毕业论文答辩-槲皮素脂质纳米粒的制备与表征

1、槲皮素脂质纳米粒的制备与表征班 级：10制药二班学 号：06210211姓 名：徐敏洁指导教师：夏 强 老师 傅志贤 老师毕业设计答辩123研究背景与意义研究方案总结与展望毕业设计答辩4参考文献研究背景与意义研究方案研究背景与意义槲皮素的概述 化学名：3,3, 4,5, 7-五羟基黄酮 分子式：C5H10O 7 结构 ：黄酮类化合物 功效：抗氧化作用 皮肤增色及保护作用槲皮素的理化性质 外观：黄色针状结晶 熔点：313-314 分子量：302 化学性质：呈弱酸性 不稳定性：氧气 光照 PH 金属离子 3. 本课题旨在利用合适的微纳米载体包裹槲皮素，改善其化学稳定性，并提高该成分的生物利用度，使

2、其能够更好的应用于食品和化妆品领域。1.解决槲皮素的稳定性和水溶性问题，提高该成分的生物利用度。 2.与此同时，活性物载体可提高活性物的溶解性，使活性物易于吸收；研究方案制备制备 在筛选良好脂质和在筛选良好脂质和乳化剂的基础上，将槲乳化剂的基础上，将槲皮素、脂质以及乳化剂皮素、脂质以及乳化剂溶解于油相，在水浴锅溶解于油相，在水浴锅中与水相混合，制成初中与水相混合，制成初乳，经冷却和分散，制乳，经冷却和分散，制备成水溶性稳定性较好备成水溶性稳定性较好的槲皮素脂质纳米粒。的槲皮素脂质纳米粒。槲皮素槲皮素脂质纳米粒脂质纳米粒表征表征 考察槲皮素脂质纳米考察槲皮素脂质纳米粒的理化稳定性，不同粒的理化稳

3、定性，不同储存条件（温度、时间储存条件（温度、时间、稀释倍数、离心、升、稀释倍数、离心、升温、冻融条件）对温、冻融条件）对QT-NLCs水分散液的影响水分散液的影响，以及槲皮素脂质纳米，以及槲皮素脂质纳米粒的抗氧化功能评价。粒的抗氧化功能评价。脂质筛选一：脂质（2g）厂家75/g冷却后状态硬脂酸上海联试0.0011槲皮素析出羊毛脂方登化工0.0025槲皮素析出PGMS河南正通0.0037槲皮素析出三山俞精莱宝康日化0.0092槲皮素析出C-18A上海和一0.0013槲皮素析出GMS浙江硕亚0.0086相容性较好单桂酸甘油酯GML河南正通0.0153相容性好乙酰化单甘酯河南正通0.0100相容性

4、好GMS山东新星0.0098相容性好肉豆蔻酸国药集团0.0012几乎不溶SSL郑州奥尼斯特0.0009几乎不溶大豆磷脂上海联合0.0011几乎不溶脂质筛选二：脂质（2g）厂家75/g冷却后状态双乙酸酒石酸单甘油酯郑州奥尼斯特0.0010几乎不溶大豆卵磷脂北京美亚斯0.0012几乎不溶十八酸十八酯上海倍特0.0056槲皮素析出柠檬酸单甘脂郑州食品0.0013几乎不溶PGFE-3上海和一0.0008几乎不溶FSL007兴泰0.0007几乎不溶S-40南京威尔0.0147相容性较好三乙酸甘油酯北化试剂0.0102相容性较好维生素E醋酸酯上海和一0.0021槲皮素析出丙二醇北化试剂0.2012槲皮素析

