微生物的实验室培养ppt课件

一、微生物的实验室培养1培养基(1)培养基即人们按照 ，配制出供其生长繁殖的基质。(2)按物理状态，可将培养基划分为 培养基和 培养基 (如琼脂培养基 )。(3)培养基一般都含有的成分是： ，在此基础上还需满足微生物生长对的需求。微生物对营养物质的不同需求液体 固体水、碳源、氮源和无机盐pH、特殊营养物质及氧气2消毒和灭菌项 目 消毒 灭 菌条件 使用 的理化方法 使用 的理化因素结 果 杀 死物体表面或内部杀 死物体内外较为 温和 强 烈一部分 对 人体有害的微生物 (不包括芽 孢 和孢 子 )所有的微生物，包括芽 孢 和孢 子项 目 消毒 灭 菌适用 实验 操作的空 间 、操作者的衣着和手培养器皿、接种用具和培养基等常用方法消毒法， 消毒法，酒精、 氯 气、石炭酸等化学 试剂 消毒法灭 菌、 灭 菌、 灭菌煮沸 巴氏 灼 烧干 热高 压 蒸汽3大肠杆菌纯化及菌种保藏(1)制备牛肉膏蛋白胨培养基的步骤为： 称量 溶化 (2)微生物纯化的原理及方法： 原理：在 培养基上将细菌稀释或分散成 ，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。 方法： ，要求无菌操作。计算 灭菌固体 单个细胞倒平板平板划线法、稀释涂布平板法(3)菌种保藏： 短期保存： 上 4 保藏，缺点是菌种易被污染或产生变异。 长期保存：采用 20 冷冻箱中保藏。固体斜面培养基甘油管藏法二、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数(1)分离原理： 土壤中细菌之所以能分解尿素，是由于它们能合成 ，这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起 作用。 使用以 为唯一氮源的培养基能促进 的细菌的生长和繁殖，并抑制或阻止其他微生物的生长，从而分离出目的菌。脲酶催化尿素 分解尿素(2)统计菌落数目：统计样品中的活菌一般用。(3)实验流程：土壤取样 微生物的培养与观察 细菌的计数。稀释涂布平板法制备培养基返回元贝驾考 元贝驾考 2016科目一 科目四驾考宝典网 / 驾考宝典 2016科目一 科目四三、分解纤维素的微生物的分离1纤维素酶的组成及作用(1)组成：一种 酶，它至少包括三种组分，即。(2)作用：复合C1酶、 Cx酶和葡萄糖苷酶纤维二糖 葡萄糖2筛选方法(1)方法： 法，即通过是否产生 来筛选纤维素分解菌。(2)培养基：是以 为唯一碳源的选择培养基。3筛选流程土壤取样 将样品涂布到的培养基上 挑选 的菌落。刚果红染色 透明圈纤维素粉选择培养 梯度稀释鉴别纤维素分解菌 产生透明圈考点一 微生物的营养与纯化考情解 读微生物的 营 养、培养基的 类 型与功能、培养基对 微生物的 选择 作用及培养基的制 备 和微生物的 纯化与培养是近年高考中生物技 术实 践内容的主要 题源，考 查频 率高， 题 目灵活，内容丰富。 预计 2013年可能会 结 合微生物的分离与 计 数予以考 查 。做一题 例 1 如下所示为培养某种微生物的培养基的配方，请回答： 成分 含量NaNO3K2HPO4KClMgSO47H2OFeSO4(CH2O)H2O青霉素3 g1 g0 5 g0 5 g0 01 g30 g1 000 mL0 1万 单 位(1)依物理状态，该培养基属于 _培养基；依用途划分，则属于 _培养基。(2)根据培养基的配方可判断出，该培养基所培养微生物的同化作用的类型是 _，培养的微生物可能是 _。(3)该培养基中的碳源是 _。不论何种培养基，在各成分都溶化后分装前，要进行的是 _和_；倒平板时，一般需冷却至 _左右，并且要在 _附近操作。(4)若用该培养液培养纤维素分解菌，应除去的物质是_，至少应加入的物质是 _，为检测纤维素分解菌的存在与否还应加入 _，形成_色复合物，若产生 _，则证明有纤维素分解菌存在。