复合食品包装中二氨基甲苯的测定_编制说明.doc

食品安全国家标准 复合食品包装袋中二氨基甲苯的测定编制说明一、工作简况1、任务来源：中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会（ZHENGHE-2014-359）。2、标准主要起草单位：黑龙江出入境检验检疫局技术中心。3、标准主要起草人：吴岩、李铁柱、姜冰、徐义刚、吕鹏、勾越、赵伟、马玉坤、贾立明、王传松、魏冬旭。二、标准的重要内容及主要修改情况1 分析条件的确定1.1 提取方式的确定对于提取溶剂的选择上，课题组考察了二氯甲烷和乙酸乙酯两种不同提取溶剂的提取效率，同时再提取液中加入氯化钠，降低其在水中的溶解度，提高二氯甲烷等有机溶剂的提取效率，并且还起到消除样品溶液在液液萃取过程中乳化的现象，通过实验比较二氯甲烷的提取效率为85%98%要高于乙酸乙酯74%82%，这也与二氨基甲苯与二氯甲烷自身的化学性质有关，符合相似相溶的化学原理，因此课题组最终确定以二氯甲烷作为提取溶剂。1.2 衍生化过程的优化由于二氨基甲苯含有两个胺基，具有较强的极性，直接分析会出现较强的拖尾，通常采用衍生化的方式改善待测物的峰型，也同时引入了电负性很强的氟，使其在电子捕获检测器获得较高的灵敏度。国家标准GB/T 5009.119-2003中采用三氟乙酸酐进行衍生，而行业标准SN/T 2277-2009与地方标准DB34/T 1769-2012中则采用七氟丁酸酐进行衍生，课题组发现采用七氟丁酸酐在常温下衍生15min的衍生产物的稳定性及衍生化效率要好于三氟乙酸酐在30下衍生30min的衍生化反应，因此，课题组确定以七氟丁酸酐作为衍生化试剂，二氨基甲苯与七氟丁酸酐衍生化学反应的反应式见图2。图2 二氨基甲苯与七氟丁酸酐衍生化学反应的反应式为了保证衍生效率，课题组分别对衍生试剂的用量进行了考察，分别使用20、40、60、80、100、120、140、160、180、200 L的七氟丁酸酐，在室温下衍生30min，然后按照标准文本中“5.2 衍生过程”操作，结果见图3。图3 衍生剂用量与衍生产物响应值关系图通过实验可以看出，当衍生试剂量达100 L时，衍生产物的峰面积随着衍生试剂量的增加而趋于平稳，因此，可以确定衍生试剂量为100 L为最佳使用量。在衍生试剂最佳使用量确定后，课题组对衍生化反应的时间进行了确定，在衍生试剂量为100 L时，分别对衍生5 min、10 min、15 min、20 min、25 min、30 min、35 min的衍生效率进行了比较，见图4。图4 衍生时间与衍生产物响应值关系图从以上实验数据可以看出，衍生化时间为15 min时，衍生产物的响应值最大，因此可以确定衍生的最佳时间为15 min。1.3 色谱条件的优化在由原标准GB/T 5009.119-2003中，分析二氨基甲苯所用的色谱柱为填充柱，课题组结合二氨基甲苯衍生物的化学性质，对DB-5MS与DB-1701MS两种不同的色谱柱的分析效果进行了比较，谱图见图5。图5二氨基甲苯衍生物在两种不同色谱柱上的谱图(a.DB-1701MS色谱柱；b.DB-5MS色谱柱)从图5可以看出，二氨基甲苯在DB-5MS型色谱柱的分离效果、色谱峰型和响应值要好于DB-1701MS。1.4 气相色谱-质谱条件的优化为了保证修订方法的适用性，课题组在修订原有标准的基础上增加了气相色谱-质谱法，采用全扫描的方式对二氨基甲七氟丁酸酐的衍生产物进行检测，见图6。图6 二氨基甲苯衍生产物的GC-MS全扫面谱图从图6可以看出，二氨基甲苯衍生物的特征离子为514、345、495、317，为了保证GC-MS的灵敏度，采用选择离子扫面的方式进行检测，从而进一步保证检测结果的准确性。二氨基甲苯衍生物的GC-MS/SIM谱图见图7。图7 二氨基甲苯衍生物的GC-MS/SIM谱图（浓度为0.01 g/mL）2 方法检出限根据仪器的灵敏度和目标化合物的残留量，在本方法的条件下，气相色谱法和气相色谱-质谱法在S/N=10时，检测低限（LOD）均为0.001 mg/L。3 实验室内回收率与精密度在空白样品中进行添加回收试验，按照标准文本的前处理进行操作。添加浓度分别为方法检出限的1、2、4倍水平，二氨基甲苯的平均回收率在70.1%86.2%之间，相对标准偏差（RSD，n=6）在2.5%13.1%之间。方法的回收率和精密度符合GB/T 27404-2008实验室质量控制规范 食品理化检测对回收率和精密度的要求。4 实验室间方法验证本标准中第一法和第二法经3家实验室分别做3个样品中二氨基甲苯含量的3个水平的添加回收实验进行验证，方法的总体平均回收率范围为74.8%88.8%之间，总体平均相对标准偏差在5.3%13.6%之间。本方法室间精密度符合GB/T 27404-2008中规定的相关要求。三、国内外有关法律、法规和标准情况的说明我国目前只有国家标准GB/T 5009.119-2003、质检总局行业标准SN/T 2277-2009以及地方标准DB34/T 1769-2012等三个标准，方法存在两点不足：首先是使用二氯甲烷溶剂进行提取，该溶剂含卤素，对气相色谱的电子捕获检测器损害较大；另外是二氨基甲苯易溶于水，如果不采取方法降低其在水中的溶解度，实验证明萃取效率很低。SN/T 2277-2009方法采用固