5、出1,3-丁二醇国药集团0.0212槲皮素析出乙酸乙酯河南正通0.0028几乎不溶脂质筛选三：脂质（2g）厂家75/g冷却后状态丁基辛醇水杨酸酯上海上德0.0103相容性较好油茶籽油上海嘉里0.0019槲皮素析出葵花籽油上海嘉里0.0011几乎不溶椰子油上海嘉里0.0031几乎不溶花生油中粮食品0.0021槲皮素析出辛癸酸甘油酯河南正通0.0052相容性较好橄榄油品利0.0021槲皮素析出葡萄籽油广州博谊0.0023槲皮素析出玉米油福临门0.0024槲皮素析出一缩二丙二醇方登化工0.0028几乎不溶甘油方登化工0.0390相容性较好乙氧基二甘醇上海浦恩0.4102相容性好复配脂质对QT的溶解情

6、况：脂质（2g）比例75/g冷却后状态CG:BHB1：10.2黄色澄清溶液CG:GMS4：10.32黄色澄清溶液CG:BHB:GMS4：4：10.30黄色澄清溶液 根据以上单一的脂质筛选结果，选择GMS、CG、BHB进行复配。乳化剂筛选：乳化剂（0.5g）脂质（1g）75/g冷却后状态P-6CG:BHB:GMS=4：4：10.0103溶液粘稠P-10CG:BHB:GMS=4：4：10.0101溶液粘稠F-17CCG:BHB:GMS=4：4：10.0101槲皮素析出PGPRCG:BHB:GMS=4：4：10.0106槲皮素析出PGECG:BHB:GMS=4：4：10.0101槲皮素析出Tween

7、20CG:BHB:GMS=4：4：10.0104溶液粘稠Tween80CG:BHB:GMS=4：4：10.0107溶液粘稠SPCCG:BHB:GMS=4：4：10.0104槲皮素析出SE-15CG:BHB:GMS=4：4：10.0103槲皮素析出SE-11CG:BHB:GMS=4：4：10.0105溶液粘稠A2010CG:BHB:GMS=4：4：10.0102溶液粘稠P-135CG:BHB:GMS=4：4：10.0803溶液澄清均一L-23CG:BHB:GMS=4：4：10.0201溶液澄清均一Olivem-1000CG:BHB:GMS=4：4：10.0203溶液澄清均一脂质筛选及乳化剂筛选结

8、果：成分成分名称名称脂质液态脂质CG,BHB固态脂质GMS乳化剂油包水P-135水包油L-23，O-1000图1：制备流程图图2：三个体系的原液样品槲皮素脂质纳米粒表征 1.物理稳定性考察： 静置稳定性 离心稳定性 稀释稳定性 升温稳定性 冻融稳定性 pH稳定性 2.化学稳定性检测： 紫外-可见光谱法测含量： 对制备得到的槲皮素纳米结构脂质载体进行破乳，利用紫外 分光光度计检测槲皮素的含量。 超滤离心法测包封率： 3. 抗氧化功能评价： 清除DPPH自由基法 抑制率 = .(%)1100%WfreeE EW（）总0S1-1AAA 槲皮素脂质纳米粒的表征静置稳定性方法： 将样品分别密封存放于4、

9、25、40下，避光静置7天、15天和30天，通过PCS测量其粒径、PDI变化情况。-0.2-0.10.00.10.20.30.40.5140160180200220Mean SizeDaysMean Size 0% water system 6% water system 11% water systemPDI6122030 PDI 0% water system 6% water system 11% water system-0.10.00.10.20.30.40.50.60.7150180210240270300Mean Size/nmDaysMean Size 0% water sys

10、tem 6% water system 11% water systemPDI6122030 PDI 0% water system 6% water system 11% water system-0.2-0.10.00.10.20.30.4140160180200Mean Size/nmDaysMean Size 0% water system 6% water system 11% water system6122030 PDI 0% water system 6% water system 11% water systemPDI4 25 40 槲皮素脂质纳米粒的表征离心稳定性方法： 考

11、察三个体系在10000 rpm的高速离心不同时间后的粒径、PDI及外观变化。-0.2-0.10.00.10.20.30.40.5100150200250300350400Mean Size 0% water system 6% water system 11% water systemMean Size/nm05PDIPDI 0% water system 6% water system 11% water system Time/min102030槲皮素脂质纳米粒的表征升温稳定性方法： 取QT-NLC样品，将其平均分成6份，将这6份放入不同的恒温培养箱储存，温度分别为20、30、40、50、

