，重新清洗活化，或更换。 源温度太高，样品分解。 加样前与标准液分别平行做处理，观察有无区别, 若标准品溶液无问题，而样 品重复性差，则问题可能出在基质的干扰或前处理方法不当。 稀释配制样品的移液枪，移液管，容量瓶等有无污染问题。 梯度洗脱后平衡时间不够，或脏东西没洗干净，累积使得重复性差 重复性差 重复性差 重复性差，应彻底冲洗柱子。 当液氮剩不多时