课件：钙磷镁测定.ppt

第十二章 钙磷镁和微量元素检验,目标： 钙、磷、镁代谢情况及功能 微量元素的功能 它们的测定方法,钙磷占第五、六位 镁占第十一位,微量元素有重要的生物作用和临床意义,第一节 概述,一、钙、磷代谢和调节,二、镁代谢和生理功能,三、微量元素与疾病,一、钙、磷代谢和调节,（一）钙代谢：,1. 钙的含量、分布和血钙,骨：99% 体液、组织：1%,可扩散钙：影响代谢、功能,非扩散钙：与血浆蛋白结合,血钙受H+影响：,pH升高-结合钙增加-Ca2+减少,H+ Ca2+ =K- HCO3-,2. 钙的吸收和排泄,影响吸收的因素：,VD3 年龄 溶解状态：乳糖、乳酸、氨基酸提高 草酸、植酸抑制 Ca:P=2:1时，吸收最好,排泄：,肠道：食物中未吸收及肠道分泌钙 肾脏：点总排钙量的20%,（三）磷代谢：,分布：,骨：86%,各组织体液：14%,吸收：易吸收，较少缺磷 排泄：肾脏。排泄量可血中磷酸盐成正比,（三）钙、磷代谢的调节,甲状旁腺素：,促进肾脏对Ca、P重吸收,促进破骨细胞生成，促进骨盐溶解,促进钙、磷重吸收,Ca2+上升,降钙素：,抑制肾脏对钙、磷的重吸收,促进骨盐沉积,抑制Ca、P吸收,降低Ca2+,VD3,促进肾脏对钙、磷的重吸收,促进溶骨作用,促进肠道Ca、P吸收,升高Ca2+,（四）钙、磷的生理功能,1. 钙的作用：,（1）凝血因子之一 （2）增强心肌收缩、降低神经肌肉兴奋性 （3）降低毛细血管通透性，减少渗出 （4）做为酶的激活剂、抑制剂 （5）激素的“第二信使”，参与代谢调节,2. 磷的作用,参与核酸、核苷酸、磷脂、磷蛋白的分子组成 参与高能磷酸化合物生成 共价修饰调节 HPO42/H2PO4是缓冲体系,二、镁代谢和生理功能,（一）镁的代谢,骨：60% 骨骼肌：20-30% 其它组织：10%,血浆中：,重碳酸、柠檬酸、磷酸盐,Mg2+,Mg-血浆蛋白复合物,（二）镁的生理功能,1. 酶的辅助因子：约300种酶需Mg2+,2. 对神经肌肉兴奋性有降低作用,三、微量元素与疾病,（一）微量元素对各种生命活动的影响,促进机体生长发育 对神经系统结构和功能的影响 内分泌的影响、 免疫系统的影响 对心血管疾病的影响 对肿瘤发生、发展和治疗 对胚胎及胎儿发育的影响,测复合物的活性,免疫化学法,（三）微量元素的生物学作用及代谢,1. 铁：,吸收：,贮量少时-吸收多 酸性-吸收多 Fe2+比Fe3+ -吸收多,代谢：Fe2+-Fe3+ -运铁蛋白-合成血红素,功能：合成血红素-血红蛋白、肌红蛋白、细胞色素、过氧化物酶、过氧化氢酶,2. 锌,分布：,肌肉：62.2% 骨： 28.5%,功能：1. 与酶的合成与活性有关 2. 与免疫功能有关,3. 铜,吸收：肠粘膜-合成铜蓝蛋白,排出：胆道-肠道,功能：1. 参与许多酶的组成 2. 促进Fe3+-Fe2+，促进铁吸收,4. 硒：,肠道吸收-尿汗排出,多种酶的组成成分。如谷胱苷肽过氧化物酶,抗氧化作用,5.铬,葡萄糖耐量因子-使胰岛素与受体形成-S-S-键,6. 锰 参与多种酶的组成（精氨酸酶、丙酮酸羟化酶、过氧化物岐化酶等）,8. 钼,骨牙中。