12、60和70 ，通过PCS考察粒径和PDI。-0.3-0.2-0.10.00.10.20.30.40.50.6180210240270Mean Size/nmMean Size 0% water system 6% water system 11% water system Temperature/oCPDI 0% water system 6% water system 11% water systemPDI203040506070槲皮素脂质纳米粒的表征冻融稳定性-0.8-0.40.00.40.81.21.6100200300400500600700800900100011001200Mean

13、 Size/nmMean Size 0% water system 6% water system 11% water systemPDI Time/minPDI 0% water system 6% water system 11% water system03060120180方法： 取QT-NLC样品，将其平均分成5份，将这5份放入-20的冰箱冷冻0、30、60、120和180 min，取出后进行PCS测试，进行粒径和PDI的考察。槲皮素脂质纳米粒的表征pH稳定性-0.45-0.30-0.150.000.150.300.450.600.75200250300350Mean Size/nm

14、pHMean Size 0% water system 6% water system 11% water systemPDI3.04.05.06.07.08.0 PDI 0% water system 6% water system 11% water system方法： 利用柠檬酸缓冲液和磷酸盐缓冲液将QT-NLC水分散液稀释成不同pH的水分散液，对不同pH条件下的粒径和PDI进行测试。槲皮素脂质纳米粒的表征稀释稳定性方法： 将同一批次的槲皮素脂质纳米粒，分别在稀释不同倍数后进行离心，观察是否分层，随后测量其粒径与分布情况，来判断体系的稳定性。-0.45-0.30-0.150.000.15

15、0.300.450.60150180210240270Mean Size/nmMean Size 0% water system 6% water system 11% water system2050100200Dilution factorPDIPDI 0% water system 6% water system 11% water system槲皮素脂质纳米粒的表征包封率测试2003004005006000.00.20.40.60.8Abs.Wavelength nm. Abs.图1：QT-无水乙醇溶液的紫外扫描图图2：QT-无水乙醇溶液的标准曲线体系体系吸光吸光度度浓度浓度/ug*m

16、l-1Wt/ug*ml-1 Wf/ug*ml-1包封率包封率/%无水0.13770.33767.46.7486.36%6%水0.31192.084416.841.6891.34%11%水0.34742.44048848.894.52%373.5nm02468100.20.40.60.81.0 B Linear Fit of BAbsconcentration/ug*ml-1Equationy = a + b*Adj. R-Squa0.99995ValueStandard ErrBIntercept0.10410.00138BSlope0.09972.4604E-4y=0.1041+0.0997

17、x清除DPPH自由基法测抗氧化性DPPH水水待测样待测样乙醇乙醇517nmA03.9ml100ulA13.9ml100ulAS100ul3.9ml体系体系抑制率抑制率抑制率（空白）抑制率（空白）无水体系56.7%5.12%6%水体系90.6%17.03%11%水体系90.3%16.20% 可见三种负载槲皮素2%的体系具有较好的DPPH自由基抑制率，并且是由于槲皮素本身的抗氧化功效性，而非配方内的其他物质。0S1-1AAA DPPH自由基抑制率 =总结与展望02468100.20.40.60.81.0 B Linear Fit of BAbsconcentration/ug*ml-1Equati

18、ony = a + b*Adj. R-Squa0.99995ValueStandard ErrBIntercept0.10410.00138BSlope0.09972.4604E-4y=0.1041+0.0997x1Torchilin, V.Drug targetingJ. European Journal of Pharmaceutical Sciences2000.S81-S91.2温涛, 贾涛, et al.纳米载体药物应用的研究进展J. 药学学报2003.003:236-240.3鲍廷铮，王庆伦，廖志辉.槲皮素的研究近况J. 江西中医学院学报 1998.2:90-91.4袁鹏群，纳米技术在药物研究领域中的应用J. 解放军药学学报2001.