解析 (1)从培养基成分看，没有琼脂等凝固剂，属于液体培养基；从用途上分析，加入青霉素可以杀死细菌、放线菌，选择出霉菌、酵母菌等属于选择培养基。 (2)该生物以培养基中的 (CH2O)作碳源，为异养型微生物。 (3)考查微生物培养的基本操作。 (4)培养纤维素分解菌，是以纤维素作碳源，故应去除 (CH2O)；培养细菌应去除能杀灭细菌的青霉素。可用刚果红与纤维素形成红色复合物，检测纤维素分解菌的存在。若存在，菌落周围会形成透明圈。答案 (1)液体 选择(2)异养型 酵母菌或霉菌(3)(CH2O) 调整 pH 灭菌 50 酒精灯火焰(4)青霉素和 (CH2O) 琼脂和纤维素粉 刚果红 红 透明圈链一串 1微生物的营养营 养要素 含 义 作用 主要来源碳源 凡能提供所需碳元素的物 质构成生物体 细胞的物 质 和一些代 谢产 物，有些是异养生物的能源物 质无机化合物： CO2、 NaHCO3；有机化合物：糖 类、脂肪酸、花生 饼粉、石油等营 养要素 含 义 作用 主要来源氮源 凡能提供所需氮元素的物 质合成蛋白 质 、核酸以及含氮的代 谢产 物无机化合物： N2、NH3、 铵盐 、硝酸 盐；有机物化合物：尿素、牛肉膏、蛋白 胨等营 养要素 含 义 作用 主要来源生 长因子生 长 必不可少的微量有机物酶 和核酸的 组成成分维 生素、氨基酸、碱基等水和无机 盐水不 仅 是 优 良溶 剂 ，而且可 维持生物大分子的 稳 定；无机 盐是 细 胞内成分和 调节 物 质外界 摄 入关键一点 微生物之所以需要补充生长因子，是由于其体内缺乏合成这些物质所需要的酶或合成能力有限，而对那些合成能力足以满足自身需求的微生物，其培养基中则不需额外补充生长因子。2培养基的类型划分标 准培养基种 类 特点 用途状 态 液体培养基 不加凝固 剂 工 业 生 产固体培养基加凝固 剂 ，如 琼 脂微生物分离、鉴 定等划分标 准培养基种 类 特点 用途用途选择培养基培养基中加入某种化学物 质 ，用来抑制不需要的微生物的生 长 ，促 进 所需要的微生物的生 长培养和分离出特定微生物 (如分离酵母菌和霉菌，可以在培养基中加入青霉素 )划分标 准培养基种 类 特点 用途用途鉴别培养基根据微生物的代 谢 特点，在培养基中加入某种指示 剂 或化学 药 品鉴别 不同种 类 的微生物，如用伊 红 美 蓝 培养基 鉴别饮 用水或乳制品中是否含有大 肠 杆菌 (若有， 则 菌落呈深紫色并 带 有金属光 泽 )3平板划线法的注意事项(1)第一次划线及每次划线之前都需灼烧接种环进行灭菌，划线操作结束仍需灼烧接种环，每次灼烧目的如下表：第一次灼 烧 每次划 线 之前灼 烧 划 线结 束后灼烧目的 避免接种 环 上可能存在的微生物 污 染培养物杀 死上次划 线结 束后接种 环 上残留的菌种，保 证 每次划线 的菌种都来自上次划 线 的末端杀 死接种 环 上残留的菌种，避免 细 菌 污 染环 境和感染操作者(2)灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，以免因温度太高杀死菌种。(3)划线时最后一区域不要与第一区域相连。(4)划线用力要大小适当，防止用力过大将培养基划破。通一类 1右图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为 12345。下列操作方法正确的是 ( )A只需操作前将接种环放在火焰旁灼烧灭菌即可B划线操作需在火焰上进行C在 5区域中才可以得到所需菌落D在 12345区域中画线前后都要对接种环灭菌解析： 操作的前后都要对接种环进行灭菌。划线操作需在火焰旁进行，而不是在火焰上；所有的划线区都有可能得到所需菌落，只是 5区得到的菌落相对较纯。答案： D考点二 目标微生物的筛选与培