对骨牙形成有重要作用,黄嘌呤氧化酶、醛氧化酶、亚硫酸氧化酶,9. 氟,10. 碘 甲状腺素T3、T4合成,（一）钙测定,第二节 钙、磷、镁和微量元素测定,一、血清钙、磷、镁的测定,1. 离子钙的测定： 离子选择电极法,2019/4/19,24,可编辑,（二）总钙测定,1. 邻甲酚酞络合酮比色法：,2. 甲基麝香草酚蓝法 碱性溶液中与钙螯合-淡绿变蓝,3. 原子吸收分光光度法 高温-Ca2+-气态钙离子-吸收422.7nm光谱,4. EDTA络合滴定法,碱性下-Ca2+与钙红结合-淡红色 EDTA滴入-夺取Ca2+-钙红重新游离-变蓝色,（二）血清磷的测定,磷钼酸还原法 磷酸盐与钼酸-无色磷钼酸- 加还原剂-蓝色复合杂聚物钼蓝,2. 磷钼酸非还原法 酸性溶液中磷酸+钼酸铵-磷钼酸铵杂聚化合物,3. 酶法,（三）血清镁的测定,原子吸收分光光度法： 镁灯-激发-285.2nm光谱-标本中基态镁原子蒸汽吸收-吸收量与镁浓度成正比,2. 甲基麝香草酚蓝法 碱性溶液中与镁螯合-蓝紫色化合物,3. Calmagite比色法 碱性下，镁与Calmagite染料生成紫红色化合物,4. 达旦黄比色法,碱性下-Mg2+-Mg(OH)2胶体-与达旦黄生成橘红色复合物,二、尿液中钙镁磷的测定,先将尿液酸化，溶解尿中盐,三、铁、铜、锌测定,（一）铁测定,1. 血清铁,酸性-Fe3+与运铁蛋白分离-还原剂- Fe2+-络合显色剂-比色测定,2. 总铁结合力,加过量Fe-使运铁蛋白饱和- 除去多余Fe2+-上清-测Fe,+,甘氨酰甘氨酸,肽键,(二）铜测定,1. 原子吸收分光光度法,2. 血清铜比色法,稀酸Cu2+与蛋白分离-除蛋白-上清与二乙基二醇代氨基甲酸钠-金黄色化合物,（三）锌测定,酪氨酸残基和色氨酸残基与酚试剂的磷钨酸、磷钼酸-蓝色化合物,加上Cu2+,结合双缩脲法，提高灵敏度,适于测单一蛋白，且适用于蛋白含量较少的样品,4 比浊法,酸性试剂+蛋白质-沉淀,5 染料结合法,酸性条件下，蛋白质-NH3+酪，与染料中阴离子产生颜色反应。,氨基黑、考马斯亮兰,6 紫外分光光度法,色氨酸、酪氨酸 在280nm有吸收峰,保持蛋白活性,7 折光测定法,溶于溶液中的固体可增加它的光折射率,固定波长、固定温度下，光折射率与蛋白浓度成正比,血清总蛋白-临床意义：,升高：多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症等。,降低：白蛋白合成减少，或蛋白丢失,二、血清白蛋白测定,1. 染料结合法,白蛋白与染料结合，球蛋白很少与染料结合,溴甲酚绿，溴甲酚紫,白蛋白（pH4.2, +) +BCG-蓝绿色化合物-OD与白蛋白浓度成正比,2. 盐析法,球蛋白先沉淀,3. 电泳法,4. 2免疫化学法,抗原抗体反应；抗体过量,临床意义,合成减少,吸收减少,丢失过多,七、脑脊液蛋白质测定,脉络膜的毛细血管壁超滤形成，及少量中枢神经系统合成,浊度法,染料结合法：考马斯亮兰，邻苯三酚红钼络合显色法。,临床意义：,神经系统疾病,血脑屏障通透性增加；血管性脑水肿，细胞含量过多，神经细胞坏死等,三、血清球蛋白测定,球蛋白中色氨酸占2%，而白蛋中仅0.2%,乙酰色氨酸+乙醛