（医学课件）气相色谱质谱基础.ppt

1、气相色谱/质谱基础,1,GC,MS,Interface,Data System,2,气相色谱,3,气相色谱的主要组成部分 典型的色谱图和它所包含的信息 分离是如何发生的 气体的使用及管路的配置 HP6890键盘功能介绍,气相色谱及 HP6890简介,4,色谱柱,流量 控制器,稳压器,空气,氢气,载气,分子筛,脱水管,固定,进样口,检测器,电子部件,PC,限流器,典型的气相色谱,5,气体 载气 - 用于传送样品通过整个系统的气体。 检测器气体 - 某些检测器所需的支持气体, 如 FID. 样品引入 将样品蒸汽引入载气的过程。 该过程应对样品蒸汽有最小影响。 色谱柱 实现样品组分的分离。 检测器

2、对流出柱的样品组分进行识别和响应。 数据采集 将检测器的信号转换为色谱图，以备手动或自动定性、定量分析之用。,概念,6,载气的类型 进样口类型 色谱柱类型 检测器类型 数据采集类型,样品决定仪器的配置，例如：,7,保留时间 用于确定样品组分，即进行样品定性分析。 峰面积 用于测定样品的含量，即定量分析。,典型色谱图,8,待分离组分 ， 和,载气,A,B,C,D,色谱过程示意图,9,色谱是一种分离方法，物质在流动相和固定相之间进行分配。由于各种物质在固定相中的保留能力不同而形成不同的流出时间以达到分离。,分离是如何发生的,10,柱长 (米),I.D. (mm),.5-10,2-4,5-100,.

3、530,5-100,.1-.25,填充柱,530系列柱,细孔径柱,填充柱,开管柱（毛细管柱）,壁涂,开管柱,色谱柱类型,11,填充柱分析：,毛细管柱,GC/MS常用柱,5% OV101,on 80/100 Chromosorb,30m X 0.53mm X .88m,HP-5MS 30m X 0.25mm X .25m,HP 柱评估样品,色谱柱类型比较,12,载气和检测器支持气,13,氧气捕集器 微量的氧气会破坏色谱柱，特别是对毛细管柱。 氧气也会降低ECD检测器的功能。 氧气捕集器 (P/N 3150-0414)应连接在分子筛干燥器和仪器安装设备的进样口之间。,分子筛干燥器,14,气路连接,

4、15,须使用GC 专用铜管或不锈钢管。 塑料管会渗透O2和其它污染物。还可能会释放其它可被检测到的干扰物。 管子使用前先用溶剂冲洗，载气吹干。 根据工厂的推荐，每用完3瓶气，应更换过滤器，以防止发生气体的污染。 每隔一定时间，应对所有外加接头进检漏（大约每隔 4-6个月。,管路和净化器,16,载气必须通过控制形成恒定的压力和恒定的流量。上下游控制器压差保持1公斤以上。,减压阀和流量控制器,17,HP6890前视图,18,HP6890侧后视图,19,即时功能键 功能键 快捷键 信息键 数字键 多功能键 方法存贮与自动 运行,HP6890键盘介绍,20,质谱基础,21,质谱常用术语,丰度（相对丰度

5、、绝对丰度） 质荷比 (m/z) 基峰 分子离子 碎片离子 母离子、子离子 同位素峰 偶电子离子 奇电子离子 氮规则,M/Z,Abundance,82,166,182,303,50,100,150,200,250,1000000,Scan 33 (5.289 min): ALKDEMO.D,M/Z,Abundance,82,166,182,303,50,100,150,200,250,1000000,Scan 34 (5.297 min): ALKDEMO.D,总离子色谱,23,总离子流图的构成,总丰度 = 638,444,(3.892, 638444),24,25,质谱数据是三维的,26,2

6、7,28,质谱仪,Outlet,29,30,质谱仪器分类,磁质谱 射频质谱（四极质谱，离子阱质谱） 飞行时间质谱 傅立叶变换质谱,32,33,34,35,36,分 辨 率（） 在 给 定 样 品 的条 件 下, 仪 器 对 相 邻 两 个 质 谱 峰 的 区 分 能 力。 相 邻 两 个 等 高 的 峰， 其 峰 谷 不 大 于 峰 高 的10 时， 即 定 义 为 可 以 区 分。 分 辨 率RM/M 其中M 为两峰质量的平均值； M为两峰质量的差。,高分辨质谱由方向聚焦和能量聚焦两部分构成,37,38,39,40,41,Ion Detection,42,43,44,GC/MS 统计,GC

7、柱容量 (克)30 ng = 30 x10-9 g 分子量 (g/mole)300 g/mole GC 柱容量 (摩尔)1x10-10 moles 电离效率0.01% = 1x10-4 摩尔电离1x10-14 Mass 分析损失99.9% 摩尔检测1x10-17 Molecules/mole6.02x1023 分子检测6x106,45,提供足够的平均自由程 提供无碰撞的离子轨道 减少离子-分子反应 减少背景干扰 延长灯丝寿命 消除放电 增加灵敏度,为什么MS需要真空,46,电离技术简介,47,常用电离方式,电子电离（EI） 化学电离（CI） 快原子轰击（FAB） 场电离与场解析（FI，FD） 电喷雾电离（ESI） 大气压化学电离（APCI）,48,电子电离（EI）,49,50,REPELLER,电子电离（EI）,51,化学电离（CI）,化学式 观测M/Z 电荷转移 X+ + M X + M+ M 电子捕获 M + e- (热) M- M 质子转移 CH5+ + M CH4 + MH+ M+1 CH3+ + M CH4 + M-H+M-1 OH- + M H2O + M-H-M-1 加成 C2H5+ + M MC2H5+M+29,52,